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广西巴马小型猪生长激素(pGH)基因全序列克隆及序列分析
目的 克隆广西巴马小型猪生长激素(pGH)基因全序列,并与已发表的其它品种猪的生长激素(pGH)基因全序列进行比较,探讨该基因在广西巴马小型猪中可能存在的变异.方法 以广西大学巴马小型猪基因组DNA为模板,扩增巴马小型猪生长激素基因的全序列,将该扩增片段亚克隆到pMD18-T载体后测序.再将测序结果在NCBI进行BLAST.结果 测序结果证明克隆得到了巴马小型猪GH基因,全长为2 007 bp.同源性比较发现,巴马小型猪GH基因全序列与GenBank中发表的五指山猪、太湖猪及普通猪的GH基因全序列的同源性分别为99.4%、98.3%、93.9%.
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小型猪生长激素基因研究进展
小型猪(Miniature pig)由于其体型小、饲料消耗少、便于操作、世代间隔短、具有大家畜和实验动物的双重特点,因此是一种理想的实验动物模型.
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生长激素基因在西藏小型猪不同生长阶段和不同组织器官中的表达
目的:对西藏小型猪生长激素基因在不同脏器和不同年龄阶段的表达水平进行测定。方法采用Real-time PCR的方法,以GAPDH为内参,定量分析0岁(1日龄)、0.1岁(36日龄)、0.25岁(90日龄)、0.5岁(180日龄)、1岁(360日龄)、2岁(720日龄)、3岁(1080日龄)的西藏小型猪的心、肝、脾、肺、肾、肌肉、皮肤组织中生长激素基因mRNA表达水平,并且进行比较分析。结果生长激素基因在各个年龄阶段的西藏小型猪的心、肝、脾、肺、肾、肌肉、皮肤中均有表达。在不同脏器的表达中,生长激素基因在0岁、0.5岁时皮肤中的表达量高,肌肉组织中的表达量低。在0.25岁、1岁时肺组织中表达量高,在0.1岁、3岁时肝脏表达量高;在不同年龄阶段的表达中,生长激素基因在0.1岁时表达达到峰值。结论西藏小型猪的生长激素基因的表达呈现出明显的时空特异性。
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激素对T淋巴细胞生长激素基因表达调控的影响1
目的:探讨各种激素对T淋巴细胞GH基因表达的影响.方法:构建含人GH调控序列的荧光素酶报告基因质粒PGL2-GH-luc, 然后转染入T淋巴细胞系--Jurkat E6-1细胞中,在培养液中分别加入各种激素.结果:各浓度的GH、GHRH对Jurkat细胞中荧光素酶的表达有抑制作用( P<0.01),而高剂量的TRH(10、100 nmol/L)和SS(100 nmol/L)对Jurkat细胞中荧光素酶的表达也有抑制作用(P<0.05).结论:T淋巴细胞中GH基因的表达受下丘脑激素和GH的调节.
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人淋巴细胞免疫反应性生长激素基因调控序列的克隆与鉴定
目的:克隆和鉴定人淋巴细胞免疫反应性生长激素(irGH)基因调控序列的核苷酸顺序.方法:通过PCR扩增出人淋巴细胞irGH基因5′近端的调控序列,然后将其与质粒PGEM7Zf(+)连接,经转化蓝白斑筛选、酶切鉴定,获得PGEM7Zf(+)-irGH DNA (-484-+2 bp)重组质粒,进行序列测定.结果:显示irGH基因5′近端的调控序列与垂体细胞GH基因的5′近端调控序列的核苷酸顺序完全相同.结论:该结果进一步证明免疫系统与神经内分泌系统的密切关系.
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滇南小耳猪生长激素基因多态性研究
目的 探讨滇南小耳猪生长激素基因多态性,为滇南小耳猪的选育提供分子标记辅助选择的依据.方法 采用PCR-RFLP方法对滇南小耳猪GH基因的Apa Ⅰ酶切位点多态性进行了分析.结果 检测到两种基因型AA和AB,AB型的频率高子AA型.没有检测到BB基因型个体.等位基因A的基因频率高于等位基因B,等位基因A在群体中占优势.结论 滇南小耳猪群生长激素基因具有较丰富的多态性.
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细胞因子对T细胞生长激素基因表达的影响
目的探讨各种细胞因子对T细胞生长激素(GH)基因表达的影响. 方法构建含人GH调控序列的荧光素酶报告基因质粒pGL2-GH-luc,然后转染入T淋巴细胞系Jurkat E6-1细胞中,在培养液中分别加入各种细胞因子.结果生理浓度的IL-1β、TNF-β和IFN-γ,对Jurkat细胞中荧光素酶的表达具有抑制作用(P<0 .05). 结论细胞因子参与了调节淋巴细胞GH基因的表达.