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3-甲基腺苷对芹菜素诱导乳腺癌T47D细胞系自噬和凋亡的影响
目的:研究自噬抑制剂3-甲基腺苷(3-methyladenine,3-MA)对芹菜素诱导乳腺癌T47D细胞系自噬和凋亡的影响.方法:常规培养人乳腺癌T47D细胞,分为对照组、3-MA组、芹菜素组、3-MA+芹菜素组.MTT法检测各组的细胞增殖抑制率;GFP-LC3质粒转染观察各组细胞自噬情况;Hochest/Mito-Red/YO-PRO-1染色法观察各组细胞凋亡形态;AnnexinV/PI双染法流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;Western blot法检测LC3及PARP的变化.结果:MTT示3-MA+芹菜素组的增殖抑制率明显高于其他各组(P<0.05);GFP-LC3质粒转染结果显示:对照组,3-MA组及3-MA+芹菜素组自噬不明显,而芹菜素组与其他各组相比自噬明显增多(P
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调节自噬提高人肝癌Bel-7402/FU细胞株对5-氟尿嘧啶的敏感性
目的:探讨细胞自噬对肝癌Bel 7402/FU细胞5-氟尿嘧啶敏感性的影响.方法:选取Bel-7402、Bel-7402/FU细胞株,分为对照组、5-氟尿嘧啶组、自噬抑制剂3-甲基腺苷组以及5-氟尿嘧啶+3-甲基腺苷组,MTT法了解抑制细胞自噬对肝癌5-氟尿嘧啶IC50值的影响;流式细胞术检测抑制细胞自噬对细胞凋亡的影响;GFP-LC3质粒转染观察细胞浆中GFP-LC3分布情况.结果:Bel-7402细胞株与Bel-7402/FU细胞株5-氟尿嘧啶IC50值分别为4.66、68.14 μg/mL,凋亡率分别为13.80％、1.09％.3-甲基腺苷联合5-氟尿嘧啶作用后Bel-7402细胞株与Bel-7402/FU细胞株的氟尿嘧啶IC50值分别为4.31、29.44 μg/mL,凋亡率分别为13.82％、6.86％.在3-甲基腺苷作用下,Bel-7402/5-FU细胞株5-氟尿嘧啶诱导的点状样GFP-LC3的细胞数量减少.结论:抑制细胞自噬可降低Bel-7402/FU对5-氟尿嘧啶IC.0值,诱导细胞凋亡,从而有效地逆转Bel-7402/FU对5-氟尿嘧啶耐药.
