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光卟啉对Eca-109细胞的体外光动力效应
目的 探讨光卟啉不同孵育浓度和不同孵育时间对人食管癌细胞Eca-109体外光动力治疗(pho-todynamie therapy,PDT)效应的影响.方法 以不同浓度光卟啉孵育Eca-109细胞,并给予不同孵育时间(4,6,12,24 h)(光源采用DIOMED630PDT系统)后于饱和光能量密度20J/cm2下行PDT,24 h后通过MTT法检测细胞生存率.结果 光卟啉4种不同孵育时间和不同孵育浓度间生存率差异均有显著性(均P<0.01).同一孵育时间下不同浓度间的生存率差异均有显著性(均P<0.01),而同一浓度下不同孵育时间之间的生存率,则除了浓度为0μg/ml和0.1μg/ml外差异均有显著性(均P<0.05).结论 特定光源下,光卟啉的孵育浓度和孵育时间对人食管癌细胞Eca-109体外PDT效应影响显著.
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血卟啉衍生物对人食管癌细胞体外光动力疗法效应影响的实验研究
目的:探讨血卟啉衍生物(hematoporphyrin derivative,HPD)孵育浓度和孵育时间对人食管癌细胞Eca-109体外光动力疗法(photodynamictherapy,PDT)效应的影响.方法:以不同浓度HPD孵育Eca-109细胞,并给予不同孵育时间(2、4、12、24 h),在30 J/cm2(光源采用DIOMED630PDT系统)饱和光能量密度下行PDT,24 h后通过MTT法检测细胞生存率.结果:除孵育时间为2 h外,其余3个孵育时间(4、12、24h)不同孵育浓度间的细胞生存率差异有统计学意义(P＜0.05).对于同一孵育浓度下不同孵育时间的细胞生存率,当孵育浓度＞0.75μg/mL时,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:特定光源和饱和光能量密度下,HPD的孵育浓度和孵育时间对人食管癌细胞体外PDT效应影响显著.
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Ⅰ抗孵育时间对免疫组织化学实验结果的影响
众所周知,抗原与抗体之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学技术应用这一原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究.在神经科学领域,此项技术是不可缺少的.免疫组织化学染色方法有多种类型,但在染色过程中都需要采取一些基本的技术方法,以增强抗原、抗体的特异性反应,降低或消除非特异性反应,使染色达到佳效果.其中增强特异性染色的方法有多种,调整I抗孵肓时间是其中之一.本文探讨了不同的I抗时间对免疫组织化学实验结果的影响.
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微波修复在冰冻切片免疫组化中的应用
微波修复法多用于石蜡切片,我们在长期的研究生免疫组化教学过程中,实行改良,将微波抗原修复法用于冰冻切片,取得了满意的效果,方法如:1.常规固定取脑组织冰冻切片.2.漂洗后3%H2 O2封闭10分钟,蒸馏水洗2分钟3次.3.微波抗原修复:入柠檬酸盐缓冲液(PH6. 0),用微波或电炉加热,循环3次后入1%BSA孵育15分钟.4.入一抗30分钟,转入二抗 20分钟,三抗20分钟,显色.结果讨论:1.与对照切片成比,阳性细胞染色增强,背景变浅,阳性检出率提高.由于常规的冰冻切片免疫组化方法所用的固定剂多含甲醛,醛基与蛋白质中的氨基交联,使抗原决定簇被掩盖,影响了免疫组化染色结果,使背景染色较深,阳性检出率较低.且这种作用随固定时间的增长而加重,用微波修复抗原的方法,可以使抗原决定簇暴露,有利于抗体结合.此外,部分因固定而被损伤的抗原决定簇也得到修复,因此能提高抗原的阳性检出率,增加染色强度,降低背景的非特异性染色.2.染色时间大大缩短.以往为保证染色效果,常规一抗孵育时间较长(12-24小时),而用微波修复后仅需 30分钟.因为微波修复法可使抗原暴露,利于抗原抗体结合,提高了反应速度,节省了时间 .综上所述,在冰冻切片中使用微波抗原修复的方法值得推广.
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Ⅰ抗孵育时间对免疫组织化学实验结果的影响(摘要)
为了解不同的Ⅰ抗孵育时间对免疫组织化学实验结果的影响,用成年SD大鼠脊髓L5节段制作冰冻切片(20μm)并分为两组,分别按程序1,2用NGF抗体(1:3000)作免疫组织化学ABC法染色.
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不同质量精液精子低渗膨胀试验测定时间的相关性研究
目的 探讨不同质量的精液精子,在精子低渗膨胀试验(hypo-osmotic swellingtest,HOST)中,在不同的孵育时间观察精子膜的总膨胀率,旨在寻求一种客现反映精子低渗膨胀试验的测定时间.方法 用中性红染色测定精子活率,用低渗膨胀液测定不同时间段精子总膨胀率.结果 不同活率精子与不同时间段的精子低渗膨胀试验的总膨胀率之间存在不同的差异.结论 在HOST试验中,孵育20 min能比较客现地反映精子的膨胀率,死精子在HOST试验中存在一定比例的膨胀,并随孵育时间的延长精子膜膨胀率有显著性差异.
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对酶联免疫吸附试验结果OD值影响的因素分析
为了在临床检验工作中得到更准确的结果,从而辅助临床诊断,浅谈影响酶联免疫吸附试验结果(OD值)的几个主要因素.
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不同孵育时间对δ氨基酮戊酸诱导红色毛癣菌生成原卟啉Ⅸ的影响
光动力抗菌化学疗法(Photodynamic antimicrobial chemotherapy,以下简称PACT)是一种联合应用光敏(photosensitizer)及相应光源.通过光动力学反应选择性杀灭病原微生物的治疗技术[1],其原理基于Ⅱ型光动力反应[2].近十余年来,随着新一代光敏剂的研制和开发以及耐药病原微生物的出现成为新的研究热点.有研究表明,皮肤癣菌细胞壁含有较高浓度的负电荷的特点,让其容易透过δ氨基酮戊酸(ALA),ALA在真菌细胞线粒体内转化为PpⅨ,PpⅨ激光辐照后产生单态氧(ROS),直接损伤线粒体和细胞膜从而达到杀灭皮肤癣真菌的目的[3].本研究旨在通过测定红色毛癣菌与ALA不同孵育时间下生成原卟啉Ⅸ的水平及ALA-PDT抑菌率,探讨PACT时杀灭红色毛癣菌佳孵育时间.
