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膜联蛋白1(ANXA1)功能的研究进展
膜联蛋白(Annexins)是一类钙依赖的磷脂结合蛋白超家族,研究发现其普遍存在于除细菌外的动物、植物及菌类多种生物体内,几乎所有器官中均有表达.ANXA1是该家族第一个被发现的成员,参与抗炎症反应、细胞分化和增殖、细胞死亡信号调控、凋亡细胞吞噬清除等许多细胞生命活动.本文对ANXA1功能的研究进展作一综述.
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ANXA1高表达对树突状细胞功能成熟的影响
为了研究抗炎因子膜联蛋白1(ANXA1)高表达对单核细胞来源树突状细胞(MoDCs)功能成熟的影响,我们将构建的ANXA1高表达质粒(pShuttle-CMV-ANXA1)转染到TNF-α诱导成熟的MoDCs(TNF-α-MoDCs)中,用流式细胞术检测高表达ANXA1对MoDCs表面分子的影响,用ELISA法检测高表达ANXA1对MoDCs分泌细胞因子的影响.与对照质粒相比,ANXA1高表达质粒可引起TNF-α-MoDCs表达HLA-DR上调,分泌IL-12p40上调,吞噬能力及IL-10下调.ANXA1高表达质粒可以引起TNF-α-MoDCs进一步成熟,ANXA1可能在树突状细胞功能成熟过程中起着独特的作用.
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ANXA1的克隆,表达及对树突状细胞转染的方法
膜联蛋白1(ANXA1)是一种抗炎因子,但是ANXA1对单核细胞来源树突状细胞(monocyte-derived dendritic cells,MoDCs)功能成熟的影响还未见报道.首先以pShuttle-CMV为载体,通过一系列分子克隆技术,构建了ANXA1高表达质粒pShuttle-CMV-ANXA1.笔者将pShuttle-CMV-ANXA1转染细胞株293a,用western-blot法验证ANXA1高表达情况.结果表明,pShuttle-CMV-ANXA1可引起293a表达ANXA1增高;表明,pShuttle-CMV-ANXA1构建是成功的.然后,用脂质体转染试剂GenePorterⅡ将荧光对照质粒pShuttle CMV-VNG-IRES转染TNF-α-MoDCs.通过镜下荧光可知,GenePorter Ⅱ将对照质粒转染MoDCs的效率＞80%;表明,GenePorterⅡ是一种较好的转染MoDCs的方法.用GenePorterⅡ将pShuttle-CMV及pShuttle-CMV-ANXA1转染TNF-α-MoDCs,通过westem-blot法检测ANXA1在TNF-α-MoDCs中的高表达情况.结果表明,与pShuttle-CMV相比,pShuttle-CMV-ANXA1可引起TNF-α-MoDCs高表达ANXA1;成功将pShuttle-CMV-ANXA1转入MoDCs,并得到表达.GenePorterⅡ转染树突状细胞的新方法,简单高效,为进一步研究ANXA1对MoDCs的生物学功能奠定了基础.获得的高表达ANXA1的树突状细胞,可望在自身免疫病及移植排斥反应中得到应用.
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肝组织中膜联蛋白Ⅰ的表达与原发性肝癌病理机制的相关性
目的 探讨原发性肝癌组织中膜联蛋白Ⅰ (annexin-1,Anx-A1)的表达及意义.方法 采用免疫组化和免疫印迹方法检测肝癌组织及其相对应癌旁正常组织中Anx-A1的表达水平,分析其与临床病理形态学变化的关系.结果 肝癌组织中Anx-A1的表达水平高于癌旁正常组织;在低分化癌组织中的表达水平与高分化癌组织中的表达水平比较,差异不显著(P＞0.05)；转移癌组织中的表达量明显高于非转移癌组织中的表达量(P＜0.05).结论 Anx-A1在肝癌组织中表达上调,可能与肝癌的发生与演变相关.
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ANXA1与FPR1在胃癌组织中的表达及意义
目的 检测胃癌组织中膜联蛋白1(ANXA1)与甲酰肽受体1(FPR1)的表达,探讨其变化与胃癌发生发展的关系.方法 采用免疫组化法(IHC)对80例胃癌组织中的ANXA1与FPR1的表达情况进行检测,并分析与临床病理资料间的关系.结果 免疫组化结果显示,ANXA1在胃癌中的阳性表达率为90.0％(72/80),ANXA1过度表达与胃癌的淋巴结转移呈高度相关(P＜0.05).FPR在胃癌中的阳性表达率为57.5％ (46/80),FPR1表达与患者性别、胃癌的淋巴结转移相关(P＜0.05).ANXA1与FPR1之间没有相关性.结论 ANXA1与FPR1的表达在胃癌的发生发展中可能起着重要作用.
