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Livin shRNA慢病毒载体的成功构建及鉴定

李鸿茹;陈愉生;陈刚;林立芳

摘要: 目的 构建携带livin基因短片段发卡RNA(livin shRNA)的慢病毒载体.方法 针对已经筛选确定的干扰人livin基因的有效靶序列,设计、合成靶序列的寡聚脱氧核苷酸DNA序列(Oligo DNA),退火形成双链DNA,与经Hpa Ⅰ和Xho Ⅰ酶切后的携带U6启动子和绿色荧光蛋白的pGCL-GFP载体连接产生短片段发卡RNA慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.结果 PCR鉴定与DNA测序证实合成的含livin shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确.结论 成功构建人livin shRNA慢病毒载体.

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