免疫磁技术在分离人外周血树突状细胞中的应用
摘要： 免疫磁珠技术(Immuno-magnetic bead metho d,IMBM)是70年代起步,80年代兴起的,在国内、外应用较多的一种新型细胞分离技术.该项技术以免疫学为基础,渗透到病理学等各个领域,应用日趋广泛.尤其是在细胞分离等方面取得巨大进展.本文就IMBM及其在树突状细胞(dendritic c ell简称DC)分离纯化中的应用进行简单介绍.一、IMBM简介:1.免疫磁珠是一种直径数微米、大小均匀的球形结构,由三部构成. 其核心是金属小颗粒铁;核心周围均匀地包裹着一层高分子材料,可防止金属微粒漏出;外层为功能团,可结合特异性单克隆抗体.2.该技术的功能原理是:其表面被覆的特异性单克隆抗体或第二抗体可分别与特异性靶细胞结合,形成磁珠-抗体-抗原复合物;再用磁铁吸引复合物,使之与其他物质相分离.当磁珠-抗体-抗原复合物离开磁场,靶细胞得以收集.3.该分离方法可分为直接法和间接法;两种方法又均可存在阳性选择或阴性选择两种方式.二、IMBM在人外周血树突状细胞分离中的应用:DC具有呈递抗原,参与机体肿瘤免疫的重要作用,但其在外周血液中的含量仅占1%.用常规分离方法获取DC十分繁琐,耗时长、收获少、纯度低,且对细胞的损伤也较大.我室将IMBM应用于人外周血DC的分离 ,获得较好效果,现简介如下:首先用Ficoll密度梯度离心技术从人外周血中获得单个核细胞,再通过二步来分离DC.第一步:用标记的CD3、CD11b、CD16的混合性抗体与单个核细胞共孵育;清洗,然后再与磁珠标记的抗半抗原抗体共孵育.孵育后的细胞悬液在通过磁场时,磁珠标记的CD3+、CD11b+、CD16+的细胞则被吸附在阴性选择柱中,而未与磁珠标记的抗体相结合的细胞从磁场中流出被收集,即为富含DC的细胞悬液.第二步:将富含DC的细胞悬液与磁珠标记的CD4单克隆抗体共孵育 .则CD4+ DC在通过磁场时被吸附,从而使之被收集到阳性选择柱中.将分离柱移离磁场,冲出柱内细胞,清洗后,从而使被收集到阳性选择柱中.将分离柱移离磁场,冲出柱内细胞,清洗后,荧光抗体检验DC纯度为95%.三、讨论:在细胞分离时,应尽量使用人新鲜抗凝血,整个操作过程动作要轻柔.与磁珠标记的抗体孵育时间和温度可根据细胞数量的多少适当调整;孵育过程中,要不断地轻轻地摇动,以使细胞与抗体充分结合;冲洗细胞时,离心的速度和时间不宜过快和过长.细胞过柱前要用300目的尼龙网过滤,以免分离柱被成团细胞阻塞,影响分离效果.
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护理专业解剖学课程形成性评价体系的设计与应用
目的 研究以护理操作为主线设计形成性评价体系,并分析其在解剖学教学中的应用效果.方法 选择2016级护理本科专业1班43名学生为对照组,2班44名学生为实验组.对照组采用终结性评价,实验组采用形成性评价.通过比较两组学生的考试成绩,并调查实验组学生对以护理操作为主线设计的形成性评价的满意情况.结果 实验组学生实验成绩、期末成绩明显高于对照组学生成绩,两组比较差异有统计学意义(P＜0.01);调查问卷结果显示,实验组所有学生认为以护理操作为主线设计的形成性评价有利于后续专业学习,88％以上的护生认为对该评价方式能及时发现学习中的不足、有利于理论联系实践操作、调动学习兴趣与积极性、能培养自主学习能力、综合学习能力和团队协作精神、活跃课堂气氛等.结论 以护理操作为主线设计的形成性评价提高了护理专业解剖学教学质量,突显了护理专业特点,为进一步学习其他护理相关知识和进行护理基本技术操作奠定基础.
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翻转课堂教学模式在组织学与胚胎学教学中的探索
随着信息技术的发展,翻转课堂已成为教育改革的新方向.本研究利用形态学数字化教学平台,对翻转课堂教学模式在组织学与胚胎学教学中进行了尝试与探索,结果显示学生对翻转课堂教学的欢迎度高,翻转课堂教学模式具有一定的优越性,在组织学与胚胎学教学中的应用是切实可行的.
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网络信息化教学在高职院校医学形态课程中的实践与体会
随着科技的发展,以多媒体计算机技术和网络技术为核心的信息技术手段正逐渐的渗透到医学教育领域当中,加快了教学改革,提高了教学质量,从而更好的为教师和学生提供方便.本文就网络信息化教学模式如何在医学形态课程中的应用进行了一些探索,并取得了良好的教学效果,仅供同行参考交流.
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浅析深化医教协同模式下医学基础课程的教育改革思考
医教协同推进医学教育改革与发展,加强医学人才培养是提高医疗卫生服务水平的基础工程,是深化医药卫生体制改革的重要任务,是推进健康中国建设的重要保障.医教协同模式下,笔者思考医学基础课程的教育改革方向是:深挖教学资源,始终贯穿医德教育于教学全过程;改良教学方法,摸索构建“基于器官/系统的整合式教学”模式;优化考核体系,建立能考察学生解决实际问题能力的标准.
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小测验在系统解剖学教学中的应用探索
为探讨小测验在系统解剖学教学中的应用,本文将临床医学专业本科学生分成传统教学组和增加小测验教学组.采用问卷调查和期末考试的方法进行效果评价.结果显示,增加小测验教学组较传统教学组有一定的优势,学生成绩显著高于传统教学组.提示小测验的应用有助于提高系统解剖学的教学质量.
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小组讨论式学习在护理学专业解剖学实验改革中的运用
人体解剖学是护理学专业学生必修的医学课程,在护理学专业的医学本科教育阶段发挥奠基石和桥梁的作用.面对信息网络化的迅猛发展,想要在现实课堂中吸引护理专业学生的注意力,解剖学教学必须改革.本文针对本校护理学专业学生的实际情况,在解剖学实验教学过程中尝试开展小组讨论式学习方法,取得一定效果.
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学生对系统解剖学运动系统实验课开展结合四个联系的PBL教学的感知
PBL教学是一种基于问题的教学法.但要设计合理有效的PBL问题并非易事.文章从“联系发生发育、联系器官功能、联系临床及联系活体”四个联系人手来设计PBL问题,并应用至系统解剖学运动系统实验课教学中,与传统教学法进行教学效果对比,探讨学生对教学的感知情况.
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生物分子实验课程设计性实验讨论课的教学与探索
设计性实验讨论课对培养学生的综合能力的运用和创新能力的培养有着重要的作用.本文阐述了开设设计性实验讨论课的要求、教学内容、教学的方式、成绩考评的实施方法.并对实验设计讨论课的教学特色进行了总结.实践证明,这种教学方式有利于学生的综合能力提高以及创新能力的培养.
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我校国家级医学基础实验教学中心建设探索
本文介绍我校国家级医学基础实验教学中心的建设目标,着重阐述建设后中心取得的一些显著变化.主要从课程体系的科学化、教学方法、实验教学队伍的提高、实验教学条件进一步优化、示范性作用提升进行了论述,并对实验中心今后的发展提出了探讨性建议.
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“以学生为中心”教育理念在中医院校解剖学教学中的应用
“以学生为中心”是一种新型的教学理念,越来越受到教育界的重视.在中医院校的解剖学教学中,应用“以学生为中心”的PBL、TBL、翻转课堂等教学模式和转变评价方式,旨在提高学生学习的主动性和兴趣,提高教学质量.
