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Pin1在宫颈癌中过表达及其与Ki67关系的研究
目的:探讨宫颈癌中肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1表达、与Ki67的相关性及其临床意义.方法:应用RT-PCR和免疫组化技术检测宫颈癌组织中Pin1 mRNA和蛋白表达水平及其与Ki67蛋白表达的相关性.结果:1)宫颈癌组织中Pin1 mRNA表达明显高于正常宫颈组织(P＜0.05);2)从正常宫颈到CIN再到浸润癌Pin1蛋白表达逐渐增强(P＜0.05);3)Pin1蛋白过表达与临床分期、病理分级、淋巴结转移无明显相关(P＞0.05);但宫颈腺癌Pin1表达明显高于宫颈鳞癌(P＜0.05);4)Pin1过表达与Ki67表达呈显著正相关(P＜0.05).结论:1)Pin1过表达与宫颈癌细胞增殖有关,参与宫颈癌发生发展;2)Pin1过表达可作为宫颈癌诊断的辅助指标.
关键词： 肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1 子宫颈癌 Ki67 -
Pin1基因真核表达载体的构建及在宫颈癌HeLa细胞中的表达
目的 构建一种含人肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1的质粒,以绿色荧光蛋白作为报告基因,观察其在宫颈癌HeLa细胞中的表达.方法 从人宫颈癌HeLa细胞中,以RT-PCR方法扩增出人Pin1基因全长cDNA序列(CDS),插入增强绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1,脂质体法转染HeLa细胞,荧光显微镜下观测绿色荧光蛋白的表达,免疫印迹法检测GFP-Pin1蛋白的表达.结果 RT-PCR扩增出人Pin1基因;构建pEGFP-C1-Pin1重组质粒,体外成功转染入宫颈癌HeLa细胞,在荧光显微镜下可见强绿色荧光蛋白的表达,免疫印迹法证实存在GFP-Pin1蛋白高表达;经G418筛选获得单细胞克隆.结论 重组质粒pEGFP-Pin1体外转染HeLa细胞后,目的基因能够在细胞内有效表达,检测方法简便可靠,为利用转染该目的基因的细胞进行下一步研究提供了实验基础.
关键词： 肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1 质粒构建 基因转染 -
宫颈癌细胞株和宫颈上皮组织中Pin1和Cyclin D1的表达及临床意义
背景与目的:肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1在人类多种肿瘤中过表达,Pin1过表达可增强Cyclin D1表达,在肿瘤发生发展中起重要作用.本研究拟探讨宫颈癌细胞株及宫颈上皮组织中Pin1、Cyclin D1的表达及其临床意义.方法:应用RT-PCR、Western blot法检测HeLa、SiHa、C33a、Caski细胞中Pin1和Cyclin D1基因蛋白表达,免疫组化法检测10例正常宫颈、21例宫颈上皮内瘤样病变、57例浸润癌组织中Pin1和Cyclin D1的表达状况,评价其临床意义.结果:HeLa、SiHa、C33a、Caski细胞存在不同程度Pin1 mRNA及蛋白过表达(P＜0.05).正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变、浸润癌组织中Pin1蛋白表达逐渐增强,分别为0%、47.62%、64.91%(P＜0.05).Pin1蛋白过表达与宫颈癌临床分期、病理分级、淋巴结转移无关(P＞0.05);但宫颈腺癌组织中Pin1表达明显高于鳞癌(P＜0.05).Pin1过表达与Cyclin D1表达呈显著正相关(P＜0.05).结论:Pin1在宫颈癌细胞株及宫颈癌组织中存在mRNA及蛋白水平上的过表达,Pin1过表达与Cyclin D1表达密切相关,Pin1和Cyclin D1异常表达可能参与宫颈癌的发生发展.
