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病毒溶瘤机制研究概况
用病毒作为治疗肿瘤的一种手段可以追溯到上个世纪初期.有报道记载,患有恶性肿瘤的病人当接种狂犬疫苗或患有某种病毒病以后,肿瘤会自发的消退[1,2].20世纪20年代的动物实验证明,病毒能够感染实验小鼠的肿瘤细胞,并使其裂解.50年代又有报道说,新城疫病毒和流感病毒可以有效地裂解小鼠的肿瘤细胞[3].
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Ⅰ型单纯疱疹病毒单克隆抗体的制备及其应用
目的：：制备并筛选HSV-1单抗,建立定量检测HSV-1病毒颗粒抗原的双抗体夹心ELISA方法,用于HSV-1病毒颗粒的质控。方法：以HSV-1免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,以筛选的中和单克隆抗体1F6为捕捉抗体,HRP标记的2B1为检测抗体,构建定量检测HSV-1病毒颗粒抗原的双抗体夹心ELISA方法,并对本方法的特异性、灵敏度、精密度、准确性和线性等性能进行验证。用本方法定量检测的病毒量与病毒滴度作回归分析。结果：构建的双抗体夹心定量检测HSV-1病毒颗粒抗原的ELISA方法,线性范围为0．125~2μg/ml,相关系数为R2=0．9955,定量限度为0．125μg/ml,试剂的变异系数CV<10%,抗原回收率介于85．6%~107．1%之间。与HSV-1以外的其他样本无交叉反应。本方法检测与病毒感染滴度具有很好的相关性。结论：成功构建了定量检测HSV-1含量的ELISA方法,为HSV-1病毒颗粒抗原定量检测提供快速手段。
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Mx1基因表达对VSV溶瘤敏感性的影响
目的：研究3种小鼠肿瘤细胞系鼠黏病毒蛋白1（Mx1）基因表达对水泡性口膜炎病毒（vesicular stoma-titis virus， VSV）溶瘤效应的敏感性。方法将本实验室定量后的VSV保种并用来攻击3种不同种类的肿瘤细胞系：RAW264．7（小鼠巨噬细胞白血病）、B16（黑色素瘤）、HEPA1－6（小鼠肝癌）细胞系，48 h后通过TCID50法和MTT法检测3种肿瘤细胞系对VSV的敏感性。 RT－PCR检测VSV感染3种肿瘤细胞系24 h后Mx1基因的诱导表达水平，证实肿瘤细胞系的溶瘤敏感性与Mx1基因表达的关系；应用RNAi技术抑制Mx1基因的表达水平， MTT法检测RAW264．7细胞系（不敏感细胞系）与B16细胞系（敏感细胞系）溶瘤效果的改变。结果用VSV攻击3种肿瘤细胞系呈现出的敏感性依次为B16＞HEPA1－6＞RAW264．7。通过RT－PCR检测VSV感染3种鼠源肿瘤细胞系Mx1基因的表达水平表明：Mx1基因的表达水平越高，VSV对肿瘤细胞的溶瘤敏感性越低。应用RNAi技术抑制RAW264．7细胞系（不敏感细胞系） Mx1基因的表达， VSV对该细胞系溶瘤敏感性提高了35％，抑制B16细胞系（敏感细胞系） Mx1基因的表达，VSV对该细胞系溶瘤的敏感性提高了30％。结论通过RNAi抑制鼠源肿瘤细胞系抗病毒蛋白Mx1基因的表达水平，可促进VSV溶瘤的敏感性。
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溶瘤腺病毒在肿瘤基因治疗中的应用
溶瘤腺病毒在肿瘤的基因治疗中有重要意义,病毒E1A基因本身具有抗肿瘤作用,还能作为载体携带外源性治疗基因,增强其抑制肿瘤的能力.但肿瘤靶向性以及体内抗肿瘤效果的实现还有待于进一步研究提高,以利于临床应用.
关键词： 病毒治疗 溶瘤 腺病毒E1A蛋白质类 基因疗法
