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  • 结石性胆囊炎及胆囊腺瘤性息肉黏膜组织MUC1粘蛋白的检测

    作者:郑伟;陈东风;冷恩仁;马红军;杜宏伟

    目的:检测胆囊息肉、胆固醇结石、胆红素结石时胆囊黏膜MUC1粘蛋白的(半)定量表达及规律.方法:采用Western-blot法:称取液氮保存胆囊黏膜组织100--200mg加入组织裂解液lml匀浆、离心、去上清、分装、测蛋白含量、电泳、电转移、杂交、化学发光试剂检测.结果:ODu结果分别为34.29±6.06(对照组),142.11±38.49(胆红素结石组),39.72±11.46(胆固醇结石组),174.59±41.6(胆囊息肉组).结论:对照组胆囊、结石性胆囊及腺瘤性息肉胆囊有MUC1粘蛋白的表达,且表达量逐渐增高.正常胆囊-结石性胆囊炎-胆囊息肉MUC1粘蛋白的表达是上调表达;用Western-Blot可以较好地检测各种胆囊组织黏膜MUCl粘蛋白的对比含量和带形分布,不同疾病粘蛋白含量不同,带形分布不一样,相同疾病标本粘蛋白含量也不尽相同.

  • 甲型肝炎病毒编码区cDNA在减毒伤寒杆菌中的高效表达

    作者:胡玉林;潘宝昌;苏秀芬;金玉姬;许昶;牛俊奇

    使甲型肝炎病毒基因组cDNA能够在减毒伤寒杆菌中表达,从而通过口服此种减毒伤寒杆菌达到对甲肝免疫的作用.将甲肝病毒编码区cDNA插入高效表达质粒PBV221,转化大肠杆菌DH5a,筛选并鉴定阳性克隆.将阳性克隆用电转移法转化减毒的伤寒杆菌BRD509.用温度诱导法诱导目的基因在伤寒杆菌中表达.通过Western Blot和ELISA检测表明,表达蛋白可与人抗甲肝IgG发生特异性反应.用此伤寒杆菌口服或腹腔注射免疫小鼠,小鼠血清检测到抗甲型肝炎病毒的抗体.结论:甲肝病毒cDNA可以在减毒伤寒杆菌中表达,且表达的蛋白质在体内、外有免疫原性.

  • 小鼠骨骼肌电转移hPON1 Q基因可以减轻CCl4诱导的急性肝损伤

    作者:张驰;陈博;彭薇;姜晓玲;朱洁;臧宇辉;张峻峰;秦浚川

    目的 研究人Q型对氧磷酶1(human paraoxonase 1 Q,hPON1Q)转基因表达对小鼠四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导急性肝损伤的缓解效果,为防治肝脏疾病寻找新的途径.方法 小鼠骨骼肌直接注射含hPON1Q的真核表达质粒裸DNA并用电刺激介导表达,测量血清芳香酯酶的活性变化显示hPON1Q转基因表达效果,并使用血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)为指标及肝组织病理切片检测肝损伤的程度.结果 hPON1Q转基因表达小鼠血清中芳香酯酶活性提高约50%,并可持续到16 d以后.使用PON1裸DNA电刺激治疗组比对照组小鼠在用CCl4诱导24 h后血清芳香酯酶活性高60%,两种血清转氨酶指标及肝组织切片的病理学分析表明肝脏损伤程度有明显的减轻.结论 电刺激介导的重组人PON1Q基因裸DNA在小鼠体内的表达对CCl4诱导的肝损伤具有显著的防护作用.

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