蝎毒多肽有效组分对辐射后M-NFS-60细胞的促增殖作用
摘要： 目的:观察蝎毒多肽(SVP)及IL-3对M-CSF依赖细胞株M-NFS-60促增殖作用以及对辐射后M-NFS-60细胞增殖的影响.方法:采用AlamarBlue摄入法检测细胞的增殖情况.①选择10个细胞浓度,分别于0 h、2 h、4 h、5.5 h和20 h,检测细胞的增殖情况,确定M-NFS-60细胞对AlamarBlue反应所需的佳细胞密度和孵育时间;②采用佳细胞密度和孵育时间,观察10个SVP组分促进M-NFS-60细胞的增殖作用,筛选出SVP的有效组分;③M-NFS-60细胞经60Coγ-射线照射后分别给予生理盐水、SVP、IL-3、SVP+IL-3处理48 h,测定细胞增殖情况.结果: ①M-NFS-60细胞的接种密度为5×104cells/mL时,对AlamarBlue的还原能力强,孵育时间8 h后,M-NFS-60细胞对AlamarBlue的还原率开始增强,72 h达高;②从10个SVP组分中筛选出II3、IV能明显促进M-NFS-60细胞的增殖;③SVPII3、III3、IV 或IL-3处理辐射后的细胞48 h,细胞的增殖率(﹪)分别为121.58±2.62(II3)、123.39±4.45(III3)、123.51±5.04(IV)、140.12±1.68(IL-3),与空白对照组(100.00±0.01)相比差异有显著性(P<0.01);II3、III3、IV分别与IL-3联用处理细胞48 h后的增殖率分别为163.98±9.20(II3+IL3)、159.89±8.31(IV+IL3)、148.92±9.74(III3+IL3),与SVP处理组比较差异有显著性(P<0.05).结论:蝎毒中存在促进M-NFS-60增殖的有效多肽组分,这些多肽组分能明显促进辐射后M-NFS-60细胞的增殖,并与IL-3对辐射后M-NFS-60细胞的增殖具有协同作用.
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左旋氨氯地平联合安体舒通治疗高血压的临床疗效
目的:研究左旋氨氯地平联合安体舒通治疗高血压的效果及对患者血压水平和左心室功能的影响.方法:将60例轻、中度高血压患者随机均分为观察组(左旋氨氯地平联合安体舒通治疗)和对照组(单用左旋氨氯地平),比较治疗6个月时两组临床效果.结果:观察组和对照组临床有效率分别为96.67％和90.00％,两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和脉压差(PP)均明显降低(P<0.05),其中观察组降低水平低于对照组(P<0.05);两组左室射血分数(LVEF％)、二尖瓣舒张早、晚期大血流速度(E值、A值)比值(E/A),左室收缩末期内径(LVESD)和舒张末期内径(LVEDD)均明显升高(P<0.05),其中观察组升高水平高于对照组(P<0.05);两组临床反应发生情况无明显差异(P>0.05).结论:左旋氨氯地平联合安体舒通治疗高血压效果显著,能有效降低患者血压,减少血压波动,还能一定程度逆转高血压所致心血管重构,改善左室功能.
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增城地区内科医师幽门螺杆菌感染诊疗现状调查及培训应用
目的:探讨增城地区内科医师对幽门螺杆菌(Hp)感染的诊疗现状及专业培训的效果.方法:于2018年2月至2018年7月对增城地区医院80名内科医师进行问卷调查,其中消化专科18名(甲组)、非消化专科62名(乙组).自行设计调查问卷,对医师有关Hp诊疗知识获取途径、Hp感染诊断、治疗方案、专业培训方面的情况进行调查.结果:甲组医师通过学术会议获取诊疗知识明显多于乙组(P<0.05),两组临床实践、经验传授、期刊书籍、网络获取等比较,差异无统计学意义(P>0.05).甲组对《第五次全国幽门螺杆菌感染处理共识报告》知晓情况优于乙组(P<0.05).甲组应用UBT、RUT、组织学检测、血清学检测进行诊断的医师比例与乙组相比,差异无统计学意义(P>0.05),采用粪便抗原检测的医师多于乙组(P<0.01).甲组采用铋剂四联疗法的医师多于乙组(P<0.05),选择14天疗程的医师多于乙组,但差异无统计学意义(P>0.05).培训前,甲组对Hp阳性者主张根除治疗、血清学检测阳性建议UBT确诊、初次方案中选择高耐药抗生素的医师与乙组比较,差异有统计学意义(P<0.05);培训后,乙组对Hp阳性者主张根除治疗、血清学检测阳性建议UBT确诊的医师增多(P<0.05),初次方案中选择高耐药抗生素的医师减少(P<0.05).结论:增城地区Hp诊疗现状总体相对规范,但在诊断方法、治疗方案选择等方面消化专科医师与内科医师有明显差异,Hp专业培训可提高首次治疗规范性.
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重症急性胰腺炎腹内高压患者脉搏指示连续心排血量与超声监测的应用价值
目的:探讨重症急性胰腺炎腹内高压患者脉搏指示连续心排血量(PICCO)与超声监测的应用价值.方法:回顾性分析2012年5月至2016年12月入住深圳市南山区人民医院ICU的79例重症急性胰腺炎患者的临床资料.所有患者入院后采用常规治疗,且行PICCO与超声监测.比较不同监测方法血流动力学监测准确度、腹内压、痊愈率、住院时间、APACHEⅡ评分、器官功能衰竭情况.结果:PICCO联合超声组血流动力学监测准确度高于PICCO组和超声组,腹内压低于PICCO组和超声组,均有统计学差异(P<0.05);PICCO联合超声组痊愈率明显高于PICCO组和超声组,有统计学差异(P<0.05);PICCO联合超声组住院时间短于PICCO组和超声组,APACHEⅡ评分低于PICCO组和超声组,器官功能衰竭率低于PICCO组和超声组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:重症急性胰腺炎腹内高压患者PICCO与超声联合监测的临床效果明显,可提高血流动力学监测准确度、缩短住院时间,提高痊愈率,降低器官功能衰竭,及降低腹内压,具有重要的临床研究意义.
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未成熟大鼠脑白质损伤对miR-219变化的影响
目的:研究miR-219在未成熟大鼠脑白质损伤时的变化,探索早产儿脑白质损伤后髓鞘化障碍的发病机制.方法:缺血缺氧(HI)法建立未成熟大鼠脑白质损伤的动物模型.4日龄SD大鼠随机分为实验组(n=80)和对照组(n=60).实验组予右侧颈总动脉永久性结扎后,6％氧气、94％氮气吸入90 min.qPCR检测HI后1 d、3 d、7 d时两组胼胝体miR-219的动态表达变化,免疫印迹检测HI后3 d、7 d时PDGFRα在胼胝体中的表达,Morris水迷宫评估大鼠认知和记忆能力.结果:成功建立了未成熟大鼠脑白质损伤的动物模型,HI后7天两组大鼠胼胝体miR-219的相对表达量均较1天和3天时明显上升(P<0.01),但实验组7 d时miR-219表达量显著低于对照组(6.63±1.39 vs 13.19±2.23,P<0.01);HI后7 d时两组大鼠胼胝体PDGFRα 蛋白表达比3天时均有所降低,但实验组7 d时PDGFRα蛋白表达降低较慢,其相对灰度值显著高于对照组(0.93±0.04 vs 0.76±0.05,P<0.01);实验组大鼠HI后14天髓鞘碱性蛋白表达降低,成年期Morris水迷宫实验显示其逃避潜伏期时间长于对照组(P<0.05),第5天60 s内穿越平台次数少于对照组(P<0.05),在目标象限停留的时间百分比低于对照组(P<0.01).结论:未成熟大鼠脑白质损伤时miR-219的表达在发育过程中其上升趋势受到抑制,并伴有PDGFRα的表达相对增加,提示miR-219在早产儿脑白质损伤后髓鞘化障碍发生机制中发挥重要作用.
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C-Met、CD44v6、MMP-9与E-cadherin在肝细胞癌中的表达及临床意义
目的:探讨C-Met、CD44v6、MMP-9及E-cadherin在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达水平及其临床意义,了解C-Met、CD44v6、MMP-9、E-cadherin与HCC生物学行为的关系.方法:采用免疫组化Envision两步法检测50例HCC组织与癌旁组织中C-Met、CD44v6、MMP-9及E-cadherin的表达水平,并分析其与临床病理特征的关系.结果:C-Met、CD44v6及MMP-9在50例肝癌组织中阳性表达率分别为90％(45/50),60％(30/50)及44％(22/50),与癌旁肝组织相比前者阳性率均显著增高(P<0.01);E-cadherin在50例肝癌组织中阳性表达率为40％(20/50),与癌旁组织76％(30/50)相比其阳性率显著降低(P<0.01).此外,C-Met、CD44及MMP-9在肝细胞癌低分化组的阳性表达率高于高/中分化组,而在血管侵犯、转移方面则差异无统计学意义;而E-cadherin在HCC高/中分化组的阳性表达率高于低分化组,同样在血管侵犯、转移方面显示无差异.结论:C-Met、CD44v6、MMP-9在肝癌组织中表达高于癌旁组织,且在低分化组的阳性表达率高于高/中分化组,而E-cadherin在肝癌组织中表达低于癌旁组织,在高/中分化组的阳性表达率高于低分化组,提示四者在肝癌发生发展过程中发挥重要作用,其表达的上调、下调或缺失是肝癌重要的恶性生物学指标.
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过表达miR-29b1在缺氧诱导的心肌细胞凋亡中的作用
目的:探讨microRNA-29b1(miR-29b1)在缺氧诱导的心肌细胞凋亡中的作用.方法:构建体外心肌细胞AC16细胞缺氧模型来模拟体内心肌细胞缺血缺氧状态.缺氧条件为1％O2、37℃,24和48 h.分别转染miR-29b1 mimic和Negative control.细胞凋亡采用Annexin V/PI试剂盒通过流式细胞仪检测.使用Western blot检测Bcl-2,Bax,Caspase-3和Caspase-9蛋白表达变化.结果:成功转染miR-29b1 mimics和Negative Control进入AC16心肌细胞.流式细胞仪分析显示凋亡率在转染后显著降低.Western blot-ting显示在转染后Bcl-2,Bax及Bcl-2/Bax表达轻度增加,Caspase-3和Caspase-9在转染后表达增加明显(P<0.05).结论:MiR-29b1可抑制心肌细胞缺氧后的凋亡.
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雌激素受体阳性绝经后肥胖乳腺癌的芯片数据分析
目的:初步探索雌激素受体(ER)阳性绝经后肥胖乳腺癌的相关基因及可能涉及的信号通路.方法:从GEO公共数据库下载含体质指数(BMI)信息的ER阳性绝经后乳腺癌基因芯片数据集(GSE70947),共获得13例肥胖乳腺癌和38例非肥胖乳腺癌的基因表达谱数据,进行基因差异表达谱和信号通路分析,并通过荧光定量PCR法和Western blotting检测法进行相关验证.结果:基因芯片数据分析显示,566个基因在肥胖乳腺癌中出现差异表达,分别有342个基因上调和224个基因下调.GO分析和Pathway分析发现,细胞功能和信号通路可能参与了ER阳性绝经后肥胖乳腺癌的发生发展过程.荧光定量PCR检测结果显示,MMP14、SLC26A3、COL1A2基因mRNA表达情况与芯片分析结果一致.Western blotting检测结果显示,肥胖乳腺癌的COL1A2蛋白相对表达量更高(P<0.05).结论:本研究分析了ER阳性绝经后肥胖乳腺癌的基因表达谱及可能涉及的信号通路,其中COL1A2基因可能是ER阳性绝经后肥胖乳腺癌的相关基因及潜在的治疗靶点.
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Survivin下调对膀胱癌细胞的增殖、迁移和凋亡的影响
目的:探讨凋亡抑制蛋白Survivin对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法:克隆人凋亡抑制蛋白Survivin基因,构建慢病毒表达载体后感染膀胱癌细胞株T24.实验分为对照组、实验组(Survivin-LV)和阴性对照组(FU-RNAi-NC-LV).Western印迹鉴定Survivin蛋白表达;MTT法、细胞划痕实验和流式细胞术检测下调Survivin的表达对膀胱癌T24细胞的增殖、迁移和凋亡的影响.结果:成功构建Survivin慢病毒表达载体,Western印迹显示实验组较阴性对照组细胞Surivin蛋白表达减少;实验组慢病毒感染细胞72 h后对细胞增殖的抑制率是明显高于其他组(P<0.01);细胞迁移实验发现,与对照组和阴性对照组比较,实验组的细胞迁移明显被抑制(P<0.01);流式细胞仪检测结果显示实验组的细胞凋亡率[(18.3±1.21)％]显著高于对照组[(2.3±0.69)％]和阴性对照组[(3.1±0.82)％](P<0.01).结论:Survivin下调可使膀胱癌T24细胞增殖和迁移明显抑制,细胞凋亡增加.
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吸烟和CHRNB2基因簇rs2072659/rs2072660位点多态性与肺癌的关联
目的:探讨在中国男性人群中吸烟、烟碱型乙酰胆碱受体亚单位β2(CHRNB2)上rs2072659与rs2072660位点多态性与肺癌的关联.方法:采用病例对照研究设计,收集204例男性原发性肺癌患者和821例正常健康男性作为研究对象.采用结构式问卷调查人口学特征、吸烟行为及健康相关行为等信息,检测静脉血CHRNB2基因簇上单核苷酸的多态性位点rs2072659与rs2072660的多态性.应用Kruskal-Wallis检验方法和多因素Logistic回归模型分析吸烟、CHRNB2基因簇上的基因多态性与肺癌的关联.结果:运用多因素logistic回归校正年龄、职业、教育程度、婚姻等混杂因素后,CHRNB2rs2072660 C/T基因型较C/C基因型相比,发生吸烟的风险降低(OR=0.710,95％CI=0.530-0.953);但相对于C/C基因型而言,CHRNB2rs2072660 C/T(OR=1.71,95％CI=1.17-2.50)发生肺癌的风险增加,rs2072659与rs207260的多态性和吸烟对肺癌不存在交互作用.结论:吸烟和CHRNB2中的rs207260的多态性是肺癌发生的危险因素.
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药物基因CYP4F2和CYP3A4在中国汉族人群中的分布
目的:探讨中国汉族人群中药物基因CYP4F2和CYP3A4基因多态性的分布情况.方法:收集2015年5月至2016年5月在广州市妇女儿童医疗中心就诊的汉族儿童1311例为研究对象,其中男855例、女456例,包括川崎病694例、非川崎病617例.收集外周静脉血进行CYP4F2 rs2108622、CYP3A4 rs2242480基因PCR扩增和序列分析.采用Hardy-Weinberg平衡进行总体样本的等位基因分布频率检测.分析性别与上述基因的基因型分布的关系;按疾病类型进行分组,分析疾病类型与上述基因的基因型和等位基因分布的关系.结果:纳入本研究的汉族儿童1311例,基因检测显示CYP4F2 rs2108622的CC、CT、TT基因型频率分别为59.57％(n=781)、35.39％(n=464)和5.04％(n=66),其中小T等位基因频率为22.7％;CYP3A4 rs2242480的CC、CT、TT基因型频率分别为51.26％(n=672)、40.43％(n=530)和8.31％(n=109),其中小T等位基因频率为28.5％..按性别分组,上述基因的基因型分布组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05).按疾病类型分为川崎病组(n=694)和对照组(n=617),川崎病组与对照组CYP3A4 rs2242480基因型分布差异有统计学意义(P<0.05),而等位基因分布差异无统计学意义(P>0.05);川崎病组与对照组CYP4F2 rs2108622基因型及等位基因分布差异均无统计学意义(均P>0.05).结论:中国汉族儿童华法林药物基因CYP4F2 rs2108622以野生型为主,而CYP3A4 rs2242480以变异型为主,包括纯合变异和杂合变异.
