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骨桥蛋白对大肠癌细胞间隙连接通信的影响
目的 检测骨桥蛋白( Osteopontin，OPN)转染后大肠癌SW-480细胞株的细胞间隙连接通信( gap junctional intercellular communication，GJIC)改变。方法 以OPN真核表达质粒转染大肠癌SW-480细胞株后，利用激光共聚焦显微镜（laser scanning confocal microscope，LSCM），运用荧光淬灭后恢复技术（flurescence redistribution after photobleaching，FRAP）检测OPN转染后SW-480细胞的GJIC功能变化。结果 转染OPN后，高表达OPN的SW-480-pcDNA3.1(+)-OPN细胞株淬灭5 min 后荧光恢复率为24.65％±4.08％，而对照组SW-480-pcDNA3.1(+)为44.74％ ±6.23％，P＜0.001；10 min后荧光恢复率SW-480-pcDNA3.1(+)-OPN仅为25.98％±4.48％，SW-480-pcDNA3.1(+)已上升至64.92％±5.39％，P＜0.001。转染后高表达OPN的SW-480细胞，GJIC功能被抑制，细胞之间通信减弱，淬灭后恢复率相比较对照组明显降低。结论 OPN减弱大肠癌细胞间的通信能力，可能与大肠癌细胞的侵袭转移相关。
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间隙连接研究进展
多细胞生物其本身具有很复杂的信息调控网.靠神经,激素,及其它的信号调节来构成一个正反馈和负反馈系统,精确而有序的调控着生物体的新陈代谢,生长发育等各种活动.而多细胞生物中的细胞也不是简单的堆积,而是通过细胞间隙连接通信构成了一个精密的信息网,来协调组织器官的功能.构成间隙连接的基本单位为连接子(commexon),近的研究发现在夫脊椎动物蝗虫中[1]有类似connexin的蛋白家族,称为innexins.它们是构成无脊椎动物的间隙连接的蛋白亚基.连接子位于质膜上与相邻细胞上对应面上的一对构成间隙连接通道(gap iunction channel).间隙连接通道是目前已知的细胞间直接进行物质交流的唯一的膜通道结构[2].有的研究显示:间隙连接通讯主要在如下几个方面作用:(1)它可以协调不同系统和组织之间的电导性或代谢来有效地调挖各种信息.(2)在细胞分化和胚胎发育中起着重要的作用.(3)在调控细胞增殖,细胞凋亡方面有重要的作用.(4)与肿瘤细胞的生长抑制和转化有关.(5)一些遗传病与connexin(Cx)的突变有关.下面就目前检测间隙连接通讯的常用方法,间隙连接通道的调控机制,已检测到的Cx的种类,其基因突变与疾病的关系,及其对肿瘤细胞的影响作一论述.
