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干预GLP-1通路保护过氧化氢诱导心肌细胞凋亡的研究
目的 观察Exendin-4(Ex-4,GLP-1受体激动剂)对H2O2孵育的心肌细胞凋亡的影响,探讨GLP-1通路干预心肌细胞损伤的机制.方法 分离、培养心室肌细胞,分成5组:A组为对照组;B组为H2O2干预组(100μmol/L,24h);C组为H2O2+ Ex-4(Ex-10nmol/L,孵育24h)组;D组为H2O2+ Ex-4(Ex-20nmol/L,孵育24h)组;E组为H2O2+ Ex-4+ LY294002(Ex-20nmol/L,LY-5 μmol/L,孵育24h)组.荧光染色测定各组细胞内活性氧簇(ROS)生成的水平;流式细胞仪测定各组细胞凋亡率情况.以Western blot法测定各组细胞凋亡蛋白及机制蛋白(PI3K/AKT)的表达.结果 与H2O2孵育组相比,Ex-4干预使得心肌细胞内ROS水平下降,细胞凋亡率下降,在高剂量组(D组)均达到差异统计学意义(P<0.05).同时,Ex-4干预可使p-AKT/AKT表达显著增加,caspase-3表达显著下降(P<0.05);而这些效应可被LY294002共孵育(E组)所逆转.结论 干预GLP-1通路,可缓解H2O2诱导的心肌细胞凋亡,此效应至少部分是通过影响PI3K/AKT途径实现的.