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齐墩果酸和去氧胆酸衍生物合成及抗血管生成活性研究
目的 合成齐墩果酸、去氧胆酸-丙酮基衍生物并评价2者对新生血管生成的影响.方法 以丙酮/K2CO3作为反应体系,利用溴代川芎嗪分别与齐墩果酸和去氧胆酸发生亲核取代反应,得到齐墩果酸和去氧胆酸衍生物.采用鸡胚绒毛尿囊膜模型(chorioallantoic membrane,CAM)对其进行在体新生血管活性评价.结果 产物结构经1H-NMR、13C-NMR及IR确证为齐墩果酸乙酰甲酯和和去氧胆酸乙酰甲酯;二者作用于CAM模型后,新生血管的数目均比空白组减少.结论 在丙酮/K2CO3/溴代川芎嗪反应体系中,得到齐墩果酸和去氧胆酸-丙酮基衍生物;经CAM模型测试发现去氧胆酸-丙酮基衍生物对新生血管具有较好抑制活性.
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鸡胚绒毛尿囊膜数字图像血管定量分析
目的:以生物医学工程的角度,研究基于数字图像处理技术的鸡胚绒毛尿囊膜图像血管自动分析方法,设计和研制专用实验检测系统. 方法:实验于2005-06/2007-06分别在上海理工大学医疗器械与食品学院中心实验室和上海中医药大学进行.根据鸡胚绒毛尿囊膜血管图像的特点,研究和开发了包括鸡胚绒毛尿囊膜血管数字图像背景褪色、血管增强、背景和血管定标、标尺校准、血管测量区域划分、血管面积及面积比参数测量等主要分析软件,以及相应的测量分析系统.通过实验检验分析方法和测量参数,并对分析系统进行改进.结果:建立了有效的鸡胚绒毛尿囊膜数字图像血管自动分析的方法和步骤,研制了专用的实验分析系统.通过药物实验对鸡胚绒毛尿囊膜血管图像进行了参数检测,获取了多组实验数据,并进行了统计分析.统计分析结果显示试验药物有抑制血管生长作用,且作用大小呈剂量依赖关系.结论:经实验证明基于数字图像处理技术的鸡胚绒毛尿囊膜图像血管自动分析方法能提供可靠的鸡胚绒毛尿囊膜模型定量分析数据,并且在分析速度、测量精度、数据重复性等方面均优于常规人工目测血管计数方法.
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葛根素对子宫内膜异位症细胞恶性行为调控机制研究
目的:观察葛根素对子宫内膜异位症(endometriosis,EM)血管形成的影响以及葛根素对EM肿瘤相关基因的调控作用.方法:利用子宫内膜细胞原代培养技术、鸡胚绒毛尿囊膜(chicken ehorioallantoic membrane,CAM)模型、基因芯片等方法,了解EM肿瘤相关基因表达的情况,观察葛根素对EM血管生成、肿瘤相关基因的调控作用.结果:葛根素可明显抑制种植内膜组织囊泡及周边血管形成,其血管阳性面积显著小于模型组(P <0.05).基因芯片结果显示.增殖期EM在位内膜组织较之正常在位内膜组织、EM异位内膜组织较之EM在位内膜组织,在癌基因,抑癌基因,细胞黏附、侵袭、转移、血管生成相关基因及细胞凋亡相关基因表达方面有明显不同.100μmol/L葛根素可明显上调EM在位基质细胞凋亡基因BAD、BAX、CASP8、CASP9和TNFRSF6表达,并增强细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子CDKN1B、CDKN2A及IFNA1、IFNB1基因表达;减少癌基因FOS、CHEK2、SRC和黏附侵袭基因ITGB5、MMP9及生长、转录因子基因PDGFA、NFKBIA表达.结论:葛根素能够抑制异位灶新生血管的形成.减少异位灶的血液供应;通过调整EM癌基因、抑癌基因、细胞周期相关因子基因表达,并通过影响凋亡相关基因的表达.促进细胞凋亡,从而改变EM内膜细胞类似肿瘤细胞的恶性行为.
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总序香茶菜醇提取物对鸡胚绒毛尿囊膜血管新生作用的影响
目的 探讨总序香茶菜醇提取物对鸡胚绒毛尿囊膜血管新生的影响.方法 取8日龄鸡胚随机分成9组,即生理盐水阴性对照组、沙利度胺阳性对照组、空白血清组、总序香茶菜醇提取物低(100mg/kg)、中(200mg/kg)、高(400mg/kg)剂量给药血清组及低(2.5mg/ml)、中(5.0mg/ml)、高(10.0mg/ml)剂量生药组.建立CAM模型,培养48 h后采集数据,利用Image_ProPlus 6.0软件,定量血管新生面积、蛋壳开窗处对应的CAM面积,计算血管新生面积与CAM面积的比值.结果 总序香茶菜醇提取物中、高剂量给药血清组和高剂量生药组的血管新生面积均明显低于生理盐水对照组(P＜0.05).结论 总序香茶菜醇提取物能明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管新生.
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鸡胚绒毛尿囊膜模型在微血管实验研究中的应用
鸡胚的绒毛尿囊膜薄膜 (CAM),作为胚胎的呼吸器官,在第4天和第5天的胚胎发展期间由被膜尿囊内脏中胚层和绒毛膜中胚层融合而成[1].CAM是鸡胚孵化至第19天的(总期间 21 天) 气体交换的呼吸器官,是具有丰富血管的薄膜. CAM微循环具有连续的微血管分叉状扩张[1], 在生理状态下, 承担适应发育中的胚胎氧需求.鸡胚CAM血管系统的发育既复杂又高度程序化.CAM血管生长于正常的鸡胚发育期间,经观察大体上经过早、中和晚三期:早期(从第5天到第7天) 通过毛细血管以"出芽"方式生长;中期 (从第8天到第12天) 是普遍的吸收式微血管的生长,毛细血管内壁内皮细胞交通形成网络;晚期(从第13天到第19天) 是CAM毛细管网络扩充期,至此CAM达到它成熟的形态学[2].
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益气养阴方抗血管生成作用的实验研究
目的:探讨益气养阴方抗鸡胚绒毛尿囊膜(Chick chorioa-llantoic membrane,CAM)血管及肿瘤细胞诱导CAM血管生成的效应.方法:制备CAM模型及接种肿瘤细胞的CAM模型,采用血清药理学方法制备含药血清.观察含药血清对CAM血管和肿瘤细胞诱导CAM血管生成的影响,并与生理盐水血清组对照.结果:益气养阴方含药血清可抑制CAM血管及肿瘤细胞诱导的CAM血管生成,各剂量含药血清组血管数目(高剂量组:9.662±0.599,中剂量组:9.682±0.818,低剂量组:10.242±0.640)与血管面积(高剂量组:887 8.500±187 0.115,中剂量组:936 9.750±320 6.427,低剂量组:112 26.875±266 5.071,mm2)均较对照血清组(10.511±0.990,127 59.375±437 9.058,mm2)明显减少,与生理盐水对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:益气养阴方对血管生成有明显抑制作用.
