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疟疾诊断技术进展与应用
疟疾是一种严重危害人类生命健康的蚊媒传染病,由于免疫学、分子生物学和生物化学技术的不断发展,陆续产生一些疟疾诊断的新技术,本文就疟疾各种诊断技术的原理和应用作简要综述.笔者认为,当前我国处于消除疟疾监测阶段,阻断病例境外输入,快速诊断外出回归人群中的疟原虫感染者,及时处置疟疾疫情是关键.在疟原虫镜检技术的基础上,实验室研究着重于DNA探针技术和PCR技术的应用,基层医疗单位和现场监测要推广应用胶体金免疫层析技术的快速诊断试剂,尤其是杭州艾康和广州万孚等国产产品,价格低廉,简便快速,灵敏度和特异度高,需要尽快普及.
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万孚疟原虫检测试剂盒检测卵形疟原虫效果评价及影响因素分析
目的 评价万孚疟原虫检测试剂盒(Pf-LDH/Pan-pLDH)对卵形疟原虫的检测效果,并分析原虫密度、疟原虫乳酸脱氢酶(pLDH)浓度和基因多态性等因素对检测结果的影响.方法 按照万孚疟原虫检测试剂盒的操作说明书,对经PCR确认的100份卵形疟患者血样进行检测.采用显微镜镜检法计数患者血片的原虫密度,以ELISA法检测血样中的pLDH浓度,以PCR扩增卵形疟原虫LDH(Po-LDH)基因并测序,并分析上述3个因素对检出率的影响.结果 万孚疟原虫检测试剂盒对上述100份卵形疟患者血样的总体检出率为70.0％ (70/100).当原虫密度≤500个/μl时,检出率为27.3％;原虫密度＞ 500个/μl时,检出率为75.0％～ 75.4％.当pLDH浓度较低时(A值≤0.100),检出率为6.7％;pLDH达到一定浓度时(A值＞ 0.100),检出率为95.1％～ 100％.Po-LDH基因序列分析结果显示所有卵形疟样本可分为2种亚型,分别为卵形疟原虫curtisi亚种(P.o.curtisi)和卵形疟原虫wallikeri亚种(P.o.wallikeri).2种亚型的LDH基因同源性为97％,共有24个单核苷酸多态性(SNP),其中3个SNPs为非同义突变,其余均为同义突变.2种亚型的LDH编码氨基酸序列同源性为99％,共有3个氨基酸的差异.万孚疟原虫检测试剂盒对P.o.curtisi的检出率为73.1％(38/52),对P.o.wallikeri拘检出率为66.7％(32/48),两者差异无统计学意义(P＞0.05).结论 万孚疟原虫检测试剂盒对卵形疟原虫的检测效果优于大部分同类产品,其检出率与原虫密度、pLDH浓度关系密切,与pLDH基因多态性无关.
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疟疾快速免疫诊断试剂在我国的应用
近年来,随着诊断技术的发展,疟疾快速免疫诊断技术因其操作简便、快速、结果直观,无需复杂设备、敏感性和特异性高等优点,在我国各疟区逐步成为疟疾辅助诊断常用手段.现对已在我国开展过检验效能评估试验的国内外疟疾快速免疫诊断试剂进行综述,以期指导基层防治人员运用.
