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3种真核藻类DNA提取方法比较
目的 建立一种简单、快速、高效的从自然水样中提取藻类总DNA的方法.方法 通过DNA产物的浓度和纯度、DNA产物的完整性及PCR扩增的比对,对3种真核藻类DNA的提取方法[纤维素酶法、改良十六烷基三乙基溴化铵(CRAB)法和超声波破碎试剂盒法]进行比较.结果 3种方法得到的基因组DNA均较完整,片段大小都在23 kb左右；且3种方法得到的DNA浓度均较高.CTAB法和试剂盒法提取得到的总DNAA260nm/A280nm.的比值分别为1.767和1.824,并且A260nm/A230nm比值均在1.9以上,说明提取得到的总DNA纯度较高,且PCR产物经1.5％琼脂糖凝胶电泳检测得到明亮的条带.而纤维素酶法得到的DNA的A260nm/A280nm比值与A260/A230nm比值分别为1.617和1.522,表明盐及蛋白质污染较前两者严重.结论综合考虑后,认为CTAB方法更适合从自然水样中提取藻类DNA.
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响应面法优化海藻多糖的酶法提取工艺
目的:确定纤维素酶法提取海藻多糖的佳工艺条件.方法:采用蒽酮-硫酸法测定多糖的含量,以海藻多糖得率为指标,考察纤维素酶添加量、酶解温度和酶解时间三因素对海藻多糖提取得率的影响,采用响应面分析法优化工艺条件.结果:影响多糖得率的因素按主次顺序排列为:酶解温度＞酶解时间＞纤维素酶添加量；多糖的佳提取工艺条件为:纤维素酶添加量1.2％、酶解温度46.5℃、酶解时间100 min.在此条件下多糖得率为4.64％.结论:该法成本低,多糖得率高,比传统水提法提高7.41％.
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纤维素酶法提取翠云草总黄酮的工艺研究
目的 研究纤维素酶法提取翠云草总黄酮的佳提取工艺.方法 以翠云草总黄酮含量为指标,分别研究了酶用量、酶解温度、pH值和酶解时间对总黄酮提取率的影响,在此基础上设计了L9 (34)正交实验,确定佳提取工艺.结果 纤维素酶法提取翠云草中总黄酮的佳工艺条件为:酶用量为22 U/g,酶解温度为45℃,pH值为5.0,酶解时间为60min.结论 优化后的提取工艺条件合理可行,为翠云草总黄酮的工业化生产提供理论参考依据.
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纤维素酶协同超声波法提取香菇多糖的研究
香菇(Lentinusedodes(Berk)Sing)在分类学上属真菌门,担子菌纲,伞菌目,侧耳科,香菇属植物[1],世界名贵食用兼药用菌之-[2].香菇多糖(1entinan,简称LNT)是从香菇子实体中提取出的-种真菌类均多糖,以葡萄糖为主,含少量的甘露糖、岩藻糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等;肽链由天冬氨酸、组氨酸、丝氨酸、赖氨酸、谷氨酸等18种氨基酸组成[3].
