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  • 人类低质量卵裂期胚胎体外发育至囊胚能力的研究

    作者:甄璟然;王雪;孙正怡;郁琦;邓成艳;周远征;何方方

    目的 探讨体外受精(IVF)治疗中D3低质量胚胎培养至囊胚的发育潜能,为囊胚的培养和冷冻提供依据.方法 2010年6~12月进行IVF治疗的患者 398例,D3移植后剩余的总胚胎数2,180枚.其中形态学较低质量胚胎1,546枚,采用序贯法微滴培养,D3~D6连续观察囊胚形成情况,比较不同细胞数、碎片含量不同的胚胎囊胚形成的比例.结果 1,546枚低质量胚胎,于D5~D6形成426枚囊胚,囊胚形成率为27.56%.其中6 Ⅲ、Ⅳ级为40.9%(318/778);5Ⅰ、Ⅱ级为28.8%(30/104);4Ⅰ、Ⅱ级为8.9%(16/180),4Ⅲ、Ⅳ级为19.7%(56 /284);2~3Ⅰ、Ⅱ级为3.0%(6/200).经统计学分析,碎片较多的胚胎中,卵裂球数目较多的胚胎,囊胚形成率较高.结论 D3形态学较低质量胚胎仍有部分具有发育至囊胚的潜能,因此在D3时对这些胚胎继续进行培养至D6,可能减少胚胎的浪费并得到更好临床结局.

  • 姐妹胚胎体外形成囊胚的时间、数量与D3胚胎移植结局关系的研究

    作者:尹太郎;丁锦丽;张怡;徐望明;龙文;杨菁

    目的 探讨姐妹胚胎形成囊胚的时间、数量与D3胚胎移植结局的关系. 方法 回顾性分析2013年1月至2014年5月在本中心行D3移植后剩余的姐妹胚胎继续囊胚培养的患者的临床资料.根据剩余胚胎继续培养有无囊胚形成分为囊胚形成组及对照组,再根据形成囊胚的时间分为D5组、D6组以及D5和D6均有囊胚形成的D5+ D6组,比较组间的种植率、临床妊娠率和流产率;分析D3移植胚胎的种植率及临床妊娠率与姐妹胚胎体外培养形成囊胚的能力及速度的相关性;再进一步分析用于囊胚培养的非优质胚胎数≥5的周期姐妹胚胎形成囊胚的情况与移植结局的关系. 结果 (1)囊胚形成组与对照组的种植率(31.34% vs.19.41%)及临床妊娠率(50.14% vs.32.84%)均有统计学差异(P<0.01);D5组、D6组及D5+D6组的种植率(分别为34.42%、29.01%、31.42%)及临床妊娠率(分别为53.27%、47.92%、50.00%)均显著优于对照组(分别为19.41%和32.84%)(P<0.05);D5组、D6组与D5+ D6组组间种植率及临床妊娠率均无统计学差异(P>0.05),但D5组有升高趋势;(2)形成囊胚的个数与D3移植胚胎的种植率及临床妊娠率呈显著正相关(r=0.749,P<0.05;r=0.752,P<0.05);(3)非优质胚胎数≥5的周期中,囊胚形成率≥40%组的种植率及临床妊娠率均显著高于囊胚形成率20%~40%组和<20%组(43.01% vs.29.43% vs.23.12%,P<0.05;67.39% vs.47.48% vs.38.58%,P<0.01),但3组间的流产率及多胎率均无统计学差异(P>0.05). 结论 姐妹胚胎体外形成囊胚的速度及能力可能用于预测D3移植胚胎的临床结局.

  • 比较time-lapse培养和常规体外受精胚胎培养对临床结果的影响

    作者:张欢;郑屹;王海青;周颖;周玮;吴永根;黄学锋

    目的 比较分析延时摄像胚胎观测技术(time-lapse)培养和常规体外受精(IVF)胚胎培养对临床结局的影响.方法 回顾性分析2013年10月至2015年1月期间110例time-lapse周期和2 274例常规IVF胚胎培养周期的临床结果.分别在周期受精数≤10和>10的情况下,比较time-lapse培养周期和常规IVF胚胎培养周期的卵裂数、D3优质胚胎数、D3优质胚胎率、种植率、临床妊娠率. 结果 在周期受精数≤10的情况下,time-lapse培养周期组和常规IVF胚胎培养周期组的卵裂数、优质胚胎数、优质胚胎率比较均无显著性差异(P>0.05),两组种植率(30.1% vs.35.4%)和临床妊娠率(47.7%vs.55.5%)亦无统计学差异(P>0.05).而在周期受精数>10的情况下,time-lapse培养周期组和常规IVF胚胎培养周期组的种植率(56.8% vs.40.0%)和临床妊娠率(77.8% vs.57.5%)均存在显著性差异(P<0.05). 结论 受精数>10的周期通过time-lapse培养,可以获得比常规IVF培养更高的种植率和临床妊娠率.

  • 胞质完整的无透明带卵母细胞临床利用价值探讨

    作者:马超;邵小光;金波;张振强

    目的 探讨胞质完整的无透明带卵母细胞(ZFO)的临床利用价值. 方法 选取本中心2016年1月至12月接受ICS1治疗的123例不孕症患者,根据卵母细胞有无透明带分为2组:36个ICSI周期中的36枚ZFO作为实验组,87个ICSI周期中749枚透明带完整的成熟卵母细胞作为对照组.比较两组患者一般临床特征、促性腺激素(Gn)用量及天数、HCG日血清雌二醇(E2)水平及平均获卵数,同时对两组的受精率、双原核(2PN)受精率、异常受精率、卵裂率、囊胚形成率及优质囊胚形成率进行比较分析. 结果 两组患者的年龄、不孕年限、体重指数(BMI)、基础FSH水平、Gn用量及使用天数、HCG日E2水平及平均获卵数差异均无统计学意义(P>0.05);实验组与对照组ICSI后的受精率、2PN受精率、异常受精率、卵裂率、囊胚形成率及优质囊胚形成率相比较,差异均无统计学意义(P>0.05). 结论 无透明带卵母细胞可以正常受精、卵裂并发育为囊胚;若患者在无可利用胚胎的前提下,临床上可以考虑将其利用,以增加患者的累积妊娠率.

  • 冷冻胚胎解冻后质量对临床妊娠结局的影响

    作者:赵杰;陈秀娟;刘芳;梁琳;梁磊;王萨仁;侯石磊

    目的 探讨胚胎解冻后损伤及过夜培养后生长情况对临床妊娠结局的影响. 方法 回顾性分析冻融胚胎移植周期303例,共349个周期.(1)根据所移植胚胎卵裂球的损伤程度,分为移植的胚胎均无损伤的完整组(A1,n=193)、全部移植的胚胎均有卵裂球损伤的损伤组(A2,n=30)和移植既有完整胚胎又有卵裂球损伤胚胎的损伤混合组(A3,n=126);(2)解冻后胚胎经过夜培养,所移植胚胎均有不同程度生长的定为生长组(B1,n=187),所移植胚胎均未见生长的未生长组(B2,n=46)和所移植胚胎既有生长的胚胎又含有未生长胚胎的生长混合组(B3,n=116);(3)在生长组及生长混合组中,有胚胎达到桑葚胚状态的桑葚胚组(C1,n=86),无胚胎生长到桑葚胚的无桑葚胚组(C2,n=217);比较各组之间的妊娠率、种植率、活产率、流产率之间的差别. 结果 解冻后完整组(A1)及损伤混合组(A3)妊娠率分别为45.08%、40.48%,均显著高于损伤组(A2)(20%)(P=0.01,0.036);完整组(A1)种植率(24.25%)显著高于损伤组(A2)(11.11%)(P=0.02),活产率及流产率相应组间比较无显著性差异(P>0.05);解冻后经过夜培养,生长组(B1)妊娠率(47.06%)显著高于生长混合组(B3)(34.48%)(P=0.031),生长组(B1)种植率(26.34%)显著高于未生长组(B2)(17%)及生长混合组(B3)(16.16%)(P=0.049,0.002).桑葚胚组(C1)的妊娠率、种植率均显著高于无桑葚胚组(C2) (54.65%vs.37.33%,28.28% vs.19.76%)(P=0.006,0.015). 结论 胚胎解冻后胚胎的完整性对妊娠结局有利;胚胎解冻后经过夜培养,有卵裂球细胞生长的胚胎能够获得较高的种植率及妊娠率,且生长为桑葚胚者能够获得较高的妊娠结局.

  • 清洗后石蜡油对昆明小鼠胚胎培养及其发育的影响

    作者:李卉;张丽宣;钟毓;朱凯;张田;王敏康

    目的 建立有效而简便的石蜡油清洗回收系统,并检验其对昆明白小鼠胚胎培养的效果. 方法 石蜡油分为:对照组、回收组、医用组及化学纯组.除对照组之外各组均行清洗石蜡油三步处理回收法.手术收集小鼠1-细胞阶段的胚胎,用TE培养液培养,观察胚胎发育情况并进行胚胎移植. 结果 石蜡油回收组培养,从2-细胞到囊胚的比例均高于对照组,囊胚的形成速度比对照组快.囊胚率回收组为23%,对照组17%.回收组胚胎移植的产仔率为44%、对照组为16%;清洗与未清洗医用石蜡油都能支持胚胎发育到囊胚;化学纯轻质石蜡油经清洗后可有效提高囊胚的发育率.并提高胚胎及胎盘的重量. 结论 本石蜡油清洗回收系统效果良好,适用于胚胎培养.

  • 两种人类体外受精实验室培养液质控方法敏感性的比较

    作者:张文红;孙筱放;廖宝平;陈欣洁;周华;朱伟杰

    目的探讨两种人类体外受精实验培养系统对培养液质量控制的敏感性差别.方法应用小鼠2-细胞胚胎发育实验(MEA)和人精子体外存活实验(HSMA),分别对人类体外受精实验使用培养液进行质量检测,检测结果进行χ2分析.结果2-细胞MEA组,检测20个批次的培养液中,合格10个批次,合格率为50%;相同培养液在HSMA中,合格率为80%;两者比较有显著性差异(P<0.05).结论2-细胞MEA对人类体外受精实验室培养液中胚胎毒性物质的敏感性显著高于HSMA,MEA更适合于对培养液进行质量控制检测.

  • 利用鼠胚实验对新建人类辅助生殖实验室进行质量控制分析

    作者:屈春凤;莫凤明;蒋军松;韦福庆;韦海燕

    目的 利用鼠胚实验(MEA)对我院新建IVF实验室培养体系进行评估,检测其是否符合人类胚胎体外培养的要求.方法 利用昆明系小白鼠进行体内、体外受精实验,体外受精实验:小白鼠经药物促排后,手术获取雌雄配子后行体外授精培养;体内受精实验:小白鼠经药物促排后合笼交配,手术获取体内受精原核胚培养.观察并记录两组胚胎体外培养的发育情况.结果 体外受精实验共25个周期,总获卵数1023个,其受精率、卵裂率及2-细胞囊胚形成率分别为80.4%、95.1%及77.1%;体内受精实验共17个周期,总获卵数642个,其中原核胚513个,受精率、卵裂率及2-细胞囊胚形成率分别为79.9%、97.1%及80.9%.结论 通过鼠胚体内、体外实验综合评估我院新建辅助生殖实验室的培养条件,其实验结果符合人类辅助生殖实验室的质控标准.

  • 培养液中不同蛋白添加物对IVF/ICSI-ET植入前胚胎发育及临床妊娠结局的影响

    作者:唐宁;孔令北;刘海萍;王建业

    目的 比较研究血清替代补充成分(SSS)和人血清白蛋白(HSA)作为培养液蛋白添加物对IVF/ICSI-ET植入前胚胎发育和临床妊娠结局的影响,从而优化IVF/ICSI-ET胚胎培养方案. 方法 回顾性分析本中心2013年5~9月和2014年同期IVF/ICSI-ET统计数据,其中2013年患者胚胎培养使用10% HSA作为蛋白添加物,而2014年患者胚胎则使用20% SSS作为蛋白添加物.根据培养液蛋白添加物的不同将患者分SSS组和HSA组,并对行IVF和ICSI的患者分别进行患者基本情况、胚胎发育和妊娠情况的比较. 结果 对于行IVF的患者而言,SSS组和HSA组在患者年龄、不孕年限、平均促性腺激素(Gn)量、Gn使用天数、获卵数、受精率、卵裂率、移植胚胎数、妊娠率和着床率方面均无统计学差异(P>0.05),而SSS组优质胚胎率(63.20%)和胚胎冻存率(76.58%)均显著高于HSA组(分别为50.39%和68.74%)(P<0.05);对于行ICSI的患者而言,SSS组和HSA组在患者不孕年限、平均Gn量、Gn使用天数、受精率、卵裂率和妊娠率方面均无统计学差异(P>0.05),但SSS组年龄[(32.76±0.28)岁]、优质胚胎率(61.80%)和胚胎冷冻率(68.29%)均显著高于HSA组[分别为(30.03±0.31)岁、51.12%和60.09%,(P<0.05),而SSS组胚胎着床率(24.29%)显著低于HSA组(29.23%)(P<0.05);将行ICSI的患者按年龄(<35岁和≥35岁)]分组分析显示,在不同年龄段,SSS组和HSA组在临床妊娠率和胚胎着床率方面均无统计学差异(P>0.05). 结论 相对于HSA,SSS能够促进IVF/ICSI-ET植入前胚胎的发育,提高卵母细胞的利用率,但并不能改善临床妊娠结局,可以作为优化胚胎培养的合适蛋白添加物.

  • 实验室环境对体外受精-胚胎移植及卵胞浆内单精子注射结局的影响

    作者:杨健之;洪蕾;刘嘉茵

    体外受精及胚胎培养是一个复杂的过程,其对环境中的空气质量、温度、pH及光线等要求非常严格.本中心自1997年开展体外受精-胚胎移植(IVF-ET)及卵胞浆内单精子注射(ICSI)工作以来,对实验室的条件进行了逐步的改进,从而提高了妊娠率,并对一些影响体外受精及胚胎培养的因素有了进一步的认识.

  • 辅助生殖技术中低氧浓度胚胎培养的meta分析

    作者:牛子儒;岳晓静;孔群钰;王元芬;侯彩英;姚元庆

    目的:用meta分析方法探讨低氧浓度胚胎培养对体外受精/卵胞浆内单精子注射临床结局的影响.方法:计算机检索PubMed、Ebase、Cochrane Database、中国知网(CNKI)、中国生物医学文献服务系统(CBM)、万方数据库,收集国内外有关低氧浓度胚胎培养的随机对照试验(RCTs).对纳入的研究进行质量评价,采用RevMan5.1软件对种植率、妊娠率等进行meta分析.结果:排除不符合纳入标准、失访人数不明确、重复发表、文献质量过低的研究后,共纳入10项RCTs,累计调查对象5 520例,其中低氧组2 645例,常氧组2 875例.meta分析显示:与常氧培养相比,低氧培养可提高着床率(OR =1.16,95% CI:1.05~1.29,P=0.01)、继续妊娠率(OR=1.32,95%CI:1.12~ 1.55,P<0.001)及临床妊娠率(OR=1.28,95% CI:1.07~1.53,P=0.008),且不增加多胎妊娠率(OR=1.19,95% CI:0.67 ~2.14,P=0.32)及流产率(OR =0.98,95% CI:0.63~ 1.53,P=0.93).结论:低氧浓度胚胎培养可以一定程度地提高种植率及妊娠率,且不增加多胎及流产的风险,但更确切的效果仍需更多观察指标的大规模长期随机对照研究加以确认.

  • 白芸豆植物凝集素对小鼠胚胎发育的影响

    作者:张丽芬;王昌梅;杨明洁;张田;王敏康

    目的:研究不同浓度的白芸豆提取物PHA(植物凝集素)对小鼠胚胎体外发育的影响.方法:实验一,采用添加不同浓度PHA的M16培养液培养小鼠2-细胞期胚胎,观察72 h后的发育情况,记录囊胚及各阶段胚胎的数目.实验二,用与实验一相同浓度的PHA预处理从1-细胞到囊胚不同发育阶段的胚胎24 h,然后移人不含PHA的培养液中继续培养,观察到囊胚或孵化囊胚的发育率.结果:含低质量浓度PHA的培养液有促进小鼠胚胎发育的作用,即50,100 mg·L-1的PHA可显著增加囊胚的数量.而含高质量浓度PHA(>1 000 mg·L-1)的培养液会使胚胎发育停滞在1-细胞到囊胚的不同时期,并随浓度增加表现为副凋亡或致死现象.结论:不同浓度PHA可对小鼠胚胎的体外发育具有不同的作用.1-细胞阶段的胚胎对PHA处理具有较高的敏感性.在作用时间上,24h PHA预处理即可表现出对胚胎发育的促进或抑制作用.低浓度的PHA可促进胚胎发育,而高浓度的PHA则导致小鼠胚胎发育停滞,出现副凋亡或死亡.

  • 小鼠合子对常用人体外受精培养液敏感性较高

    作者:曾湘晖;罗海霞;沈莉平

    培养液的质量在体外受精(in vitro fertilization IVF)、胚胎培养过程中至关重要,检测培养液和实验用品中是否存在胚胎毒性物质是确保IVF成功的关键.小鼠2-细胞期胚胎培养实验是人类IVF实验室用于检测培养液质量的方法之一,其结果能较好地反映培养液的优劣,而单细胞期合子胚胎培养实验是对IVF使用培养液进行质量检测的一种更灵敏的方法.与2-细胞期比较,小鼠合子有更严格的生长条件.本实验分别使用小鼠2-细胞期胚胎和合子胚胎培养对IVF不同批号培养液进行质量检测,并对实验结果进行比较分析,为更好地选用实验室培养液质控方法提供参考.

  • 小鼠卵母细胞体外成熟培养系统的建立与优化

    作者:葛丽;杜辉;刘立伟;苏衍萍

    目的 探讨激素刺激时间、体外培养时间对小鼠卵母细胞核成熟及不同激活方案对卵母细胞孤雌激活、胚胎发育能力的影响.方法 孕马血清促性腺激素(PMSG)超排处理,在体外培养的不同时间点检测卵母细胞核成熟率(每个处理至少重复3次,3只/重复,以下实验相同).分别采用乙醇结合6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)法和SrCl2法激活卵母细胞,胚胎培养液选用CZB[胎牛血清(FBS)或牛血清清蛋白(BSA)]两种,确定佳激活方案.对不同时间点成熟的卵母细胞进行激活,确定佳激活卵龄.研究缩短PMSG刺激时间对卵母细胞发育的影响.结果 将PMSG刺激时间从46h缩短至24h,卵母细胞获得高核成熟率(97.6% vs 91.9%)的培养时间由14h延长至16h;缩短PMSG刺激时间,核成熟率不受影响,但能显著降低激活率(91.2% vs37.1%)和囊胚率(20.9% vs0.0%).两种方法体内成熟卵母细胞激活率均高于90%,但囊胚率差异显著(P<0.05).卵母细胞体外培养至24~26h时,激活率(89.5%)和囊胚率(21.9%)均达到高点.结论 建立了一种小鼠卵母细胞体外成熟培养系统,即PMSG超排处理46h、卵母细胞培养24h,CZB(10mmol/L SrCl2)激活2.5h后采用CZB (0.5% BSA)进行胚胎培养.

  • 超短精卵共孵育时间对小鼠体外受精的影响

    作者:江楠;王玉洁;徐营;刘霞;蔡文伟;常永富;华科

    目的 探讨不同精卵共孵育时间对小鼠体外受精受精率、氧化应激产生及胚胎质量的影响,及小鼠体外受精短的精卵共孵育时间.方法 分别比较ICR小鼠精卵共孵育30s、2min、10min、0.5h、2h、4h及18h的体外受精的受精率及囊胚形成率,并对精卵共孵育0h、2h及18h培养液的丙二醛浓度进行检测.结果 各组获得卵细胞数分别为52、53、53、46、48、48及47,受精率分别为67.3%、81.1%、83.0%、87.0%、85.4%、81.3%及48.9%.精卵共孵育30s组的受精率显著低于0.5h及2h组(P<0.05),而18h组的受精率显著低于2min、10min、0.5h、2h及4h组(P<0.05).2min组的受精率相比10min、0.5h、2h及4h组均无差异(P>0.05).各组的囊胚形成率分别为82.9%、65.1%、70.5%、67.5%、75.6%、71.8%及65.2%,两两比较差异均无显著性(P>0.05).精卵共孵育0h、2h及18h丙二醛浓度检测的均值分别为(1.06 ±0.21)×10-3mol/L、(1.44 ±0.22)×10-3mol/L及(2.00±0.21) ×10-3moL/L,各组间两两比较差异均有显著性(P<0.05),丙二醛浓度随着精卵共孵育时间的缩短而降低.结论 小鼠体外受精精卵共孵育时间缩短至2min不会降低受精率,同时随着孵育时间的缩短,产生的氧化应激也随之减少.

  • 骨桥蛋白对小鼠体外受精及早期胚胎发育的影响

    作者:周筠;谢青贞;陈颖娴

    目的 探讨骨桥蛋白(OPN)对小鼠体外受精及早期胚胎发育的影响. 方法 120只昆明雌鼠和30只雄鼠,采用体外受精、胚胎培养方法,将小鼠精子、卵子、原核期胚胎和2-细胞期胚胎分别用不同浓度的OPN抗体预处理,观察小鼠受精、卵裂以及早期胚胎发育情况. 结果 不同浓度的OPN抗体分别预处理精子和卵子后,与对照组比较,受精率显著降低(P<0.01).OPN抗体预处理原核期胚胎后,0.01mg/L OPN抗体组的卵裂率较对照组低,但差异无显著性(P =0.052),1.00mg/L OPN抗体组的卵裂率低于0.01 mg/L组(P<0.01)及0.10mg/L组(P<0.05).不同浓度的OPN抗体预处理2-细胞胚胎后可抑制胚胎发育.1.00mg/L OPN抗体组的4-细胞率和8-细胞率与0.10mg/L OPN抗体组相比差异无显著性(P>0.05),但前者的囊胚形成率显著低于后者(P<0.01).1.00mg/L OPN抗体组的4-细胞率、8-细胞率以及囊胚形成率均显著低于0.01 mg/L OPN抗体组(P<0.01). 结论 OPN可促进小鼠的受精和早期胚胎发育.

  • 不同电融合和激活参数对猪体细胞核移植胚胎发育的影响

    作者:阎新龙;林艳丽;刘珠果;吴晓洁;周艳荣;温叶飞;陈红星;邓继先

    目的:摸索猪体细胞核移植佳的融合和激活条件.方法:利用体外成熟的去核猪卵母细胞为受体,颗粒细胞为供核细胞,透明带间隙注射法构建重构胚,对电融合和激活的参数(电场强度、脉冲宽度、脉冲次数、融合液中Ca2+浓度、联合激活参数)进行摸索.结果:发现在电场强度1.5 kV/cm,脉冲宽度30 μs,2次脉冲(间隔3 s),电融合液中0.1 mmol/L的Ca2+浓度下进行电激活,进而用(CB,7.5 μg/ml)+(6-DMAP,2 mmol/L)激活3.5 h发育率高,48 h卵裂率为72.5%,第6天桑葚胚率为35.1%;初次尝试了在胚胎培养前48 h加入0.05 mol/L的甘露醇来增加渗透压以减少电激活后重构胚的碎片化程度,但发现卵裂率及桑葚胚发育率与对照组差异不显著.结论:初步得到了适宜的猪体细胞核移植的融合和激活条件,为随后克隆胚早期发育基因的研究打下了基础.

  • 体外受精-胚胎移植中子宫内膜容受性的评价及治疗

    作者:路鸿艳;黄雨恢;崔艳国

    体外受精(IVF)-胚胎移植(ET)中,影响女性能否成功妊娠的两个重要环节是胚胎的质量和子宫内膜的容受性.随着控制性超促排卵、IVF和胚胎培养等方面的改进,胚胎数量、质量已逐渐得到优化,但由于条件的限制,对子宫内膜容受性的研究尚未得到平行发展,致使子宫内膜容受性成为决定IVF-ET成功与否的关键因素之一.子宫内膜容受性是指子宫内膜对胚胎的接受能力,即允许胚胎黏附其上直至植入完成的特定阶段,其受严格的时间和空间限制.人类能接受胚胎种植的内膜环境只存在于某一特定时期,即种植窗,一般是排卵后5~7 d.IVF-ET着床失败的病例中南于子宫内膜容受性原因导致的约占2/3[1].

  • 昆明小鼠成熟卵母细胞体外受精及受精卵体外培养的研究

    作者:孙新明;魏泓;赵永聚;王勇;李福兵;王爱平;倪勇

    目的通过比较获能受精液成分及成熟卵母细胞的处理方法,观察对昆明小鼠体外受精(IVF)效果的影响和用于早期胚胎培养的三种发育培养液培养效果,探讨并建立起适合于昆明小鼠卵子体外受精与受精卵体外发育的实验体系.方法用T6或FM两种获能受精液对采自昆明雄鼠附睾尾的精子与成熟卵母细胞进行体外受精(IVF),受精前对成熟卵母细胞选用透明质酸酶去除卵丘细胞和不去卵丘细胞(对照组)两种方法进行处理,受精卵分别用M16、改良的CZB液(mCZB)和改良的M16液(mM16)三种发育培养液对体外受精胚进行培养.结果选用FM获能受精液的受精率极显著高于T6液(92.3%对64.7 %),且体外受精前先用透明质酸酶处理的成熟卵母细胞比对照组成熟卵母细胞受精率要低(59.2%对64.7%),但差异不显著;用mM16培养液进行培养时桑胚率及囊胚率(55.3 %和35.6%)显著高于mCZB(13.3%和8.1%)和M16培养液(17.3%和14.7%),后两者差异不显著.结论昆明小鼠卵子体外受精时宜选用FM受精获能液,不宜用透明质酸酶去除卵丘细胞,且宜选用mM16培养液对昆明小鼠体外受精卵进行早期培养,其中的亚硫磺酸钠可有效的克服2-细胞胚后的体外发育阻滞现象.

  • 时差成像系统挑选优质胚胎对IVF-ET妊娠结局的改善作用

    作者:梁泳娜;梁见弟;陈燕锋;刘志刚

    目的 探讨时差成像系统(TLI)挑选优质胚胎对体外授精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局的影响.方法 收集本中心2015年8月~2017年5月接受IVF-ET的不孕症患者98例,随机分组,采用TLI动态观察筛查胚胎进行ET的47例常规IVF治疗患者为实验组(A组),同期51例采用传统培养方法的常规IVF治疗患者为对照组(B组),根据形态学标准挑选胚胎进行ET,并比较妊娠结局.此外,再选取53例常规IVF治疗的患者共478枚胚胎,每个周期胚胎随机分为两组,采用TLI集簇培养的胚胎记为C组,微滴单胚胎常规方法培养记为D组,比较两组2PN来源的胚胎培养结果差异.结果 实验组(A组)与对照组(B组)的D3优质胚胎率、临床妊娠率、胚胎种植率、早期流产率差异均无统计学意义(P>0.05);实验组(A组)种植胚胎与未种植胚胎相比,原核消失时间(tPNF),发育至2细胞时间(t2)、2细胞分裂至3细胞持续时间(cc2)、3细胞分裂至4细胞持续时间(s2),差异有统计学意义(P<0.05),发育至3细胞、4细胞、5细胞时间(t3、t4、t5),差异均无统计学意义(P>0.05).C组与D组来源于2PN的胚胎,卵裂率、D3优质胚胎率、D3可利用胚胎率、囊胚形成率、优质囊胚率差异均无统计学意义(P>0.05).结论 采用TLI挑选优质胚胎安全可行,非侵入性评估能够掌握完整的胚胎发育信息,TLI筛选参数可预测胚胎发育潜能,利于临床选择优质胚胎移植,改善妊娠结局.

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