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微核试验制片技术的改进
微核是测定染色体断裂剂及纺锤体损伤剂的一种常用指标.广泛应用于致突变物的筛选,我室根据多年工作实践,改进传统微核试验制片技术,做到即快速又能满足分辨的需要,其特点是更快速,更简便.
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非整倍体毒剂和染色体断裂剂的FCM微核检测区分方法研究
目的 研究流式细胞术(flow cytometry,FCM)微核检测筛选非整倍体毒剂和染色体断裂剂的方法.方法 采用CD71荧光抗体和碘丙啶(PI)双染色,通过FCM检测环磷酰胺(CP)和秋水仙索(COL)诱导的NIH小鼠外周血含微核网织红细胞的PI荧光强度,比较它们与二倍体细胞PI荧光强度中位数的比值,以探索通过FCM微核检测筛选非整倍体毒剂和染色体断裂剂的方法.结果 染色体断裂剂CP诱导的含微核网织红细胞与二倍体细胞PI荧光强度中位数的比值较低,非整倍体毒剂COL诱导的含微核网织红细胞与二倍体细胞PI荧光强度中位数的比值较高,两者间差异有统计学意义(P<0.01).结论 通过FCM检测微核PI染色强度,可初步判断诱导微核形成的因素是否具有染色体断裂剂和非整倍体毒剂毒性.
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昆明种小鼠不同取材部位嗜多染红细胞与成熟红细胞比值差异的研究
微核实验是检测细胞遗传损伤的常用实验方法之一.按微核形成的原理,只有进行分裂的细胞,在染色体断裂剂的作用下,才能产生并检测到微核,因此,剂量设计是否合理是能否检出染色体断裂剂的关键,如果剂量设计过高,受试物质抑制了骨髓细胞的增殖,则会出现假阴性.实验动物骨髓中嗜多染红细胞(PCE)/成熟红细胞(NCE)值的大小是用来判断骨髓细胞分裂是否受到抑制的指标之一,通常计数200个嗜多染红细胞,同时计数所见到的成熟红细胞数,求出PCE/NCE值.但该比值的大小是否受取材部位的影响,目前尚未见报道.本研究对正常昆明种小鼠股骨头和股骨腔两个取材部位的PCE/NCE值进行比较,以期为确定PCE/NCE的界值标准,准确判断骨髓细胞分裂是否受到抑制提供参考依据.
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甲基汞透过胎盘对大鼠遗传物质损伤作用
目的和方法:采用动物体内甲基汞(MeHg)不同剂量染毒,以染色体畸变(CA)和微核(MN)率为指标,研究了MeHg对大鼠胎儿及母鼠CA率和胎儿及母鼠MN的损伤.结果:胎肝细胞CA率、母鼠骨髓细胞CA率均随MeHg剂量增加而升高,且呈直接上升,其回归方程y=10.30+2.54 D(r=0.957 3,P<0.01)和母鼠y=2.34+0.71D(r=0.978 2,P<0.01).胎肝血细胞MN率和母鼠骨髓细胞MN率与CA率一致,也随MeHg剂量增加而升高,其回归方程为y=11.80+7.02D(r=0.9155, P<0.05), 母鼠的y=10.37+4.81 D(r=0.9975, P<0.01).结论:显示MeHg是一种很强的染色体断裂剂,也可能是一种纺缍体的毒物,不以DNA为靶子的间接诱变机制.