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双氢青蒿素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞中mTOR表达和分布的影响

耿云震;王胜强;杨杰;王文杰

摘要: 目的 探讨双氢青篙素时雄激素非依赖性前列腺癌C4-2B细胞的增殖和凋亡以及mTOR表达水平和分布定位的影响.方法 体外培养C4-2B细胞给予不同浓度的双氢青蒿素处理,以MTT法检测细胞增殖率;以RT-PCR检测细胞mTOR mRNA表达的情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构的变化;激光共聚焦显微镜免疫荧光分析法评价mTOR蛋白的表达水平和亚细胞定位分布.结果 双氢青蒿素抑制C4-2B细胞的增殖呈时间和剂量依赖性(P<0.01);RT-PCR和免疫荧光细胞化学实验的结果表明,C4-2B细胞有mTOR mRNA和蛋白的表达,且随双氢青蒿素浓度的升高而增高(P<0.05);FCM显示C4-2B细胞的凋亡率随双氢青蒿素浓度的升高而增加(P<0.01);电镜观察到典型凋亡的形态学变化;激光共聚焦检测结果显示,mTOR不仅有胞膜和胞质的定位,胞核也有少量表达,随双氢青蒿素浓度的升高,胞核内的表达增加.结论 双氢青蒿素抑制C4-2B细胞增殖并诱导其凋亡,呈时间和剂量依赖性.C4-2B细胞对双氢青蒿素的反应性可能与mTOR的表达和核易住激活有关.

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