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小鼠4-1BBL基因真核表达载体构建及其在COS-7细胞中的表达

刘承利;窦科峰;臧晓霞;朱帮福;柴玉波;杜可军;陈苏民

摘要: 目的:构建含小鼠4-1BBL编码区cDNA序列的真核表达载体,并检测其在COS-7细胞中的表达.方法:将目的基因4-1BBL克隆入pUC19载体中并进行酶切鉴定和DNA序列测定. 亚克隆入真核质粒pIRES2-EGFP,构建真核表达载体pIRES2-EGFP-m4-1BBL. 用脂质体法将重组质粒转入COS-7细胞,以RT-PCR和观察细胞内荧光的方法检测m4-1BBL的表达.结果:酶切鉴定和序列分析证实,重组质粒含有人4-1BBL全长cDNA编码序列,转染实验表明4-1BBL基因能在COS-7细胞中表达. 结论:鼠4-1BBL全长cDNA基因真核表达载体构建及其在COS-7中的表达均获成功,为进一步研究奠定了基础.

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