首页 > 文献资料
-
犬心室肌3层细胞的分离定位方法
随着膜片钳技术的逐渐推广和心肌电异质性等研究领域的发展,对犬等大型动物的应用越来越多,往往也需要对犬心室肌心外膜下细胞(Epi细胞) 、中间层细胞(M细胞)和心内膜下细胞(Endo细胞)进行准确的定位和分离.成功分离犬心肌细胞并使其保持良好状态是决定整个实验成败的核心环节.现将我们近3年来分离定位犬心室肌细胞的经验简介如下.
-
兔R-on-T室性早搏的时程特征与致心律失常易损窗的关系
目的 观察动作电位时程异质性如何影响致心律失常易损窗,以及了解 R-on-T室性早搏的时程特征与单向传导阻滞及折返激动易损窗的关系.方法 采用冠状动脉灌注兔左室楔形组织块标本,同步记录内、外膜侧心肌细胞动作电位和跨壁心电图.内、外膜侧动作电位时程(APD)的差值(△APD)反映了心室壁跨壁异质性.对标本施加基础刺激(S1) ,刺激周长分别为2 000,1 000,500 ms.每10次S1后施加S2.S1S2间期以1ms的步长递增,诱发单相传导阻滞和室性心律失常, 并分别测量致单向传导阻滞及折返激动易损窗.结果 引起单向传导阻滞的易损窗大于产生折返激动的易损窗,当进一步加大复极离散性时才可能引发折返激动.S1刺激诱发室性心动过速时,其R-on-T早搏的时程明显较单纯引起一次心室激动增宽(70.0±15 ms vs 56.1±11 ms,P＜0.001).结论 单向传导阻滞及折返激动的易损窗与S1刺激所引起心室复极异质性增大有关.R-on-T室性早搏只有在更大的复极梯度状态下,才可能诱发折返激动和室性心动过速、心室颤动.
-
犬右室瞬间外向钾电流异质性的研究
应用全细胞钳制技术对犬右室心外膜下(epi)细胞、中层(M)细胞和心内膜下(endo)细胞复极1期瞬间外向钾电流(Ito1)的强度、密度和动力学过程进行系统定量研究,以期从复极1期主要离子流的角度,探讨右室复极1期跨越室壁的电异质性.结果发现:犬右室epi细胞和M细胞存在强大的Ito1离子流,在刺激频率为0.2 Hz、37 ℃和去极化试验电压为+70 mV时,epi细胞和M细胞峰值Ito1离子流的强度分别为4 650±1 760,3 620±1 880 pA,其激活和失活动力学过程符合Boltzmann分布.与epi细胞和M细胞相比,endo细胞Ito1离子流微小,同样条件下其平均峰值Ito1离子流仅为480±130 pA.表明在右室跨越室壁的三层细胞间,特别是epi细胞与endo细胞之间、M细胞与endo细胞之间,复极1期存在明显的Ito1离子流强度差异和强大的Ito1离子流梯度,此为右室电异质性的一种突出表现,它可能是Brugada综合征等疾病所致恶性心律失常的重要离子基础之一.
-
心脏跨壁电异质性的光学标测
基础电生理测量技术中,包括膜片钳(patch clamping),微电极记录(microelectrode recording)细胞外多点标测(extracellular multisite mapping)和光学标测(optical mapping),其测量范围从直接单细胞离子通道电流至未受损标本的光学成像,但只有光学标测技术具有不接触或刺穿细胞的优点.
-
Brugada综合征
近年来,心脏结构改变微小或毫无器质性心脏病证据的致心律失常性死亡正成为日益引人注目的焦点.据估计,这些患者代表了3%～9%的与心肌梗死无关的医院外心室颤动病例.除预激综合征和长QT综合征外 ,在健康个体中一种新的猝死心电图(ECG)特征已被确定.在世界各地,这种被称为Brugada综合征(brugada syndrome, BRS)的临床病例报道正日益增多.作为一个单基因遗传疾病,和长QT综合征一样,BRS是研究心肌电异质性的一个独特模型,BRS在分子生物学、基础电生理学、心血管药理学和临床心脏病学间为我们架起了另一座直接的桥梁.
-
Cav1.2和Cav3.1在犬左心室不同部位中表达的比较
目的:研究犬左心室三层心肌L型钙通道(ICa-L)、T型钙通道(ICa-T)主要亚单位mRNA的表达情况,探讨其复极异质性的可能分子基础及意义. 方法:应用RT-PCR半定量分析犬左心室外、中、内三层心肌ICa-L α亚单位(Cav1.2)、ICa-T主要的亚单位(Cav3.1) mRNA的表达量. 结果:Cav1.2 mRNA的表达在左心室中层、内层均明显高于外层(P＜0.05),但在中层和内层之间无统计学差异(P＞0.05). Cav3.1 mRNA在外层几乎缺如,在中层、内层也只有少量表达且无明显统计学差异(P＞0.05). 结论:Cav1.2,Cav3.1 mRNA在犬左心室三层心肌中表达存在明显的差异,这种差异可能构成左心室三层心肌ICa-L及ICa-T分布差异的分子基础,在折返性心律失常的产生及药物治疗中可能起着重要的作用.
