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膀胱癌、输尿管癌导向诊断与导向治疗的临床基础研究
膀胱癌和输尿管癌在我国是泌尿系统发病率较高的恶性肿瘤.膀胱癌常规诊断方法包括:尿细胞学检查、影像学检查:B超、CT及MRI、膀胱尿道镜检加组织活检.膀胱尿道镜检加组织活检目前被作为膀胱癌诊断的"金标准",但该方法有一定创伤性,且对于原位癌、扁平癌以及早期肿瘤诊断灵敏度较低.对于膀胱癌远处转移与输尿管癌尚缺乏高特异性与高灵敏度的诊断方法.膀胱癌治疗方法主要有经尿道切除、放化疗及卡介苗膀胱内灌注治疗,经尿道切除适合于表浅肿瘤,且术后复发率高,放化疗及卡介苗膀胱内灌注治疗均有较大的副作用.为开辟膀胱癌和输尿管癌诊断和治疗的新途径,我院研制出了抗膀胱癌单克隆抗体BDI-1.本项目对放射性核素或免疫毒素偶联的BDI-1对膀胱癌、输尿管癌进行导向诊断与导向治疗研究,以期将该抗体应用于临床.
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CDR3导向抗体库法人源化抗膀胱癌Fab的鉴定
目的:对通过CDR3导向抗体库法筛选到的3株人源化膀胱癌噬菌体抗体进行进一步分析鉴定.方法:用ELISA方法对筛选特异性克隆进行特异性鉴定、抗原表位的核实;采用硫氰酸盐洗脱ELISA法评估其亲和力;选用活性较高的克隆进行膀胱癌组织的免疫组化实验.结果:3株阳性克隆可溶性表达后能够与膀胱癌EJ细胞特异性结合;与鼠源噬菌体抗体(BDI)相比,2株克隆的亲和指数比较低,均为0.25 mol/L,1株克隆的亲和指数为0.7 mol/L,略低于鼠源的亲和指数(0.9 mol/L)的水平.选择活性较高的克隆进行膀胱癌组织的免疫组化实验,显示该克隆能够与癌组织特异性结合.结论:用CDR3导向库法获得的人源抗体片段基本保持了原鼠源单克隆抗体(mAb)BDI的特性.