首页 > 文献资料
-
人P2X7真核表达载体的构建及稳定转染细胞株的建立
目的:构建人P2X7基因的真核表达载体,并通过转染获得稳定表达P2X7分子的HEK293细胞株.方法:以人脑组织P2X7cDNA为模板扩增出P2X7基因,插入到真核表达载体pEGFP-N1中,构建重组质粒pEGFP-N1/P2X7.用X-fect试剂盒将重组质粒转柒HEK293细胞,通过G418辅助荧光筛选建立稳定表达P2X7-EGFP细胞株.经流式细胞仪、Western blot和激光共聚焦显微镜检测,了解人P2X7在HEK293细胞中的表达水平及细胞内定位.结果:重组质粒pEGFP-N1/P2X7构建正确,建立了稳定表达人P2X7的HEK293细胞系.Western blot和流式细胞仪检测证实,P2X7在HEK293细胞系中成功表达,激光共聚焦显微镜检测显示P2X7-EGFP定位在细胞膜上.结论:重组载体pEGFP-N1/P2X7构建成功并建立了稳定表达人P2X7的HEK293细胞系,为进一步研究P2X7离子通道结构和功能奠定基础.
-
P2X7基因多态性与急性白血病的相关性研究
0 引言P2X7基因位于12号染色体,有13个外显子,其编码产物是一种选择性离子通道型嘌呤能受体,在造血细胞及免疫细胞中介导ATP诱导的细胞凋亡.发生在P2X7基因外显子13的单核苷酸多态性可以导致P2X7受体功能明显改变,其杂合性改变可使P2X7受体功能下降50%,而纯合性改变可使其功能完全丧失[1].为探讨P2X7基因1513 A→C多态性在急性白血病中的意义,我们对24例急性白血病患者及42例正常对照进行了检测及分析.