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配对免疫球蛋白样受体B在小鼠树突细胞上的表达及其与免疫耐受关系的研究
目的 研究配对免疫球蛋白样受体B(PIR-B)在小鼠树突细胞(DC)上的表达及其与免疫耐受的关系.方法 DC2.4为C57BL/6小鼠来源的不成熟的DC株.脂多糖(LPS)刺激48 h为成熟DC(mDC).分别以重组小鼠IL-10(rmIL-10)、重组人转化生长因子β1(rhTGFβ1)诱导DC2.4为耐受性DC(T-DC),体外化学合成PIR-B特异性RNA小干扰分子(siRNA),以Lip2000转染DC2.4(siDC),分别用半定量RT-PCR、Western blot检测rmIL-10、rhTGFβ1、LPS及PIR-B特异的siRNA对DC2.4上PIR-B表达的变化.以3H-TdR标记检测同种异体淋巴细胞反应(MLR),ELISA法测定MLR上清中IFN-γ的水平变化.结果 RT-PCR、Western blot结果显示DC2.4表达PIR-B mRNA及蛋白相对值为0.51±0.08和0.58±0.23;mIL-10、rhTGFβ1诱导的T-DC上PIR-B的mRNA及蛋白表达相对水平均明显升高,相对值分别为0.85±0.07和0.87±0.14;0.79±0.10和0.85±0.34(P值均＜0.05),LPS刺激的mDC PIR-B mRNA及蛋白表达则降低(0.35±0.10和0.32±0.04,P＜0.05),转染PIR-B特异性siRNA后DC2.4上PIR-B的mRNA及蛋白表达水平也明显受抑,干扰48 h后分别下降了78.9%和74.2%(P＜0.05).正常DC2.4可以刺激异基因淋巴细胞增殖;LPS-DC刺激异基因淋巴细胞增殖的能力明显增强,其反应体系中的IFN-γ水平明显升高;T-DC刺激淋巴细胞增殖的能力明显受到抑制,其反应体系中的IFN-γ水平明显下降;而转染PIR-B siRNA后,DC刺激淋巴细胞增殖的能力得到明显恢复,其反应体系中的IFN-γ水平明显回升.结论 高度表达免疫抑制性受体PIR-B是小鼠DC获得免疫耐受的共同特征及分子机制之一.
