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RP-HPLC法同时测定双丹口服液中没食子酸、丹参素和原儿茶醛的含量
目的 建立同时测定双丹口服液中3种活性成分没食子酸、丹参素和原儿茶醛含量的分析方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Sino Chrom ODS-BP C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)柱,流动相为甲醇-3%冰醋酸水溶液(8∶92),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为280 nm.结果 没食子酸、丹参素和原儿茶醛分别在5.0～100.0 μg/mL(r = 0.999 8)、7.5～150.0 μg/mL(r = 0.999 9)、5.0～100.0 μg/mL(r = 0.999 8)范围内具有良好的线性关系,加样回收率(n = 6)依次为99.2%、99.8%、100.3%.结论 本方法操作简便,结果准确,重复性好,适用于双丹口服液的质量控制.
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双丹口服液中丹酚酸B和丹参素的稳定性研究
目的 测定双丹口服液中丹酚酸B和丹参素,并考察常温放置3个月后这2个成分量的变化.方法 采用HPLC法;色谱柱Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水溶液(27∶10∶1∶62);体积流量1.0 mL/min;检测波长为286 nm;柱温35℃.结果 双丹口服液中丹酚酸B的量逐月下降,而丹参素的量相对稳定.结论 用丹酚酸B替代丹参素进行测定是不可行的.
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双丹口服液的血清药物化学研究
目的:对双丹口服液(ShuangDan oral liquid,SD)的入血成分进行分析研究,进而探讨其药效物质基础.方法:采用血清药物化学的研究方法,建立双丹冻干粉经口灌胃后大鼠血清的RPLC指纹图谱,结合体外样品指纹图谱,分析比较双丹冻干粉及单味药材给药后所得血清样品,鉴定双丹冻干粉大鼠血中移行成分.结果:通过与文献中标准物质的保留时间确定大鼠口服双丹冻干粉后有8种血清移行原型成分,分别为源自牡丹皮的没食子酸、芍药苷和丹皮酚,源自丹参的丹参素、原儿茶酸、咖啡酸、迷迭香酸和丹酚酸B,此8种成分将有可能成为双丹方药效作用的物质基础.结论:本实验初步确定了双丹口服液的入血成分,为后续双丹方体内直接作用物质的确定和药效相关性研究提供了数据支持,并为其药效物质基础的阐明奠定了理论基础.
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双丹口服液对环磷酰胺大鼠骨形态计量学的影响
双丹口服液由丹参和牡丹皮两味中药组成,是著名的中药方剂,在2005版药典已有记载.双丹口服液具有清除氧自由基,改善血流循环,增强免疫,以及抗炎、抗肿瘤等作用.
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RP-HPLC测定双丹口服液中丹酚酸B、丹参素和原儿茶醛的含量
目的:建立双丹口服液(丹参、牡丹皮)中有效成分丹酚酸B、丹参素和原儿茶醛的HPLC含量测定方法.方法:采用Phenomenex Luna C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),甲醇-乙腈-甲酸-水(30:10:1:59)为流动相,检测波长:286 nm,流速:1.0 mL/min,测定丹酚酸B;甲醇-乙腈-2%(v/v)甲酸溶液(9:4:87)为流动相,检测波长:281 nm,流速:1.0 mL/min,测定丹参素和原儿茶醛.结果:丹酚酸B平均回收率为98.6%,RSD=1.91%(n=6);丹参素平均回收率为99.2%,RSD=2.2%(n=6);原儿茶醛平均回收率为97.3%,RSD=2.5%(n=6).结论:6批样品测定结果表明,该方法简便、准确,可用于双丹口服液丹酚酸B等3种有效成分含量测定.
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HPLC法测定双丹口服液中丹皮酚的含量
目的 建立高效液相色谱法测定双丹口服液中丹皮酚含量的方法.方法 采用Zorbax SB-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,甲醇-水(65:35)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长为274nm.结果 丹皮酚线性范围为0.214～1.069 μg,平均回收率为98.36％,RSD为0.36％.结论 该方法简便、可靠、准确,可用于该制剂的质量控制.
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双丹口服液对环磷酰胺大鼠股骨生物力学和生化指标的影响
目的 观察双丹口服液对环磷酰胺造成大鼠的骨质疏松模型的影响.方法 用4.5 mg·kg-1·d-1的环磷酰胺灌胃给大鼠,连续15 d,造成大鼠骨质疏松模型;用双丹口服液进行预防给药,并与阳性药物碳酸钙维D比较.实验结束后,取大鼠右侧股骨进行骨生物力学检测,随后检测骨钙、磷、镁和羟脯氨酸含量.结果 环磷酰胺明显导致大鼠股骨的骨有机质与矿物质丢失,生物力学性能下降,双丹口服液可有效地拮抗这些作用,且效果与碳酸钙维D相当.结论 双丹口服液可有效预防环磷酰胺所引起的大鼠股骨的骨丢失及骨质量下降.
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双丹口服液治疗冠心病心绞痛60例
近2 a我们用山东沂水制药厂生产的双丹口服液治疗冠心病心绞痛患者60例,现将观察结果报告如下.
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双丹口服液对环磷酰胺大鼠皮质骨的影响
目的:用环磷酰胺造成大鼠的骨质疏松模型,观察双丹口服液对其的影响.方法:用4.5 mg/kg的环磷酰胺灌胃大鼠,连续15 d,造成大鼠骨质疏松模型;用双丹口服液进行预防给药,并与碳酸钙维D比较.实验结束后,取大鼠右侧股骨进行骨生物力学检测,随后检测骨钙、磷、镁和羟脯氨酸含量;同时对左侧胫骨中段骨进行骨组织形态计量测量.结果:环磷酰胺可明显抑制大鼠胫骨中段骨的矿化形成作用并导致骨量丢失,以及降低大鼠股骨的生物力学性能,使骨矿物质丢失,而双丹口服液可有效地拮抗这些作用,且效果与碳酸钙维D相当.结论:双丹口服液可有效预防环磷酰胺所引起的大鼠皮质骨的病理改变.
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双丹口服液的 HPLC指纹图谱研究
目的：建立双丹口服液冻干粉的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，为该药的质量控制提供依据。方法：色谱条件为：色谱柱ZORBAX SB C18（250 mm ×4．6 mm 5μm ，Agilent），柱温30°C ，流动相为甲醇与2％冰醋酸。采用梯度洗脱程序：甲醇‐2％冰醋酸（5∶95，v／v）0 min ，（5∶95）10 min ，（25∶75）30 min ，（40∶60）50 min ，（60∶40）70 min ，流速1 mL／min ，进样量20μL ，检测波长280 nm ；以建立的 HPLC分析方法对双丹冻干粉进行指纹图谱分析表征，确认各物质成分归属。结果：双丹冻干粉指纹图谱中有11个共有特征峰，其中1、6和11号峰分别为源自牡丹皮的没食子酸、芍药苷和丹皮酚，2、3、4、5、7、8、9和10号峰分别为源自丹参的丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、紫草酸、迷迭香酸、丹酚酸B和丹酚酸A。结论：本次研究为后续双丹各制剂的整体质量描述和评价及双丹冻干粉给药后血中移行成分的分析奠定了基础，也为进一步探讨双丹方的物质基础及作用机制提供了依据。
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双丹口服液对体外培养心肌干细胞作用的研究
目的 观察双丹口服液(SOL)对体外分离培养的SD仔鼠心肌干细胞(CSCs)的作用.方法 分离培养CSCs,将培养的第2代CSCs分为对照组及不同浓度1×10-1mol/L、1×10-2 mol/L、1 ×1O-3 moL/L、1×10-4 mol/L、1×10-5 mol/L和1×10-6 mol/L的SOL组.培养24 h、48 h后用MTT比色法检测SOL对CSCs的影响.将10-2mol/L SOL组的细胞培养24 h后,用流式细胞仪测定c-kit+/CD45-细胞的比率.结果 消化后的心肌组织3d后,可见成纤维样细胞从组织块儿周围爬出,1周后可见小、圆、亮的细胞出现在组织块周围爬出的成纤维细胞层上.传代培养后,倒置显微镜下观察细胞形态呈较均一的梭型,可见CSCs形成的“太阳状”集落.MTT法检测表明,与对照组相比,SOL作用后的CSCs生长增殖迅速,当SOL的浓度超过1×10-3 mol/L时,CSCs增殖更为显著(P＜0.05).流式细胞术检测显示,1×10-2 mol/L SOL的细胞培养24 h后,c-kit+/CD45-细胞的比率达到0.976％,与对照组相比(0.301％),差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 利用酶消化可以成功从SD仔鼠心脏组织中分离培养得到c-kit+的CSCs,SOL对CSCs的体外生长和增殖有一定的促进作用.
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双丹口服液对大鼠糖尿病肾病的作用研究
目的：探讨双丹口服液（SDO）对大鼠糖尿病肾病（DN）的治疗效果及其作用机制。方法采用高脂高糖饲料加30 mg?kg －1链脲佐菌素诱导大鼠 DN 模型，随机分为治疗组、阳性对照组、模型组和正常对照组。治疗组分别灌胃（ig ）10．0，5．0和2．5 mL?kg －1 SDO高剂量组，皮下注射10μ?kg －1胰岛素组（阳性对照），模型组和正常组分别ig 5．0 mL?kg －1生理盐水，各组给药2次/d ，连续给药8周后检测大鼠空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、24 h尿量、血肌酐、尿素氮和血脂等生化值，测定T-SOD、T-AOC、MDA和NO等氧化应激指标，血液流变仪测定全血黏度，光镜下观察肾脏组织病理学改变。结果 SDO各给药组大鼠24 h尿量、血肌酐、尿素氮、血总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白的含量明显较模型组降低，高密度脂蛋白含量升高，血黏度降低（P＜0．05或 P＜0．01）；SDO各剂量组大鼠血T-SOD、T-AOC活力明显升高，MDA、NO含量降低（P＜0．05或 P＜0．01）；SDO各给药组对血糖及糖化血红蛋白无影响（P＞0．05）；SDO各给药组对大鼠的全血黏度和肾组织损伤均有所改善。结论首次证实SDO对大鼠DN具有显著治疗作用，其机制与改善血脂代谢紊乱、促进抗氧化应激能力有关。
