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芯片谱文献资料
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肝癌干细胞差异表达miRNA的筛选及鉴定
目的 培养卵圆细胞、肝癌干细胞样细胞,筛选肝癌干细胞差异表达的microRNA并进行验证.方法 体外分离培养卵圆细胞,肝癌干细胞样细胞,通过microRNA芯片检测差异表达的microRNA,对所得到的差异表达显著的microRNA进行Northern验证.结果 表达差异显著的microRNA共有17个,经Northern杂交验证,其中6个差异显著的microRNA,发现hsa-let-7f-2、hsa-miR-199a-3p、hsa-miR-122在肝癌干细胞中的表达较卵圆细胞明显升高.结论 hsa-let-7f-2、hsa-miR-199a-3p、hsa-miR-122在肝癌干细胞中的表达较卵圆细胞明显升高,可以进一步验证其在肝癌干细胞中的功能.
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MicroRNAs在肝星状细胞活化过程中表达差异谱的研究
目的 应用MicroRNAs基因芯片技术筛选静止和活化肝星状细胞差异表达的MicroRNAs.方法 用链酶蛋白酶和胶原酶原位灌流,Nycodenz密度梯度离心分离大鼠HSCs,并进行体外培养,借助荧光倒置显微镜观察细胞形态,MicroRNAs基因芯片技术和荧光定量PCR检验MicroRNAs在HSCs静止期(2天)和活化期(14天)的表达.结果 HSCs的miRNAs表达谱中差异表达miRNAs共21个,其中上调12个,下调9个(P＜0.01);荧光定量RT-PCR证实其表达水平在静止和活化期肝星状细胞中均有差异(P＜0.01).结论 MicroRNAs基因芯片筛选差异表达miRNAs可望为肝纤维化的基因治疗提供全新的靶标和策略,为肝纤维化的发病机制和诊断治疗研究提供了新的思路.
