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Slit-Robo信号对黏液表皮样癌细胞凋亡作用的影响
目的:探讨Slit-Robo信号对黏液表皮样癌细胞凋亡的影响及其作用机制.方法:免疫组织化学方法检测Mc3细胞Slit2及Robo1蛋白表达,R5单克隆抗体作用Mc3细胞,采用FITC-AnnexinV/PI法检测细胞凋亡率,流式细胞仪检测细胞周期,DNA梯状电泳及Hoechst/PI双染法检测细胞凋亡发生,流式细胞仪细胞内抗原检测法检测Caspase-3蛋白含量.结果:Mc3细胞表达Slit2及Robo1蛋白,R5抗体作用下细胞凋亡率增高,达到33.6%,形态学观察凋亡细胞明显增多并出现坏死细胞,电泳结果出现梯状条带,S期细胞明显增多,Caspase-3表达水平上调,平均荧光强度达到64%.结论:黏液表皮样癌中Slit-Robo信号可能以抑制细胞凋亡的形式参与肿瘤的形成过程,而这可能是通过Caspase-3蛋白的表达调控实现的.
关键词： Slit-Robo信号 Mc3细胞 R5mAb 凋亡 -
Slit-Robo信号对粘液表皮样癌细胞增殖作用的影响
目的 探讨Slit-Robo信号对粘液表皮样癌细胞系Mc3细胞生长与增殖作用的影响及其作用机制.方法 免疫组织化学方法及流式细胞术细胞内因子检测法检测Mc3细胞Slit2及Robol蛋白的表达；在Robol受体胞外区的单克隆抗体R5作用下,以细胞计数法与软琼脂克隆形成实验观察Mc3细胞生长变化及用流式细胞术细胞内因子检测法检测增殖相关蛋白PCNA的表达.结果 Mc3细胞表达Slit2及Robol蛋白,并且在R5单克隆抗体作用下,Mc3细胞体外生长能力受到抑制,增殖能力明显减弱,PCNA蛋白表达水平下降.结论 Slit-Robo信号可能影响Mc3细胞的生长增殖能力,对肿瘤细胞内的PCNA有正调控作用,提示该信号可能参与粘液表皮样癌的发生及发展过程.
关键词： 粘液表皮样癌 Slit-Robo信号 Mc3细胞 R5 mAb 增殖细胞核抗原 -
靶向RNAi对Mc3细胞中Survivin mRNA表达及细胞增殖的影响
目的 应用RNA干扰技术靶向阻断Survivin基因表达,观察其mRNA表达水平及细胞增殖的变化,探讨其对Mc3细胞的抑制作用.方法 将RNA干扰表达载体Pgenesil-sur通过脂质体介导转染Mc3细胞,采用半定量PCR检测SurvivinmRNA表达量;MTT法检测对黏液表皮样癌细胞的增殖抑制作用.结果 RNA干扰组SurvivinmRNA表达水平(0.61±0.10)比对照组SurvivinmRNA表达水平(3.20±0.11)显著减低,差异有统计学意义(P＜0.01),转染Pgenesil-1空载体组SurvivinmRNA表达水平(3.18±0.12)与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).MTT结果表明转染Pgenesil-sur后细胞增殖受到明显抑制,抑制率达81%;转染Pgenesil-1空载体细胞未受到抑制.结论 靶向SurvivinRNA干扰能阻断肿瘤细胞中Survivin基因mRNA表达,并有效抑制体外培养的Mc3细胞的增殖作用.
关键词： RNA干扰 基因表达 Mc3细胞 Survivin基因 反转录PCR
