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瘤细胞转移能力分析的体外研究

王春梅

摘要: RAB5A过表达与人肺腺癌转移相关[1].构建重组RAB5A正义真核表达载体和反义RNA[1-5]、转染AGZY()/( 83-9) 及Anip973细胞,发现RAB5A高表达在人肺腺癌细胞的转移表型和转移特性形成中有重要生物学作用.1 材料和方法1.1 细胞系标本 AGZY83-9 、Anip973、RAB5A-AGZY8-3 、Anip9731.2 主要仪器和试剂 (1)Transwell小室(USA);(2)12孔培养板(USA);(3)PVPF孔径12μm ;(4)FN.1.3 方法(1)涂趋化剂fibronectin 10μg于PVPF膜的下室面.(2)将膜用manicare固定于Transwell小室上,风干.(3)上室腔内加入2×105个瘤细胞,悬于0.1%BSA-RPMI1640培养液中.(4)将小室浸于R孔板的条件培养基上.37℃5%CO2温箱内孵育4h.(5)取出膜HE常规染色.(6)400倍光镜下计数,每组平行设3个滤膜.

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