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苦杏仁酸沉淀法测定钪的条件
以苦杏仁酸为沉淀剂测定高量钪,文献中已有介绍.本文仅对苦杏仁酸钪的沉淀条件作进一步的探讨.苦杏仁酸能在pH1.5～4.5的盐酸介质中定量沉淀钪而与大多数常见元素分离,但锆、稀土元素有干扰.锆定量沉淀,稀土元素在2毫克以上即使结果明显偏高.锆可采用在2.5～3.0N的盐酸溶液中预沉淀除去;而稀土元素被苦杏仁酸沉淀的pH值在4 以上,因此可采用反复沉淀钪的方法消除干扰.
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不同工艺制备的E型肉毒毒素及其类毒素的免疫原性分析
目的 用不同工艺制备E型肉毒毒素,脱毒制备类毒素,并分析其免疫原性.方法 分别用菌体内提取法和酸沉淀法制备E型肉毒毒素,进行毒素型特异性检定及毒力测定后,脱毒制备类毒素,参考《中国药典》三部(2010版)进行结合价、蛋白氮(PN)含量、总氮(TN)含量、pH测定及脱毒检查和毒性逆转试验.选择结合价较高的2批类毒素配制3组抗原,经家兔皮下进行基础免疫(共2针)和3程超免疫(2针/程),每针间隔14d,每程免疫间隔30 d,均于第2针免疫后第20天,经耳缘静脉采血,分离血清,参考《中国药典》三部(2010版)附录ⅪH肉毒抗毒素效价检测法,检测抗体效价.结果 55、120 h菌体内提取毒素(201112001和201112003批)及55、120 h酸沉淀提取毒素(201112002和201112004批)均为E型肉毒毒素,毒力分别为6.2× 103、5.0× 102、4.5×102、6.5×103 LD50/ml;各组类毒素脱毒检查和毒性逆转试验结果均符合《中国药典》三部(2010版)规定,55 h酸沉淀提取毒素其类毒素TN、PN含量高,120 h菌体内提取毒素低.制备的3组抗原(201112001-1、201112004-1及201112004-2批)抗原结合价分别为900、2 100和900 BU/ml;两种方法制备的类毒素按高结合价配制抗原,免疫后的血清效价差异无统计学意义(P＞0.05),两种方法制备的类毒素按相同结合价配制抗原及同批类毒素配制的不同结合价抗原,免疫后的血清效价差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 用酸沉淀法从120 h培养液中提取毒素可获得与55 h菌体内提取毒素相同免疫原性的类毒素.酸沉淀法操作简便,更适宜马匹免疫用E型肉毒抗原的规模化生产.
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Dimension AR专用通道微量蛋白测定试剂的研制
尿液中微量蛋白测定常用的方法有三氯乙酸沉淀-双缩脲法、丽春红S法、三氯乙酸比浊法等,此类方法准确性差,操作繁复,不宜自动化.能用于自动化仪器的方法如考马斯亮蓝染料结合法[1,2],由于染料会吸附管道和比色皿,使该法应用受到限止.据文献[3]报告,邻苯三酚红-钼酸复合物测定尿微量蛋白,不污染仪器,且具有更多的优点,为了使该法能用于Dimension AR分析仪,代替价格昂贵的进口试剂,我们作了实验.
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人凝血因子Ⅷ提取工艺优化研究
目的：优化血浆中人凝血因子Ⅷ提取工艺条件。方法以人血浆冷沉淀为原料，人凝血因子Ⅷ的比活性回收率作为评价指标，采用单因素试验，对铝胶的加量，铝胶吸附时的pH值、酸沉淀时的pH值等进行研究，优选提取工艺。结果加入冷沉淀重量12%的铝胶，并将pH值调节至7.1进行吸附，上清液中人凝血因子Ⅷ比活性可达9.50IU/mg,酸沉淀时将pH值调节至6.3，离心上清夜中人凝血因子Ⅷ比活性为11.50 IU/mg。经过以上两步处理，可将人凝血因子Ⅷ比活性提高近2倍。结论人凝血因子Ⅷ提取工艺优化研究工艺合理、可行，能有效达到纯化提取人凝血因子Ⅷ的效果。
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玻璃体液多糖
1 引言M(o)rner的研究使玻璃体液中存在黏蛋白的观点被广泛接受.M(o)rner制备黏蛋白的方法是稀释天然玻璃体液后加入稀醋酸沉淀,此后的研究者都用此方法.Duke-Elder在其有关玻璃体性质的书中,指出玻璃体液黏蛋白浓度为0.021%或约为总蛋白质的30%.M(o)rner分析这种黏蛋白的结果显示,N含量12.27%,S含量1.19%.
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原子吸收石墨炉法测定血中铅
血铅的常见测定方法有原子吸收法[1～4],微分电位溶出法[5,6],原子发射光谱法[7]等.国标采用的是石墨炉原子吸收法[3],但常因操作繁琐,加液误差及未加基体改进剂等原因,而引起重现性差,回收率低.本实验室曾采用改变加液方法和加入基体改进剂的方法收到理想效果[8].本文进一步研究,用8%硝酸沉淀有机质,提取全血中铅,在不加基体改进剂的情况下测定血铅.并用美国疾病控制中心提供的血铅测定质量控制标准品制备工作曲线,同时检测该中心提供的未知样品,结果满意.
