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3种食源性致病菌的多重PCR快速检测方法研究

闵文光;余慧宏;魏建萍;涂智杰;吴建英;宋建新

摘要: 目的 建立一种能同时检测志贺菌,副溶血性弧菌和大肠埃希菌O157的多重PCR方法.方法 根据志贺菌IpaH基因[1]、副溶血性弧菌t1基因[2]、大肠埃希菌O157 eaeA基因[3,4]设计特异性引物,采用LB对志贺菌,副溶血性弧菌和大肠埃希菌O157进行振荡培养,通过多重PCR扩增3种病原菌的目的基因,通过优化反应体系,提高反应的检测效率和特异性.结果 对志贺菌,副溶血性弧菌和大肠埃希菌O157振荡培10h,经过PCR反应扩增出目的基因,把志贺菌,副溶血性弧菌、大肠埃希菌O157、肠道致病性大肠埃希菌,产肠毒素性大肠埃希菌,金黄色葡萄球菌,单核细胞增生李斯特菌、蜡样芽胞杆菌8种菌混在一起提取核酸进行PCR扩增,结果表明此PCR方法具有良好的特异性.结论 本研究建立的多重PCR检测方法能快速检测志贺菌,副溶血性弧菌和大肠埃希菌O157,具有快速,灵敏,特异的特点,能广泛应用于食源性疾病检测,食物中毒检测等领域.

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