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HPLC法测定复方α酮酸片中四种氨基酸的含量
目的 建立复方α酮酸片中4种氨基酸的含量测定方法.方法 针对复方α酮酸片中赖氨酸醋酸盐、苏氨酸、组氨酸及酪氨酸四种氨基酸,采用反相高效液相法,以邻苯二甲醛(OPA)和2-巯基乙醇为衍生化试剂,测定四种氨基酸的含量.色谱柱为Lichrospher C18 25 cm×4.6 mm;流动相:乙腈-醋酸盐缓冲液系统梯度洗脱;检测波长:335 nm.结果 衍生化产物性质稳定;4种氨基酸在各自的浓度范围内线性关系良好(r>0.999 0);加样回收率为99.8%~101.1%,相对标准偏差均小于2.0%.结论 该方法准确,简便,重现性好,专属性强,可用于该产品的质量控制.
关键词: 柱前衍生化 邻苯二甲醛(OPA) 2-巯基乙醇 氨基酸 高效液相色谱法 -
OPA柱前衍生反相高效液相色谱法测定脑组织中氨基酸类神经递质
目的:建立一种脑组织中氨基酸类神经递质测定的方法.方法:利用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生反相高效液相色谱法结合荧光检测器测定标准品或脑组织中5种氨基酸(谷氨酸、门冬氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、γ-氨基丁酸)的含量.结果:5种氨基酸于15 min内得到了很好的分离,在1~10 μmol/L和10~100 μmol/L浓度范围内与峰高有良好的线性关系.结论:本方法具有快速、准确、灵敏度高、稳定性好等优点,适用于脑组织中微量氨基酸类神经递质的测定.
关键词: 高效液相色谱 氨基酸类神经递质 柱前衍生 邻苯二甲醛(OPA) -
荧光分光光度法测定福多司坦片剂的含量
目的:建立一种灵敏、准确的荧光分光光度法用于测定福多司坦片的含量.方法:以邻苯二甲醛为衍生剂,对福多司坦进行衍生化,在λex=342 nm、λem=454nm处测定荧光强度.结果:福多司坦的线性范围为0.5~6μg·ml-1,r=0.9999.平均回收率为100.3%,RSD为0.5%(n=9).结论:方法简便易行,灵敏度高,重复性好,可用于福多司坦片的含量测定.
关键词: 福多司坦 邻苯二甲醛(OPA) 荧光分光光度法 -
高效液相色谱-荧光法测定大鼠纹状体细胞外液中4种氨基酸的含量
目的:采用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-RF)建立大鼠脑微透析液中天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)和γ-氨基丁酸(GABA)的测定方法.方法:采用ODS-C18(5μm,250mm×4.6mm)色谱柱,柱温为35℃,流动相A为磷酸盐缓冲液(pH 6.7),流动相B为纯甲醇,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,荧光检测器的激发波长为239 nm,发射波长为375 nm.以邻苯二甲醛和β-巯基乙醇为衍生化试剂,柱前衍生,将脑微透析液直接注入高效液相色谱仪完成分析.结果:Asp、Glu、Gly和GABA4种氨基酸在0.5~32 μmol·L-1范围内线性关系良好,回收率范围为96.2%~102.1%.结论:所建立的氨基酸检测方法具有流动相配制简单、保留时间稳定、分析时间短、重复性好和回收率高等优点,可用于脑微透析液中痕量氨基酸的测定.
关键词: 脑微透析 纹状体 高效液相色谱-荧光检测法 氨基酸类递质 衍生化 邻苯二甲醛(OPA) 天门冬氨酸 谷氨酸 甘氨酸 氨基丁酸