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清洗后石蜡油对昆明小鼠胚胎培养及其发育的影响
目的 建立有效而简便的石蜡油清洗回收系统,并检验其对昆明白小鼠胚胎培养的效果. 方法 石蜡油分为:对照组、回收组、医用组及化学纯组.除对照组之外各组均行清洗石蜡油三步处理回收法.手术收集小鼠1-细胞阶段的胚胎,用TE培养液培养,观察胚胎发育情况并进行胚胎移植. 结果 石蜡油回收组培养,从2-细胞到囊胚的比例均高于对照组,囊胚的形成速度比对照组快.囊胚率回收组为23%,对照组17%.回收组胚胎移植的产仔率为44%、对照组为16%;清洗与未清洗医用石蜡油都能支持胚胎发育到囊胚;化学纯轻质石蜡油经清洗后可有效提高囊胚的发育率.并提高胚胎及胎盘的重量. 结论 本石蜡油清洗回收系统效果良好,适用于胚胎培养.
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小鼠1-细胞胚胎体外培养条件的研究
目的检验培养基(Whitten、CZB、SOM和KSOM)、培养器皿(进口、国产新旧平皿)与配制培养基的水质对小鼠胚胎体外发育的影响. 方法采用微滴培养法培养昆明种小白鼠1-细胞胚胎,以胚胎发育到囊胚的比例为判断培养效果的标准. 结果 Whitten、CZB、SOM和KSOM培养基中2-细胞发育率分别为100%、100%、100%和98.6%,而囊胚发育率却分别为0%、78.3%、4.8%和9.5%;用三蒸水、五蒸水和去离子水配制的CZB培养基,培养囊胚发育率分别为40.8%、54.1%和52.4%;国产和进口新平皿的囊胚发育率分别为68.0%和72.2%;国产和进口旧平皿的培养囊胚发育率为27.2%和46.1%. 结论昆明小白鼠早期胚胎存在体外发育阻断现象;CZB培养基培养昆明小白鼠早期胚胎效果好;用三蒸水、五蒸水和去离子水配制的CZB培养基培养结果无显著差别;进口和国产新平皿的培养效果相近,但再次使用时培养效果显著下降.
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黄芪多糖对小鼠1-细胞胚胎体外发育效果的初步研究
目的 探讨黄芪多糖对小鼠1-细胞胚胎体外发育的作用. 方法 以mCZB添加抗生素为对照组,以添加不同浓度黄芪多糖(Astragulus Polysacharin,Aps)为试验组,观察胚胎体外发育率、孵化胚胎细胞数目及切割取样后桑椹胚发育率和细胞数目.结果 体外培养96 h,试验组囊胚发育率(86.0%、85.8%、89.5%)均显著高于对照组(75.8%)(P＜0.05),各试验组间差异无显著性 (P＞0.05);体外培养144 h,试验组胚胎孵化率(28.9%、31.0%、25.4%)均高于对照组(22.6%),以Aps2(100 μg/mL)组孵化率为高(31.0%).孵化胚胎细胞数试验各组(76.00±6.25、81.73±7.01、75.89±4.54)均极显著高于对照组(69.06±5.15)(P＜0.01).切割取样(≤5或＞5个)后桑椹胚体外培养72 h,试验组发育率和细胞数分别为(≤5组为50%和44±2.7、50%和53±2.7、44.4%和55±2.7;＞5组为23.1%和42±1.6、20.0%和44±1.0、14.3%和41±1.0)均高于对照组(33.3%和41±1.7;0%和0).结论 中药有效成分黄芪多糖能促进小鼠早期胚胎的体外发育及胚胎细胞增殖,并对切割取样后胚胎的体外培养有一定促进作用,且切割样本数≤5对胚胎发育比较有利.
