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FHL2调控Id2功能活性的研究
目的:探讨FHL2对Id2蛋白功能的调控效应.方法:将E47、 5xE-Box-Luc、 pRL-SV40、 Id2以及FHL2表达载体分别共转染MCF-7、 293T以及SH-SY5Y细胞,双荧光素酶报告基因方法检测不同转染组细胞中的相对荧光素酶活性.结果:三个细胞系中E47均显著上调了报告基因的表达, Id2抑制了E47的转录激活活性,而FHL2通过与Id2相互作用显著消弱了Id2对E47功能的抑制效应.结论:通过相互作用FHL2抑制了Id2蛋白的功能活性,FHL2是一个新的Id2蛋白功能抑制子.
关键词： FHL2 Id2 蛋白质相互作用域和基序 阻遏蛋白质类 -
经典转化生长因子β/Smad信号和Wnt/β-catenin信号间的相互作用
TGF-β信号通路是调节细胞生长和分化的的重要通路,此外还参与纤维化疾病发生和肿瘤发生发展的调控.Wnt信号通路是调节胚胎发育和肿瘤侵袭转移的重要通路.近10年来研究表明,这两条通路在调节胚胎发育、纤维化疾病发生以及肿瘤的演进等过程中共同发挥着重要作用,两者之间存在着密切联系,这两条通路存在Smad、轴蛋白(Axin)、蓬乱蛋白(Dvl)和β-连环蛋白(β-catenin)几个典型的相互作用的交叉点.本文着重阐述经典的TGF-β信号通路和Wnt信号通路在这几个交叉点的相互作用模式,以更好地应对纤维化疾病和肿瘤的进展.
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人肺腺癌转移差异蛋白质生物信息学分析
目的 对无转移肺腺癌和有转移肺腺癌表达差异蛋白质进行生物信息学分析.方法 利用Cytoscape软件对前期发现无转移肺腺癌和有转移肺腺癌表达差异的20个蛋白质进行基因本体论(GO)功能富集分析和蛋白质相互作用网络构建.结果 20种肺腺癌转移差异表达蛋白质的主要生物学过程为葡萄糖分解和酒精分解等过程,主要分子功能为磷脂酶A2抑制剂活性和钙依赖的磷脂结合,蛋白质相互作用网络为包含245种不同蛋白质和230种不同蛋白质相互作用关系.结论 葡萄糖分解过程、酒精分解过程、磷脂酶A2抑制剂活性和钙依赖的磷脂结合及ACTB、ANXA1、ANXA2、ANXA3、VCP、NPM1、KRT1、SUMO4等关键蛋白质在人肺腺癌转移过程中发挥重要作用,为进一步研究提供线索.
关键词： 肺肿瘤/病理学 腺癌/病理学 蛋白质组学 蛋白质相互作用域和基序 肿瘤转移 -
瘢痕疙瘩分泌性卷曲相关蛋白2与骨母细胞特异性因子2的相互作用
目的 验证分泌性卷曲相关蛋白2(SFRP2)与骨母细胞特异性因子2(OSF-2)的相互作用.方法 构建能在哺乳动物细胞中表达带人膜联蛋白(HA)标签的OSF-2融合蛋白重组载体pCMV-HA-OSF-2,经酶切鉴定确认后,与Myc-SFRP2重组真核表达载体pCMV-HA-SFRP2单独或共转染人HK293细胞,利用免疫共沉淀技术及蛋白质印迹法验证OSF-2与SFRP2的相互作用.结果 重组载体经酶切电泳后,显示近800 bp处的条带为酶切后的目的 片段SFRP2编码基因,近2500 bp处的条带为酶切后目的 基因OSF-2.表明pCMV-Myc-SFRP2和pCMV-HA-OSF-2均构建成功.HK293细胞单独转染pCMV-Myc-SFRP2或pCMV-HA-OSF-2后,未检测到HA-OSF-2的表达;当pCMV-Myc-SFRP2和pCMV-HA-OSF-2共转染后,经Myc抗体进行免疫沉淀可见HA-OSF-2表达.结论 HA-OSF-2的重组载体能在哺乳动物细胞中表达,HA-OSF-2与SFRP2间存在相互作用.
