IgA肾病分子病因学的研究
摘要： IgA肾病(IgAN)是常见的肾小球疾病,发病率约占我国原发肾小球肾炎的25%～33%,其中约1/3的患者肾功能进行性恶化,发展为终末期肾功能衰竭.IgAN的病理特点是肾小球系膜细胞(MC)增生及系膜基质增加,并在系膜区和(或)肾小球毛细血管袢出现以IgA为主的免疫球蛋白及补体成分的沉积.IgAN发病机制还不完全明了.既往研究认为,是由于粘膜免疫引起的免疫复合物肾炎.这个推断的依据是:(1)IgAN的发病或发作始于呼吸道或消化道粘膜感染后;(2)应用肠道粘膜免疫方法成功复制了系膜IgA沉积的动物模型;(3)部分IgAN患者血清中可检测到抗麦胶蛋白(gluten)等抗食物成份抗体;(4)部分患者肾小球内可测得呼吸道病毒或细菌的DNA或蛋白成分.但这个假说存在许多不能解释的现象:(1)约30%～50% IgAN患者血清IgA升高,且升高的IgA主要是骨髓产生的IgA1,并非粘膜分泌的IgA2;(2)沉积在肾小球中的IgA已经公认为聚合IgA1(pIgA1),不含分泌片段;(3)血清中很少检测到含IgA2的循环免疫复合物.故不少学者对原发性IgAN与系膜免疫的关系持不同的观点.目前,沉积在肾小球系膜区pIgA1与MC直接的相互作用受到人们的广泛重视.本文就IgA分子、IgA Fc受体、IgA Fc与肾小球MC上可能存在的Fc受体间相互作用、肾小球MC上可能存在的IgA Fc受体定性以及IgA糖基化与IgAN的关系进行综述.
-
Podocalyxin基因沉默对足细胞结构和功能的影响
目的:探讨siRNA敲低podocalyxin(PODXL、足糖萼)基因对足细胞结构、功能的影响及机制. 方法:采用RPMI 1640培养基,在33℃培养永生化小鼠足细胞系,分化成熟后分为5组:空白组(Vehicle)、模拟组(Mock)、阴性对照组(Sh-nc)、siRNA-PODXL组(Si)、ezrin抑制组(NSC305787).用鬼笔环肽行足细胞骨架蛋白F-actin染色,共聚焦荧光倒置显微镜下观察细胞骨架排列;划痕愈合实验、Transwell实验检测细胞的迁移能力;流式细胞仪检测足细胞凋亡;Western印迹法和RT-qPCR检测PODXL和p-ezrin表达水平. 结果:(1)共聚焦荧光倒置显微镜下观察结果显示:空白组足细胞骨架肌纤维排列有序,荧光显示清晰;Si组、ezrin抑制组足细胞微丝解聚、胞体回缩,骨架排列紊乱,荧光明显模糊减弱,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);Mock及Sh-nc组与空白组无明显差异;(2)划痕愈合实验、Transwell实验结果显示:PODXL敲低、抑制ezrin磷酸化后足细胞迁移较其他三组减慢;(3)流式细胞仪结果显示:PODXL敲低、抑制ezrin磷酸化后足细胞凋亡率增加;(4) western印迹法和RT-qPCR检测结果显示:与正常组相比,Si组PODXL表达明显下调,同时p-ezrin表达下调,Mock及Sh-nc组与空白组无明显差异;(5) G-LISA法检测细胞中RhoA活性,结果显示:Si组、ezrin抑制组与正常组相比RhoA活性明显下降,Mock及Sh-nc组与空白组无明显差异. 结论:敲低PODXL基因或抑制ezrin磷酸化后,p-ezrin表达下调、RhoA活性降低,导致足细胞骨架结构紊乱、促进足细胞凋亡.表明PODXL基因敲低后引起足细胞损伤可能与p-ezrin、RhoA信号通路有关.
-
草酸性肾病的临床病理特点及预后分析
目的:探讨草酸性肾病的病因、临床病理特点、治疗及预后. 方法:回顾性分析2013年1月至2018年4月期间经肾活检确诊为草酸性肾病患者,分析其病因、临床病理特点、治疗及预后. 结果:共收集52例草酸性肾病患者男性39例、女性13例,平均年龄49.4± 12.3岁.49例自体肾,3例移植肾;2例为原发性高草酸尿症,余50例继发性草酸性肾病,病因包括药物(静脉维生素C为常见)、摄入富含草酸食物或化学中毒等.常见的临床表现为少尿/无尿(50.0％),自体肾表现为急性肾损伤(AKI)1期、AKI 2期、AKI 3期、慢性肾功能不全基础上出现AKI (ACKD)分别占4.1％、8.2％、67.3％、20.4％.病程中高血清肌酐为783.2±425.2 μmol/L,突出表现为肾小管损伤指标异常,9例行24h草酸定量检测均升高(90.35±35.14 mg/24h).肾脏病理均表现为草酸钙结晶沉积伴急性肾小管间质性损伤.51.9％的患者接受肾脏替代治疗,以及泼尼松、维生素B6等药物治疗.随访时间12.1±15.6月,2例患者进入终末期肾病,33例肾功能恢复正常,恢复时间为56±39d. 结论:草酸性肾病的病因多样,继发性草酸性肾病主要病因为药物、高草酸食物和中毒,临床表现为AKI或ACKD,肾活检见草酸钙沉积及肾小管间质急性损伤,半数患者需要肾脏替代治疗,去除诱因并积极治疗后,多数患者肾功能恢复正常.
-
超声下经皮血管成形术治疗人工血管内瘘狭窄的疗效
目的:总结超声监视下经皮血管成形术(PTA)治疗人工血管内瘘(AVG)狭窄的效果. 方法:回顾性分析超声监视下PTA术治疗AVG狭窄的112例患者的资料. 结果:狭窄部位中静脉吻合口占61.8％,动脉吻合口占13.2％,人工血管穿刺点占15.3％,引流静脉占8.3％.68.7％的患者为狭窄合并血栓形成,31.3％为单纯狭窄.合并血栓患者的狭窄程度高于单纯狭窄患者(87.1％±6.2％ vs 71.0％±7.4％,P＜0.05),而两组患者在狭窄部位的构成上无显著性差异.手术成功率96.5％,球囊扩张技术成功率100％.＞70％的狭窄需要用14 arm以上的扩张压力.PTA术后AVG的初级通畅率为6个月68.8％±5.0％和12个月25.3％±4.2％,次级通畅率为6个月98.6％±1.7％和12个月80.2％±6.3％. 结论:AVG狭窄常见的部位是静脉吻合口.狭窄是引起AVG血栓形成主要的原因.AVG血栓形成与狭窄部位的关系不大,而主要取决于狭窄的程度.超声监视下PTA术是治疗AVG狭窄安全有效的方法.AVG的血流动力学决定了其特定部位好发狭窄和初级通畅率较低,但重复PTA治疗可获得较高的次级通畅率.
-
连续性肾脏替代治疗重症狼疮性肾炎患者的预后及其影响因素
目的:观察需行连续性肾脏替代治疗(CRRT)的重症狼疮性肾炎(LN)患者的预后及其影响因素.方法:回顾性分析2009年1月至2016年12月国家肾脏疾病临床医学研究中心住院行CRRT的重症LN患者247例,观察其临床特征及其预后. 结果:247例患者中男54例,女193例,中位年龄30(23,41)岁.治疗3个月时152例(61.5％)摆脱透析治疗(摆脱透析组),95例(38.5％)进入维持性透析治疗(未摆脱透析组).COX回归多因素分析显示患者肾损伤病程长(P=0.047,HR=0.997)、血清白蛋白低(P=0.021,HR=1.765)、血清肌酐水平高(P=0.033,HR=0.684)、少尿或无尿(P=0.001,HR=0.460)是患者摆脱透析的独立预测因素.其中137例行肾穿刺病理检查,发现CI＞5是影响肾脏恢复的独立预测因素(P=0.049,HR=0.588).摆脱透析组患者随访39.6(14.3,72.3)月,26(17.1％)例进入维持性透析,1年、5年和8年的肾存活率分别为94.6％、75.5％、69.7％. 结论:就诊时肾损伤病程长、血清肌酐高、尿量少是影响LN患者不能摆脱透析的风险因素.
-
肥胖相关性肾病的远期预后及危险因素分析
目的:研究肥胖相关性肾病(ORG)患者长期预后及相关危险因素. 方法:选取东部战区总医院国家肾脏疾病临床医学研究中心ORG随访登记数据库,分析2003年1月至2015年12月经肾活检确诊为ORG患者的随访资料.利用Kaplan-Meier法计算肾脏累积生存率,并利用COX回归模型分析预后危险因素. 结果:共227例患者纳入本研究,中位随访时间61月,随访期间37例(16.3％)新发糖尿病,14例(6.2％)进展至终末期肾病(ESRD),18例(7.9％)患者发生终点事件[估算的肾小球滤过率(eGFR)下降50％或进入ESED].患者肾活检后5年、10年累积肾脏生存率分别为93.6％和89.9％.多因素COX回归分析结果表明活检时肾功能不全(HR=6.140,P=0.001)、重度间质纤维化(HR=9.102,P=0.045)和时间平均蛋白尿(HR=1.578,P=0.000)是肾脏预后的独立危险因素.调整活检时肾功能不全、时间平均蛋白尿后,重度间质纤维化较无间质纤维化,终点事件风险增加9.102倍(P=0.045). 结论:本研究结果表明ORG患者5年、10年肾脏累积生存率分别为93.6％和89.9％.活检时肾功能不全、重度间质纤维化、时间平均蛋白尿是ORG患者预后的独立危险因素.
-
Maroni和Boaz公式评估慢性肾脏病患者蛋白质及磷摄入量
目的:探索Boaz公式是否可以真实反应中国慢性肾脏病(CKD)3～5D期患者磷摄入量;Maroni公式是否能准确预测CKD 3～5期患者蛋白质摄入量. 方法:于2016年3月～2017年6月于中国医科大学附属第一医院肾内科,运用CKD-EPI公式估算患者肾小球滤过率(eGFR)判断其肾功能,选取确诊CKD 3～5D期的住院患者110例.肾内科医师筛选符合入选及排除标准患者介绍给营养师进行营养宣教、膳食调查,比较患者蛋白质及磷实际摄入量与推荐及评估摄入量关系. 结果:CKD 3～5期患者蛋白质实际摄入量符合推荐摄入量,但其均高于Maroni公式评估摄入量,且有统计学差异(P＜0.05);CKD 3～4期及CKD 5D期患者磷实际摄入量在标准范围内,CKD 5期低于推荐量,各期均与Boaz公式评估摄入量无统计学差异(P＞0.05);结论:大部分CKD患者都能按指南推荐量合理控制饮食;Maroni公式可能不适用于评估我国CKD患者蛋白质摄入量,而Boaz公式适合评估磷摄入量.
-
不同类型尿路感染大肠埃希菌的分布和耐药性分析
目的:了解2014年～2016年本地区尿路感染患者大肠埃希菌的分布和耐药性特点. 方法:回顾分析复旦大学附属华东医院肾内科3年间1 034例住院患者的菌尿记录和药敏试验结果,分为非复杂感染组和复杂尿路感染两组,计算两组大肠埃希菌的构成比及药物敏感率,了解两组病例大肠埃希菌的分布和耐药性特点.结果:非复杂感染组和复杂感染组在平均年龄及性别方面未见差异.非复杂感染组3年大肠埃希菌的构成比无差异(48.4％、38.1％、42.7％),抗生素敏感率无差异.复杂感染组3年大肠埃希菌的构成比无差异(32.0％、25.8％、35.2％),对头孢哌酮/舒巴坦的敏感率呈逐年降低趋势(87.5％vs63.4％vs42.6％,P＜0.05).与非复杂感染组相比,复杂感染组大肠埃希菌的构成比较低(31.2％ vs 42.3％,P＜0.05),对阿米卡星、左氧氟沙星、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢吡肟、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦的敏感率均较低,尤其对头孢哌酮/舒巴坦的敏感率明显降低(58.9％vs91.5％,P=0.000). 结论:本地区3年的复杂尿路感染患者大肠埃希菌的构成比较低,且耐药谱增宽、耐药程度加剧,临床应根据药敏试验结果合理使用抗生素以减少耐药菌株的产生和扩散.
-
初始血型抗体效价对ABO不相合肾移植的影响
目的:探讨初始血型抗体效价水平对ABO血型不相合活体肾移植临床结局的影响. 方法:本研究纳入2014年9月至2017年1 1月在四川大学华西医院接受ABO血型不相合活体肾移植的40对供、受者.根据受者初始ABO血型抗体效价水平,将纳入的受者分为两组:低抗体效价组(n=18例)和高抗体效价组(n=22例),比较两组供、受者的基线特征、血型抗体效价变化和肾移植临床结局. 结果:两组受者中位随访时间20个月(3～42).所有受者在移植后2周内血型抗体效价均不超过1∶16.低效价和高效价组受者1年移植肾及受者存活率分别为94.4％ vs 95.5％和100％vs100％(P均＞0.05),每组均有1例受者发生超急性排斥反应致移植肾失功.两组受者术后2年内的血清肌酐水平和估算的肾小球滤过率无显著差异,急性排斥反应、感染、血糖血脂代谢水平及伤口液化的发生率也没有显著差异. 结论:初始血型抗体水平并不影响ABO血型不相合肾移植的临床结局.
-
腹膜透析相关性腹膜炎的细菌谱及耐药性分析
目的:分析医院内腹膜透析(PD)相关性腹膜炎的致病菌谱及对常用抗生素的耐药性,为此类患者提供个体化的治疗. 方法:回顾南方医科大学南方医院肾内科2015年1月～2017年12月的1 432例PD患者,总结其中的203例次PD相关腹膜炎患者的临床资料,对检测出的致病菌谱及其耐药性进行分析. 结果:171例PD患者共计发生203例次腹膜炎,透析液病原菌培养阳性159例次,阳性率78.33％,单种细菌感染150例次,真菌感染5例次,多重感染4例次;共检出47株致病菌,其中革兰阳性菌19株(40.43％),以葡萄球菌属为主;革兰阴性菌15株(31.91％),以大肠埃希菌为主;真菌4株(8.51％),其他致病菌株9株(19.15％).对经验性治疗革兰阳性菌腹膜炎常用的青霉素、克林霉素、头孢唑林的耐药率分别为75％、71.43％、67.65％,革兰阴性菌对头孢曲松、哌拉西林、头孢噻肟的耐药率分别为60％、57.89％、50％.治疗后162例次(79.80％)治愈,37例次(18.22％)拔管转血液透析,4例次(1.97％)死亡. 结论:腹膜炎是PD常见并发症,定期分析病原菌及耐药性,可及时调整现有经验性治疗方案,提高治愈率.
-
慢性肾脏病高血压大鼠主动脉收缩高反应的机制
目的:探讨慢性肾脏病(CKD)继发高血压与主动脉舒缩功能改变之间的关系及其机制.方法:(1)造模:将正常SD大鼠随机分为假手术组(对照组)和CKD组,通过5/6肾切除法制作大鼠CKD模型.术前、术后8周、术后16周分别检测血清肌酐、钙、磷、甲状旁腺素水平,术前及第16周测量大鼠血压.(2)主动脉张力测定:第16周处死大鼠,镜下选取胸主动脉制备血管环,采用累积浓度给药法分别予血管收缩剂与血管舒张剂,通过血管张力测定仪观察血管张力的变化.(3)采用Western Blot检测胸主动脉上相应的受体蛋白表达.结果:(1)第16周时CKD组大鼠血清肌酐、血钙、血磷、甲状旁腺素和尾动脉收缩压及舒张压较对照组均明显升高.(2)CKD大鼠胸主动脉对血栓素A2类似物(U46619)刺激下产生的收缩力明显增强(162.66±14.29 vs 121.39±15.47,P<0.01);对60 mmol/L的氯化钾和苯肾上腺素(Phe)诱导的收缩,两组未见明显差异.(3)CKD组大鼠胸主动脉环对内皮依赖性血管舒张剂乙酰胆碱(Ach)和非内皮依赖性血管舒张剂硝普钠(SNP)所触发的舒张反应均低于对照组,Ach(67.78±6.18 vs 83.92±5.42,P<0.01),SNP(95.45±1.33 vs 98.90±0.60,P<0.01).(4)CKD组大鼠胸主动脉上血栓素A2受体蛋白(TXA2受体)表达较对照组明显增多,肾上腺素受体蛋白及L-型钙通道(Cav1.2)蛋白表达无差异.结论:CKD组大鼠胸主动脉对TXA2类似物刺激收缩力增强,其原因可能与血管上TXA2受体蛋白增多有关;同时CKD大鼠胸主动脉的内皮及非内皮依赖性舒张功能均有受损,这些变化可能参与了CKD高血压大鼠主动脉收缩高反应性.
