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维吾尔族和哈萨克族毒性弥漫性甲状腺肿患者子宫球蛋白相关蛋白1基因多态性研究
目的 探讨新疆维吾尔族和哈萨克族毒性弥漫性甲状腺肿(Graves病)患者子宫球蛋白相关蛋白1(UGRP1)基因单核苷酸多态性(SNP).方法 收集2010年1-7月新疆地区374例散发维吾尔族和哈萨克族Graves病患者(Graves病组)以及年龄相匹配的378名维吾尔族和哈萨克族健康对照者(对照组),采集外周血白细胞抽提DNA,分析UGRP1 SNP位点,采用TaqMan探针技术,在Fluidigm EP1平台上进行等位基因和基因型分析,比较Graves病组和对照组基因型差异,并比较不同性别、是否有高血压、是否为复发、是否有胫前黏液性水肿、不同甲状腺肿大程度和突眼程度Graves病患者间基因型差异.结果 共分析UGRP1基因上33个SNP位点,其中rs 6859391位点GG、CC和CG型对照组分别为88.6％(335/378)、0.5％ (2/378)、10.9％(41/378),Graves病组分别为94.4％(353/374),0.3％ (1/374)和5.3％(20/374),2组间差异有统计学意义(P＜0.05);对照组和Graves病组G等位基因频率分别为94.0％(711/756)和97.1％(726/748),C等位基因频率分别为6.0％(45/756)和2.9％(22/748),C等位基因为维吾尔族和哈萨克族Graves病发生的保护性碱基(比值比=0.48,95％置信区间:0.28～0.82,P＜0.01).不同临床特征Graves病患者rs 6859391位点基因类型差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 UGRP1基因位点rs 6859391SNP可能参与新疆维吾尔族和哈萨克族人群Graves病的发生、发展.
关键词： Graves病 维吾尔族 哈萨克族 子宫球蛋白相关蛋白1 单核苷酸多态性 -
UGRP1蛋白的表达、纯化、抗体制备及亚细胞定位
目的 子宫球蛋白相关蛋白1(UGRP1)是一种功能未知的分泌蛋白.通过表达、纯化蛋白、制备抗体及其在组织中表达的研究,为进一步研究其功能奠定基础.方法 从人胎肺组织中克隆得到UGRP1基因,构建重组表达质粒pGEX-5X-1/UGRP1.将此质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)后用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,表达含谷胱甘肽-S-转移酶(GST)的GST-UGRP1融合蛋白.此融合蛋白经纯化分离后,免疫新西兰大白兔,制备其多克隆抗体.用Western 印迹的方法检测多抗血清.通过构建含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的EGFP-N2-UGRP1载体,转染非洲绿猴肾细胞(COS细胞)表达重组蛋白,对UGRP1的表达进行亚细胞定位.结果 成功构建了pGEX-5X-1/UGRP1载体,获得了高纯度的重组蛋白和多克隆抗体.免疫组化分析表明UGRP1表达于肺支气管上皮细胞,亚细胞定位分析证实UGRP1主要表达于细胞浆.结论 研究发现UGRP1表达于肺支气管上皮细胞和在COS细胞的胞浆中表达.经纯化获得蛋白并制备抗体,为进一步研究UGRP1的功能奠定了基础.
关键词： 子宫球蛋白相关蛋白1 GST融合蛋白 多克隆抗体 亚细胞定位 -
子宫球蛋白相关蛋白1在甲状腺疾病中的表达及其临床意义
目的:探讨子宫球蛋白相关蛋白1(uteroglobin-related protein 1,UGRP1)在甲状腺疾病中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学方法(Envision二步法),检测18例正常甲状腺、23例结节性甲状腺肿、35例甲状腺腺瘤、64例桥本甲状腺炎、43例Graves病和32例甲状腺癌组织中的UGRP1表达.结果:结节性甲状腺肿和甲状腺癌组织的UGRP1均不表达.正常甲状腺、甲状腺腺瘤和Graves病组织中的UGRP1表达阳性率分别为5.56%、2.86%和9.30%,它们之间表达阳性率均无统计学意义(P＞0.05).桥本甲状腺炎组织中UGRP1表达阳性率为71.88%,显著高于其它各种甲状腺疾病的表达阳性率(P＜0.01).结论:UGRP1在正常甲状腺、甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、Graves病和甲状腺癌组织中不表达或低表达,而在桥本甲状腺炎组织中高表达.UGRP1可能是通过免疫炎症反应参与桥本甲状腺炎的发病过程,在桥本甲状腺炎疾病的诊断和鉴别诊断中起重要作用.
关键词： 甲状腺疾病 子宫球蛋白相关蛋白1 免疫组化 桥本甲状腺炎
