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生物素链霉亲和素系统基因芯片检测ApoE基因多态性

许睿;宋家武;乔薇;黄小燕;郭国威;魏涛;杨永强

摘要: 目的:建立一种准确、简便、低成本的临床实用型ApoE基因多态性芯片检测技术。方法通过基因文库获取ApoE基因全序列;以Primer Primer 5.0设计探针和引物,oligo6验证。摸索PCR扩增条件,产物测序确认;质粒构建并测序确认。探针点样在含链亲蛋白的基因芯片(专利技术)上,待检样品以生物素dUTP标记3'端进行扩增,然后与基因芯片杂交洗脱,阳性结果为纳米金紫红色的圆点状,肉眼即可判断实验结果。以本法检测160例临床样本,并进行测序验证。结果基因芯片检测完毕后通过肉眼识别紫色点状(生物素-链霉亲和素系统biotin-streptavidin systems,BSAS)分布位置,由此可准确分辨ApoE基因型。临床样本实测结果与测序结果具高度一致性(kappa=0.971, P<0.001)。结论在具备标准基因实验室的条件下即可应用此技术进行ApoE基因多态性分析,可临床常规应用。

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