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酶切与PCR联用合成梅毒抗原TpN17全长DNA及其表达活化和ELISA检测

刘灵辉

摘要: 目的 在大肠埃希菌中重组表达梅毒密螺旋体TpN17抗原.用其建立梅毒诊断血清学方法.方法 酶切与PCR联用,合成全长TpN17基因,亚克隆后克隆到pET-HIS质粒并转化到大肠杆菌BL21株中表达.亲和层析纯化.纯化rTpN17包被微孔板,ELISA方法检测临床8份梅毒阳性血清和4份阴性血清.结果 获得了重组表达并纯化的TpN17,ELISA检测结果表明重组蛋白能被梅毒患者阳性血清所识别,特异性100%,灵敏度100%.结论 证明了该重组蛋白具有良好的免疫反应性,可用于梅毒感染的血清学检测.

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