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海兔素对体外人乳腺癌FCM-7细胞的抑制作用
目的 研究海兔素(aplysin)对人乳腺癌FCM-7细胞的抑制作用,并探讨其可能的作用机制.方法 MTT法测定海兔素对人乳腺癌FCM-7细胞增殖的影响;流式细胞术测定细胞凋亡情况、细胞周期变化和增殖细胞核抗原(PCNA)、Fas、bcl-2阳性细胞百分率及细胞基质钙离子(IE Ca2+)含量变化.结果 经10、20、40、60、80 mg/L海兔素处理FCM-7细胞48h后,细胞的生长增殖明显受到抑制,呈量效依赖性,其IC25和IC50值为分别为28.3和31.9 mg/L;经10和40 mg/L海兔素处理FCM-7细胞48h,出现明显的凋亡亚二倍体峰,细胞凋亡率分别为5.08％,和33.6％,且随着海兔素剂量不断增加,G0/G1期细胞所占比例也逐渐升高,而S期细胞所占比例则呈逐渐下降趋势,其中,40 mg/L海兔素组与对照组及10 mg/L海兔素组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).经10、20、40 mg/L海兔素作用于FCM-7细胞,其Fas蛋白表达阳性细胞百分率均明显升高,分别达到(14.61±1.23、25.65±1.57、38.65±1.89)％,与对照组比较及各药物组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05);而PCNA及Bcl-2蛋白表达则逐渐下降,其中,20、40mg/L海兔素组Bcl-2和PCNA表达均较对照组降低,且海兔素浓度越高,Bcl-2和PCNA表达越低,经统计学处理,差异有统计学意义(P＜0.05).经10、20、40 mg/L海兔素作用于FCM-7细胞,IECa2+含量也显著升高,与对照组及海兔素各组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 海兔素可诱导乳腺癌FCM-7凋亡,其作用机制可能与aplysin阻滞FCM-7细胞周期,同时提高Fas促凋亡蛋白表达和Ca2+释放,抑制PCNA和Bcl-2等细胞增殖相关蛋白表达有关.
