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甲型肝炎病毒编码区cDNA在减毒伤寒杆菌中的高效表达

胡玉林;潘宝昌;苏秀芬;金玉姬;许昶;牛俊奇

摘要: 使甲型肝炎病毒基因组cDNA能够在减毒伤寒杆菌中表达,从而通过口服此种减毒伤寒杆菌达到对甲肝免疫的作用.将甲肝病毒编码区cDNA插入高效表达质粒PBV221,转化大肠杆菌DH5a,筛选并鉴定阳性克隆.将阳性克隆用电转移法转化减毒的伤寒杆菌BRD509.用温度诱导法诱导目的基因在伤寒杆菌中表达.通过Western Blot和ELISA检测表明,表达蛋白可与人抗甲肝IgG发生特异性反应.用此伤寒杆菌口服或腹腔注射免疫小鼠,小鼠血清检测到抗甲型肝炎病毒的抗体.结论:甲肝病毒cDNA可以在减毒伤寒杆菌中表达,且表达的蛋白质在体内、外有免疫原性.

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