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上海市浦东新区致泻性大肠埃希菌病原谱的建立和分析
目的 建立基于分子生物学技术结合传统分离方法检测5种致泻性大肠埃希菌(DEC),并应用于浦东新区腹泻人群的DEC监测,从而构建DEC感染病原谱,以了解浦东新区感染性腹泻患者DEC的感染情况.方法 从GenBank基因数据库中筛选5种DEC毒力基因序列,合成引物探针,优化设计TaqMan实时荧光PCR法结合传统分离方法,终获得单克隆菌株.应用该方法对2014年的11家腹泻监测点1 846份粪便拭子进行DEC检测.结果 1846件粪便拭子中DEC总阳性率为14.90％(275/1846),其中检出致病性大肠埃希菌102株(5.53％),产毒性大肠埃希菌102株(5.53％),侵袭性大肠埃希菌3株(0.16％),聚集性大肠埃希菌68株(3.68％).结论 TaqMan实时荧光聚合酶链反应(PCR)结合传统分离方法分离DEC体现出非常高的准确性和检测效率,同时避免了志贺菌的漏检;为期1年的监测数据显示,DEC已成为细菌性感染性腹泻病原谱中首位病原,其组成结构呈多样性及显著的季节性特点.
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产肠毒素性大肠杆菌毒力因子与疫苗
产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)所致腹泻是发展中国家的主要公共卫生问题.本文简要介绍了ETEC毒力因子在致病机理中所起的作用,并对近年来ETEC疫苗的研制现状作了重点阐述.
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直接从粪便中检测致犊牛腹泻产肠毒素大肠杆菌的双重PCR方法的建立与应用
目的产肠毒素大肠杆菌(Enterototxigenic, Escherichia Coli, ETEC)是造成人和动物腹泻的主要病原之一,也是造成新生乳用犊牛腹泻的主要原因,一株ETEC可能产生一种或者多种肠毒素.根据产肠毒素大肠杆菌产生的两种主要毒素的基因序列,设计了两对引物,建立多重PCR方法.该方法仅用4.5小时即可检测出导致犊牛腹泻的产肠毒素大肠杆菌菌株,具有敏感度高、特异性强和检测速度快等特点.本试验的目的是用所建立的多重PCR方法来确定ETEC在导致犊牛腹泻中的作用.采用该方法对乳用犊牛的203个腹泻样品进行了检测,结果,用传统的分离培养方法得到的203株典型大肠杆菌中有135株为ETEC;其中LT阳性为105株,ST阳性为126株,LT+ST阳性的为96株,阳性率为66.5%.而采用直接从粪样中提取PCR模板的方法进行PCR,检测到146个犊牛粪样为ETEC阳性,其中LT阳性为112株,ST阳性为137株,LT+ST阳性为103株,阳性率为71.9%,明显高于传统的检测方法;并且所检测到的146个ETEC阳性的犊牛粪样完全包含用传统的分离培养方法得到的135个阳性粪样,且基因分型结果相同.
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致泻大肠埃希菌实验室检测工作的探讨与分析
致泻大肠埃希菌引发的肠道感染疾病越来越多,在肠道病原菌中所占比重已超过志贺菌成为常见的腹泻病原菌[1,2].近年来,嘉兴市陆续出现了多起由该菌引起的食物中毒和门诊病例,2002年本市所辖某县检出了一例由O157:H7(EHEC)引起的病例[3],2005年在本市食物中毒和门诊病例的腹泻病人标本中陆续检出3株与腹泻有关的O125:K70(EPEC)、O164:K?(EIEC)、O25:K19(ETEC),这引起了笔者的高度重视.
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2010年福建南平及永安监测点致泻大肠杆菌的监测报告
目的:为了解福建省腹泻病人中致泻大肠杆菌的感染情况.方法:应用多重PCR或单重PCR方法检测致泻大肠杆菌的EPEC/EHEC eaeA基因、EHEC stx基因、EAEC aggR基因、EIECipaH、EIEC virA、ETEC ST、ETEC LT、EPECbp基因.API 20E生化鉴定条进行生化试验.血清学鉴定.结果:2010年度共分离得19株致泻大肠杆菌,检出率为10.9％.1株EAEC;1株tEPEC；4株aEPEC; 13株ETEC.19株分离的致泻大肠杆菌经API 20E鉴定均为大肠埃希菌.1株tEPEC与EPEC三种多价诊断血清型均不凝集,而1株aEPEC血清型为O111:K58(B4).13株ETEC菌株血清型:多数为O6:K15,1株O25:K19(L),3株未能分型.结论:监测结果对于我们了解福建省致泻大肠杆菌感染情况,预警潜在发生疫情的可能性有其重要性.这些菌种的获得可以为下一步研究其毒力特征、分子分型及耐药性积累原始材料.
