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清热减肥薄荷膳
薄荷,又名番薄荷、苏薄荷,为唇形科多年生宿根性草本植物.中医认为,薄荷性味辛、凉,入肝、肺经,有疏散风热,清利头目,解表透疹之功,常被用于治疗风热感冒、风温初起、头痛目赤、咽喉肿痛、口疮、麻疹不透、风疹瘙痒、肝气郁滞、胸闷胀痛等.《神农本草经》日:“薄荷气味辛温无毒,主贼风伤寒,发汗恶气,心腹胀满、霍乱,宿食不消,下气,煮汁服,亦堪生食.”《本草纲目》言:“薄荷,辛能发散,凉能清利,专于清风散热.故头痛、头风、眼目、咽喉、口齿诸病为要药.”药理研究表明,薄荷含挥发油,水煎剂对人结核杆菌、伤寒杆菌有抑制作用,挥发油少量内服有发汗、解热及兴奋中枢的作用,外用能麻痹神经末梢,可消炎、止痛、止痒,并有清凉之感.
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人结核杆菌热休克蛋白65重组卡介苗疫苗的构建、表达及鉴定
目的构建人结核杆菌热休克蛋白65(HSP65)重组卡介苗(BCG)疫苗.方法用PCR技术从BCG基因组中扩增出抗原85B(Ag85B)的信号肽DNA序列,从pCMV-MTHSP 65质粒中扩增出HSP65全长基因.利用DNA重组技术将以上两个片段插入质粒pBCG-2100的人结核杆菌HSP70启动子下游,构建一个分泌型的原核穿梭表达质粒pBCG-SP-HSP65.利用电穿孔的方法将该质粒转入BCG中,经热诱导后,用SDS-PAG电泳来观察其表达水平.利用Western blot来检验HSP65的生物学活性.结果酶切鉴定、PCR和测序分析结果表明,所克隆的信号肽DNA片段和热休克蛋白65 DNA片段与报道结果完全一致,重组体的连接方向正确,阅读框与预期完全一致.热诱导后,重组BCG表达的65 kD(1 kD=0.992 1 ku)蛋白占菌体总蛋白的35.67 %,占裂解物上清总蛋白的74.09 %,表明重组的HSP65基因能在BCG中高效表达,表达的蛋白大部分以可溶状态存在.通过Western blot证实分泌的该蛋白能与结核杆菌HSP65的抗体特异性结合.结论成功构建分泌型原核穿梭表达质粒pBCG-SP-HSP65,重组的HSP65基因能在BCG中高效表达,表达的HSP65具有生物学活性,重组BCG疫苗构建成功.
关键词： 信号肽 人结核杆菌 热休克蛋白65 分泌型原核穿梭表达质粒 重组卡介苗
