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黑籽重楼化学成分及其抗肿瘤活性研究
目的 研究黑籽重楼Paris thibetica根状茎的化学成分及其抗肿瘤活性.方法 综合运用正相硅胶、Sephadex LH-20、ODS-C18等柱色谱以及半制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,并通过MS、1H-NMR、13C-NMR等波谱学方法进行结构鉴定.采用MTT法研究化合物的体外抗肿瘤活性.结果 从黑籽重楼根状茎的乙醇提取物中分离得到14个化合物,分别鉴定为重楼皂苷Ⅴ(1)、重楼皂苷Ⅰ(2)、重楼皂昔Ⅱ(3)、重楼皂苷Ⅵ(4)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、重楼皂苷H(6)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、重楼皂苷Ⅶ (8)、parisyunnanoside G(9)、trikamsteroside E(10)、豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖(11)、β-谷甾醇棕榈酸酯(12)、β-香树脂醇(13)、4-羟基-5-甲基呋喃-3-羧酸(14).结论 所有化合物均为首次从黑籽重楼中分离得到,化合物10、12～14为首次从重楼属植物中分离得到.化合物1～8对人肝癌细胞BEL-7402有细胞毒活性,其中化合物3活性好,IC50为0.48μmol/L.
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重楼植物的组织培养研究
目的 建立重楼植物愈伤组织培养的快速繁殖体系.方法 文章以黑籽重楼不同处理的芽为外植体,研究了不同消毒时间和激素配比对其外植体愈伤组织诱导与增殖的影响.结果 去芽鞘的芽外植体用升汞消毒8 min时,其污染率较低为(11.97±0.91)％、而启动率却较高为(84.82±2.59)％；诱导去芽鞘的芽外植体产生愈伤组织的佳培养基配方为MS +6-BA 1.0 mg/L+IAA2.0 mg/L,其愈伤组织增殖的佳培养基配方为MS+6-BA0.5 mg/L+ NAA 1.0 mg/L.结论 实验实现了黑籽重楼愈伤组织的诱导和快速增殖,并为进一步研究重楼属其它植物的生物技术研究奠定了技术基础.
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黑籽重楼种内形态标记和ISSR标记的遗传分化研究
该文对黑籽重楼Paris thibetica种内两变种--黑籽重楼原变种Paris thibetica var. thibetica与无瓣黑籽重楼Paris thibetica var. apetala在形态学及ISSR分子标记上的差异进行了研究和比较.形态特征分析表明黑籽重楼原变种与无瓣黑籽重楼在萼片长宽、花药数、花丝长等7个花器官性状方面有显著差异,但通过在主成分分析图上不能明显区分两个变种,两变种总体形态上的分化不明显.ISSR分析上,从100个ISSR引物中筛选出8个引物,在300～1500 bp间共扩增出 36条带,其中黑籽重楼原变种特征带有5条,无瓣黑籽重楼扩特征带有8条.
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黑籽重楼的生药学研究
目的:对重楼药材原植物黑籽重楼进行系统的生药学研究.方法:对黑籽重楼的植物形态、药材特征、药材横切面及粉末进行观察;以重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ为对照品对药材进行薄层鉴别,采用高效液相色谱法测定黑籽重楼中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量.结果:黑籽重楼的原植物特征包括具有侧膜胎座,果开裂,无外种皮,于一侧包以深红色多汁的鸡冠状假种皮;查阅文献,黑籽重楼与云南重楼、七叶一枝花在药材性状上的区别主要表现在表面颜色、形状、环纹、断面上,气味上没有明显的差异;黑籽重楼的横切面结构、粉末特征与云南重楼、七叶一枝花没有明显差异;经薄层色谱鉴别,在黑籽重楼根茎中都含有重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ,含量分别为0.117％、0.081％、0.114％、0.204％;重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的总量为0.516％,与药典标准(含重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的总量不得少于0.60％)存在差异.结论:本研究可为黑籽重楼的鉴定及进一步研究提供科学依据.
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HPLC测定黑籽重楼中的皂苷含量并评价其药材质量
目的 研究不同产地黑籽重楼中10种重楼皂苷的含量.方法 采用HPLC-ELSD法,Kromasil RP-C18 (250 mm×4.6mm,5μm)柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,柱温30℃.氮气流速1.6 L·min-1,检测器漂移管温度45℃.结果 测定了黑籽重楼药材中10种皂苷的含量,在线性范围内线性关系良好(r2＞ 0.9998).结论 所用方法测定重楼皂苷准确,重复性好,可作为黑籽重楼药材质量控制的方法.
