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乙型肝炎表面抗原与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子融合表达质粒免疫乙型肝炎病毒转基因小鼠的研究

卿玉玲；赵嘉将；任红

关键词：肝炎病毒乙型粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 DNA疫苗融合表达质粒

摘要： 目的研究乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的融合表达质粒免疫乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠及其病毒清除作用.方法将小鼠随机分为8组,分别注射以下质粒:A组pcDNA3.1-S 100μg;B组:pcDNA3.1-GM-CSF-S 100μg;C组:pcDNA3.1-S-GM-CSF 100μg;D组:pcDNA3.1-S 50μg+pcDNA3.1-GM-CSF 50μg;E组:pcDNA3.1-GM-CSF 100μg;F组:重组酵母乙型肝炎疫苗1μg; G组:pcDNA 3.1 100 μg;H组:磷酸盐缓冲液(PBS)100μl.于质粒注射前4 d肌肉注射0.25%bupivacaine溶液100 μ1,诱导骨骼肌细胞变性.以HBsAg和GM-CSF的融合乙型肝炎表达质粒免疫HBV转基因小鼠,检测HBV转基因小鼠血清HBsAg表达水平及肝细胞HBsAg的表达,检测脾细胞白细胞介素(IL)-2、IL-4及γ干扰素(IFN-γ)的分泌水平及淋巴细胞增殖情况,并进行肝组织学检查.结果质粒加强免疫4周后血清HBsAg检测结果A组为2 8.28±15.32、B组为10.77±9.18、C组为44.16±8.30、D组为21.93±13.28、E组48.04±3.60、F组为38.3±11.66、G组为47.03±3.96、H组为51.46±4.70,F=11.262,P＜0.01,其中B组血清HBsAg滴度显著低于其余各组.IL-2分泌水平(pg/m1)A组为25.5±7.5、B组为48.5±11.3、C组为4.0±2.5、D组为38.0±8.5、E组为3.7±2.1、F组为6.5±23.7、G组为1.8±1.0、H组为0,F=8.147,P＜0.01.IFN-γ分泌水平A组为71.0±23.2、B组为218.0±20.3、C组为20.0±13.5、D组为106.0±39.8、E组为18.0±10.5、F组为36.0±15.4、G组为5.0±4.0、H组为0,F=62.275,P＜0.01.淋巴细胞增殖反应结果A组为3.404±0.312、B组为4.69± 0.286、C组为1.390±0.065、D组为3.790±0.276、E组为1.480±0.067、F组为1.510±0.084、G组为1.290±0.123、H组为1.130±0.086,F=116.28,P＜0.01.肝细胞HBsAg的表达(黄棕色区面积/统计区总面积)结果A组为0.127±0.08 5、B组为0.029±0.046、C组为0.349±0.025、D组为0.075±0.039、E组为0.336±0.025、F组为0.292±0.069、G组为0.362±0.029、H组为0.394±0.059,F=41.439,P＜0.01.以上研究结果显示pcDNA3.1-GM-CSF-S免疫组血清HBsAg滴度及肝细胞HBsAg的表达水平显著低于pcDNA3.1-S免疫组,而pcDNA3.1-GM-CSF-S免疫组IL-2、FN-γ分泌水平均及淋巴细胞增殖反应均显著高于pcDNA3.1-S免疫组.各实验组及对照组均未见炎症细胞浸润、无肝细胞肿胀、变性及坏死.结论GM-CSF基因与HBsAg基因融合可增强HBsAg DNA疫苗对病毒的清除作用.

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简化的肾脏病膳食改良试验与慢性肾脏病流行病学合作研究组肾小球滤过率评估公式在失代偿期肝硬化患者中的应用

作者：韩利娜；周芳芳；罗群；颜华东；李宇玫；王泽敏期刊：中华肝脏病杂志2019年03期

回顾性比较分析简化的肾脏病膳食改良试验公式与慢性肾脏病流行病学合作研究公式在评估424例失代偿期肝硬化患者肾小球滤过率中的相关性和一致性,以及对慢性肾脏病分期的影响和正确率的差异比较,以期为失代偿期肝硬化患者合理选择肾小球滤过率评估公式提供依据.结果显示慢性肾脏病流行病学合作研究公式在失代偿期肝硬化患者中的正确率优于简化肾脏病膳食改良试验公式,但其适用性并未显著优于简化肾脏病膳食改良试验公式.

关键词：肾小球滤过率肝硬化慢性肾脏病
苦参素通过线粒体凋亡通路影响肝癌耐药细胞株HepG2/ADM化学治疗的耐药性

作者：黄桂柳；冯巍巍；黄赞松；周喜汉；覃月秋期刊：中华肝脏病杂志2019年03期

为了研究苦参素通过线粒体凋亡途径对肝癌耐药细胞HepG2/ADM耐药性的影响及可能的机制,用MTT法确定苦参素作用浓度及细胞对化疗药的耐药性,Real-time PCR检测miR-181a及bim mRNA表达,Western blot检测Bim、caspase-3及caspase-9的表达.结果显示苦参素可逆转肝癌细胞的耐药性,其可能通过抑制miR-181a而提高Bim的表达,激活线粒体凋亡途径产生作用.

关键词：癌肝细胞抗药性肿瘤线粒体
基于失效模式与效应分析理论的肝活检组织标本制片质量提升与流程优化模型研究

作者：汤鸿；陆忠华；张熔熔；徐蓉蓉；方凯期刊：中华肝脏病杂志2019年03期

肝活组织检查对肝脏疾病的诊断、疗效判定及预后评估有重要价值,优质稳定的制片,完善高效的流程是前提,但实际影响因素众多,是临床难点之一.现以病理制片中流程缺陷与质量失控的风险因素为出发点,研究失效模式与效应分析进行识别和处理,以规避风险及提升质量和效率,构建优化模型.

关键词：组织病理学肝失效模式与效应分析肝活检标本质量控制流程优化
青藤碱对体外人肝星状细胞增殖与凋亡的影响

作者：解建中；赵睿；王亮；孔银；丁洁；李娟；李永芳；李光明；王娟霞；张岭漪期刊：中华肝脏病杂志2019年02期

为了探讨青藤碱(SM)对体外人肝星状细胞(LX-2)增殖和凋亡的影响.使用不同浓度(0.4、0.8、1.6、3.2、6.4 mmol/L) SM溶液体外作用LX-2细胞12、24h,同时设正常对照组(C组).用四甲基偶氮唑盐比色法检测SM对LX-2细胞增殖的影响;用流式细胞术检测SM对LX-2细胞凋亡的影响;免疫印迹法检测相关凋亡蛋白Bcl-2和Bax在LX-2细胞的表达变化.两组间数据比较采用t检验.四甲基偶氮唑盐检测结果显示:(1)SM能抑制LX-2细胞的增殖并呈剂量依赖效应;与C组比较,12h SM浓度组为3.2 mmol/L和6.4 mmol/L时差异有统计学意义(P＜ 0.05);12h和24 h各组比较未呈时间依赖性;(2)流式细胞术结果显示经SM作用12 h后LX-2细胞凋亡增加,SM浓度组为3.2 mmol/L时与C组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);(3)免疫印迹结果显示Bax表达上调、Bcl-2表达下调,Bcl-2/Bax比值随SM浓度增加而下降,与C组相比,差异有统计学意义(P＜ 0.05).提示SM具有抑制体外LX-2细胞的增殖及诱导其凋亡的作用.

关键词：肝星状细胞细胞增殖细胞凋亡青藤碱
药物性肝损伤时肾生物化学指标的改变及其临床意义

作者：李银玲；翁丽媚；吴思思；佟静；王炳元期刊：中华肝脏病杂志2019年02期

为了探讨发生药物性肝损伤时肾生物化学指标的改变及其临床意义.回顾性收集了2011年1月至2016年12月诊断为药物性肝损伤的430例住院患者及同时期我院体检中心报告为“未见异常”的410例健康对照人群的一般资料及入院时肾生物化学指标进行对比分析.符合正态分布数据两组间比较采用t检验,非正态分布数据两组间比较采用Mann-Whitney检验.结果显示药物性肝损伤组的血清肌酐和尿素氮水平低于健康对照组(51 μmol/L比59μmol/L,3.89 mmol/L比4.96 mmol/L),胱抑素C水平高于健康对照组(0.97 mg/L比0.80 mg/L),两组比较,差异均有统计学意义(P值均＜ 0.05);肾脏生物化学指标的改变与服药时间的长短、服药种类及损伤类型无相关性.提示药物性肝损伤早期的肾生物化学指标改变为血清肌酐、尿素氮明显降低,胱抑素C明显升高.

关键词：药物性肝损伤生物化学血清
双环醇治疗酒精性肝病Meta分析

作者：周成炜；叶晓光期刊：中华肝脏病杂志2019年02期

通过检索文献数据库中双环醇治疗酒精性肝病的随机对照试验,对1 149篇文献中9个随机对照试验,723例酒精性肝病患者的双环醇治疗酒精性肝病进行Meta分析,评价了双环醇治疗酒精性肝病的疗效和安全性.结果显示双环醇可显著改善酒精性肝病血清生物化学指标,具有较高安全性.

关键词：肝疾病酒精性肝炎脂肪肝
超声引导下经皮肝脏穿刺活组织检查对甲胎蛋白阴性肝占位性病变诊断的价值

作者：郑捷；王勇；樊国芳；徐伍洪；李永涛；黄建荣期刊：中华肝脏病杂志2019年01期

对115例甲胎蛋白(AFP)阴性且有肝实质性占位病变患者,在超声引导下行经皮肝脏穿刺活组织检查,经病理学证实原发性肝细胞型肝癌(HCC) 59例、胆管细胞型肝癌(CC) 30例、混合型肝癌11例、鼻咽癌肝转移8例、胃癌肝转移7例,肝癌阳性检出率为100％.病理学检查结果与超声诊断相对比,其灵敏度和准确度均为100％,超声诊断灵敏度和准确度均为77.4％.全组无一例出现肝内血管及胆管损伤等严重并发症,随访3个月亦未发现针道肿瘤种植转移.结果显示超声引导下经皮肝脏穿刺活组织检查对AFP阴性肝占位性病变具有重要的诊断价值,安全性高、操作简便、阳性检出率高、微创、并发症少等优点,适宜临床应用.

关键词：癌肝细胞病理学活组织检查超声检查甲胎蛋白
低剂量托伐普坦管理肝硬化低钠血症的近期疗效随访观察

作者：王长武；张淑凤；房新辉期刊：中华肝脏病杂志2019年01期

多周期间断性低剂量托伐普坦应用于肝硬化失代偿期并低钠血症的血钠管理,具备一定的疗效性和安全性.本研究拟对部分住院失代偿期肝硬化并稀释性低钠血症患者采用多周期间断性低剂量托伐普坦管理方案,旨在探讨针对该并发症的托伐普坦合理应用方案.

关键词：肝硬化低钠血症托伐普坦中远期
HBeAg阳性慢性乙型肝炎患儿干扰素α治疗效果预测因素分析

作者：闫亮；史艳敏；史策；储芳；陈大为；王福川；甘雨；张敏；钟彦伟期刊：中华肝脏病杂志2019年01期

慢性乙型肝炎患儿在使用干扰素α治疗初始阶段,可以通过患儿基线HBsAg水平、基线HBV DNA载量来预测治疗效果,基线HBsAg水平低、基线HBV DNA载量低的患儿发生应答的概率更高,为指导临床用药提供实验依据,保证患儿得到合理有效的治疗,节约治疗费用.

关键词：肝炎乙型慢性干扰素类预测
肝硬化继发急性肾损伤患者血清胱抑素C和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的水平及其诊断价值

作者：庞国菊；武玉晶；刘爽；刘怀平；刘树业期刊：中华肝脏病杂志2019年01期

回顾性比较分析183例肝硬化患者中急性肾损伤(AKI)(136例)和非AKI患者(47例)血清胱抑素C (Cys-C)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)及尿NGAL表达水平,探讨AKI肝硬化患者血清中Cys-C、NGAL及尿NGAL对AKI的诊断价值,发现Cys-C和NGAL能反映肝硬化患者继发AKI时肾功能损害的严重程度,可作为肝硬化肾损伤早期诊断有效指标,且二者联合可提高肝硬化肾损伤的诊断效能.

关键词：肝硬化急性肾损伤胱抑素C 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白