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高质量卵子从何谈起
一、卵子质量对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)获得活产是十分重要的IVF-ET的妊娠率与抱婴回家率很大程度取决于卵子质量,目前实验室所提供的培养条件足以使好的卵子成为优质胚胎,因此卵子质量好是IVF-ET成功的重要前提.卵子质量除了受年龄、超排卵的影响外,还与环境、遗传、生活方式和放/化疗等有关.卵子质量是卵子发生过程中一系列相互作用因素决定的.
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卵子质量评估的意义和手段
对卵子发育潜能进行评估能够改善人类辅助生殖的总体结局,因此是辅助生殖技术的重要环节.本文的目的是总结卵子形态学特征的重要意义,并介绍部分非形态学评估方法.主要讨论的形态学结构包括卵冠丘复合物、纺锤体、透明带、空泡、折光小体、极体、卵子形状、胞浆颗粒化、卵周隙等特征.这些文献得出的不同结论说明,对人类卵子的形态学观察和评估指标的预测价值,需要进一步的研究与合作来证实.
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电针干预对多囊卵巢综合征患者纺锤体及卵子质量的影响
目的 观察超促排卵过程中加电针干预对行体外受精——胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)患者卵子质量的影响.方法 选择217例行IVF-ET的PCOS患者,按随机数字表分为电针组(119例)和对照组(98例),均给予长方案超促排卵,降调节及促排卵过程中电针组加用电针干预,直至取卵日.观察两组患者纺锤体(纺锤体与极体的位置关系)、获卵数、受精率、卵裂率、优质胚胎率、卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)发生率、临床妊娠率、早期自然流产率、促性腺激素(gonadotropins,Gn)用量、时间、绒促性素(human chorionic gonadotropin,HCG)日E2、孕酮(progesterone,P)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平.结果 电针组纺锤体位于极体11点至1点的卵子数占卵子数的比例明显高于对照组(P＜0.05).纺锤体位于极体11点至1点的卵子数与HCG日E2水平及优胚率呈正相关(r =0.19,P＜0.01).与对照组比较,电针组优质胚胎率明显升高(P＜0.05),电针组Gn用量与用药时间减少(P＜0.05),临床妊娠率提高8.36％.结论 纺锤体与卵子质量呈正相关;电针干预可以提高卵子质量,改善PCOS患者临床妊娠率.
关键词： 纺锤体 卵子质量 电针 多囊卵巢综合征 体外受精——胚胎移植 -
补肾健脾方对免疫性卵巢功能衰退小鼠性激素及卵子质量的影响
目的 探讨补肾健脾方治疗卵巢储备功能减退的可能作用机理.方法 60只小鼠随机分为空白组、模型组、倍美力组和补肾健脾方高、中、低剂量组,每组10只.除空白组外,其余各组建立免疫性卵巢功能衰退小鼠模型.于造模后1周开始补肾健脾方低、中、高剂量组分别给予浓度为0.54、1.08、2.16 g/ml的补肾健脾方灌胃,每次0.3ml,倍美力组给予倍美力片溶液(浓度0.002 mg/ml)0.3ml灌胃,空白组和模型组均予生理盐水0.3ml灌胃,连续90天,每周休息1天.测定各组小鼠血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)水平,测量卵巢重量并进行卵巢组织HE染色,计数卵母细胞数目,电镜下观察卵巢组织形态学改变.结果 与正常组比较,模型组小鼠血清FSH、LH水平明显升高,E2水平明显降低,卵巢重量降低,卵母细胞数减少(P＜0.01).与模型组比较,补肾健脾方高剂量组与倍美力组均能降低血清LH与FSH水平,升高E2水平,提高卵巢重量和卵母细胞数(P＜0.01).电镜显示,模型组小鼠的卵母细胞透明带厚度不均匀,边界不清晰,可见到髓样小体和许多微绒毛;补肾健脾方高剂量组和倍美力组小鼠的卵母细胞透明带厚度比较均匀,边界也比较清晰.结论 补肾健脾方可调节卵巢储备功能下降小鼠的生殖激素水平,提高卵子数量与质量,可能是其治疗卵巢储备功能减退的作用机理之一.
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补肾健脾方对自然衰老小鼠生殖能力及体外受精中卵子质量的影响
目的 观察补肾健脾方对自然衰老小鼠卵巢功能的影响及可能作用机制.方法 将48只9月龄C57BL/6J雌性小鼠(自然衰老模型)随机分为模型组、阳性对照组和补肾健脾方高、低剂量组,每组12只,另选2～3月龄小鼠12只作为青年组.补肾健脾方低、高剂量组分别给予补肾健脾方0.51、2.55g/(kg·d)灌胃,阳性对照组给予脱氢表雄酮片1.25 mg/(kg·d)灌胃,青年组及模型组给予0.2ml蒸馏水灌胃,各组共灌胃3个月.比较各组小鼠发情周期、产仔数量,体外受精的获卵数、成熟卵子数、受精卵数、卵裂数及囊胚数,检测卵巢中新生儿卵巢同源盒基因(Nobox)蛋白及mRNA表达情况.结果 与青年组比较,模型组小鼠完整发情周期次数、发情前期及发情期占周期比例及产仔数减少,获卵数、成熟卵子数、受精卵数、卵裂数及囊胚数亦减少,卵巢中Nobox蛋白及mRNA表达降低(P＜0.05或P＜0.01);补肾健脾方高剂量组小鼠在体外受精过程中获卵数、成熟卵子数、受精卵数、卵裂数、囊胚数均高于模型组,并且卵巢中Nobox蛋白及mRNA表达升高(P＜0.05或P＜0.01).结论 补肾健脾方有助于改善自然衰老小鼠生殖能力及卵子质量,其作用机制可能与增加小鼠卵巢内Nobox转录因子表达有关.
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卵母细胞形态及核质成熟度与体外受精结局相关性的研究进展
在体外受精操作中,受精率、卵裂率与卵母细胞质量密切相关.卵和胚胎的质量是影响植入率和妊娠率的重要因素.目前评价卵细胞的质量尚无明确的统一标准,但主要涵盖于对卵母细胞形态和成熟度的考察.非侵袭性方法以不损伤细胞为目的,不会对细胞的进一步发育造成不利影响,非常适用于辅助生殖技术.虽各方面研究的结果仍不完全一致,但形态学研究仍是给卵母细胞分类的重要途径,是简单和客观的判断卵子质量的方法.
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超声引导下胚胎移植与体外受精-胚胎移植妊娠率的临床分析
体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)作为辅助生殖技术已广泛用于治疗不孕症患者.其成功率受年龄、不孕年限、卵子质量、子宫内膜容受性、移植深度等诸多因素影响[1].目前国内报道的IVF-ET妊娠率仅为30%～40%[2],难以满足不孕症患者的生育需求.本研究采用经腹超声引导下定位移植法进行胚胎移植,并与宫腔盲插法胚胎移植法进行比较,探讨经腹超声引导胚胎移植对提高IVF-ET妊娠成功率的影响及其作用.
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子宫内膜异位症对体外受精-胚胎移植的影响及对策
子宫内膜异位症(endometriosis,简称内异症)与不孕密切相关,内异症患者不孕症发生率高达40%～50%[1].其可以通过多种机制协同影响而导致不孕症:①盆腔解剖结构改变和输卵管结构或功能异常,干扰配子或胚胎的运输[2];②异常子宫收缩,影响精子运输和胚胎着床[3];③卵巢内膜异位囊肿可损害卵巢内血管分布,降低卵巢对促性腺激素的反应,降低卵巢储备[4];④卵巢内膜异位囊肿剔除手术破坏正常的卵巢组织[5],降低卵巢储备功能,虽为继发因素,可能终成为致不孕的重要因素;⑤内异症可能通过广泛和目前未知的分泌通路,干扰卵巢反应、卵子质量、卵子受精、胚胎质量和着床[6].
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体外受精中超生理水平的雌激素对卵子和胚胎的影响
在辅助生殖技术中,优质卵子和优质胚胎是高妊娠率的重要保证.超生理水平的血清雌激素(雌二醇)伴随控制性超排卵(COⅡ)而出现,其对卵子质量、胚胎质量和妊娠结局的影响一直存有争议.近期学者们提出血清雌激素水平需要阈值的观点,目前这个阈值还未有确定的数值.血清雌二醇水平并不是越高越好,合适的阈值还需要进一步的研究和总结.
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重视促排卵的质量与安全性
促排卵治疗是决定辅助生殖成功率的关键步骤,随着促排卵药物的大量应用,促排卵治疗方式的选择及并发症带来的风险也日益受到关注.这一领域需要更多的大样本、多中心临床研究和动物试验研究,以此指导促排卵的临床合理应用.
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体外受精-胚胎移植治疗中卵子和胚胎质量对生化妊娠周期的影响
目的 探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗中卵子和胚胎质量对生化妊娠周期的影响.方法 选取在IVF-ET治疗中发生生化妊娠的200例(观察组)与获得单胚胎种植单妊娠分娩的389例患者(对照组)的临床资料进行卵子、胚胎质量的比较.结果 对照组年龄≥35岁的患者比例要低于观察组(P＜0.05);获卵率差异没有统计学意义(P＞0.05),然而成熟卵子率方面观察组是明显低于对照组(P＜0.05);观察组异常形态卵子率(如极体碎裂,胞浆颗粒化等)明显高于对照组,即正常形态卵子率较低.两组得到的优质胚胎的数量与移植胚胎的质量评分比较得到的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 IVF-ET治疗中,卵子质量下降是影响胚胎质量的因素,也是生化妊娠发生的重要原因,有较大可能能通过提高卵子及胚胎质量降低生化妊娠在IVF-ET治疗中的发生率,也就提高了临床妊娠率.
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Hcy对行体外受精-胚胎移植治疗PCOS患者卵子质量及发育潜能的影响
目的 探究同型半胱氨酸(Hcy)对行体外受精-胚胎移植治疗多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵子质量及发育潜能影响.方法 行体外受精-胚胎移植治疗PCOS患者70例为研究组,另选同期因输卵管因素行体外受精-胚胎移植治疗不孕患者69例为对照组,比较2组取卵日血浆、卵泡液Hcy浓度,统计2组卵子质量及发育潜能,分析Hcy浓度与优质胚胎率、卵裂率、受精率相关性.结果 研究组取卵日血浆、卵泡液Hcy浓度均明显高于对照组(P＜0.05);卵子成熟率、卵子回收率、优质胚胎率、卵裂率、受精率均显著低于对照组(P＜0.05);Hcy浓度与优质胚胎率、卵裂率、受精率均呈明显负相关(P＜0.05).结论 PCOS患者血浆、卵泡液Hcy浓度显著升高,是导致卵子质量及发育潜能较低重要原因.
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辅助生殖技术的有效性和安全性
体外受精-胚胎移植(IVF-ET)技术是不孕症治疗的重大突破,随着卵胞浆内单精子注射、胚胎植入前遗传学诊断等衍生技术的日趋完善和不断突破,IVF-ET已经成为生命科学领域发展迅猛的技术之一；但目前IVF-ET的周期妊娠率仍徘徊于40％左右.如何提高IVF的成功率是值得深思的问题；同时,卵巢过度刺激综合征、多胎妊娠等并发症的发生也是临床医师需要时刻注意的问题.IVF应遵循简单、经济、有效的原则,在提高妊娠率的同时,应特别关注对其风险进行评估.
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超促排卵后不同取卵时间对昆明小鼠卵子质量、体内成熟率和体外受精率的影响
目的 提高超促排卵KM小鼠卵子质量、体内成熟率和体外受精率.方法 对100只KM小鼠进行超促排卵,并观察超促排卵后获得卵子的卵核与第一极体位置及卵周隙变化、卵子形态、卵子体内成熟率和体外受精率.结果 注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)后12h、14h取卵,卵子质量好;注射hCG后13h所取卵的体内成熟率和体外受精率高.结论 KM系小鼠体外受精的佳取卵时间为超促排卵后13h.
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微刺激与短方案体外受精-胚胎移植过程中卵子质量的比较
目的:探讨微刺激与短方案体外受精-胚胎移植(IVF)治疗过程中卵子质量的差异.方法:选择2008年6月至2011年6月在我中心就诊,曾先后试行短方案和微刺激方案IVF治疗的134例患者,共计268个IVF周期.以短方案周期为S组,微刺激周期为M组；按短方案周期的获卵数将S组分为S1、S2、S3组(获卵数分别为≤3、4～6、≥7个),三组患者曾采用的微刺激周期分别为M1、M2、M3组.采用自身对照研究,比较两种治疗方案获卵数及优胚数的差异.结果:①获卵数、成熟卵子数、受精数、卵裂数及优胚数的比较,M组低于S组,其中M1均与S1相近,M2＜S2组(P＜ 0.01或0.05,除外D2优胚数),M3均小于S3(P＜ 0.01或0.05).②D2优胚率及D2优胚占获卵数的比率,M组总体高于S组,其中M1与S1相近,M2＞S2组(P＜0.05),M3＞S3(P＞ 0.05).③D2日优胚数占获卵数的比率,S1＞S3＞S2(P＜0.01),M1＞M3＞M2(P＞ 0.05).结论:短方案获卵数≤3者行微刺激治疗,获卵数和优胚数无明显差异.微刺激周期优质卵子比率较高可能因为获卵数较少.不论是微刺激方案还是短方案,优胚数占获卵数的比率以及优胚率并不总是体现卵子质量的高低,卵巢反应极差时优胚率反而可能上升.
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护卵汤对GnRHa超排卵大鼠卵巢形态的影响
目的 观察护卵汤对GnRHa超排卵大鼠卵巢形态的影响,为护卵汤辅治ART提供相关理论依据.方法 模仿人类辅助生殖中的长周期,对大鼠进行GnRHa垂体降调节后再用HMG等药物超排卵(模型组),同时随机给予不同剂量的护卵汤辅助治疗(分别为护卵汤低、中、高剂量组),以自然周期未使用任何药物的大鼠为正常对照(正常组).在HCG日称体质量并计算各大鼠卵巢指数,光镜观察排卵前卵泡并计算优质卵泡率,电镜观察卵母细胞的超微结构.结果 护卵汤中剂量组的卵巢指数明显高于模型组,差异有统计学意义(P＜0.01)；模型组和护卵汤各剂量组的卵巢指数均高于正常组,差异有统计学意义(P＜0.05或＜0.01)；模型组的优质卵泡率明显低于正常组和护卵汤中、高剂量组,差异有统计学意义(P＜0.05或＜0.01)；模型组较正常组卵母细胞凋亡及胞浆水肿明显,而护卵汤中剂量组较模型组卵母细胞超微结构改善,胞内脂滴明显增多,细胞凋亡减少.结论 1、GnRHa超排卵对大鼠的卵泡发育及卵子质量可能有不利影响；2、护卵汤能改善GnRHa超排卵大鼠的卵泡发育及卵子质量.
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中医药改善超排卵周期卵泡发育的研究思路
体外受精-胚胎移植(in vitro fertilizationembryo transfer,IVF-ET)及其衍生技术是人类辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)的主体,是临床治疗不孕不育症的有效手段.决定IVF-ET成功率的主要因素是胚胎质量和子宫内膜容受性.胚胎质量取决于优质的卵子和精子,而IVF-ET中卵子的获得常需使用控制性超排卵(controlled ovarian hyperstimulation,COH)方案.COH是指以药物的手段在可控制的范围内诱发多卵泡的发育和成熟,以便获得更多可供移植的胚胎从而提高受孕率.
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PM2.5暴露对小鼠体外受精及胚胎发育的影响
目的 研究PM2.5暴露对小鼠体外受精(IVF)及胚胎质量的影响.方法 选择健康昆明雌鼠40只、雄鼠10只.40只雌小鼠随机分成4组:PM2.5低剂量组(1.5 mg/kg)、PM2.5中剂量组(7.5 mg/kg)、PM2.5高剂量组(15 mg/kg)和对照组(给予相同体积的生理盐水),每组10只.以气管滴注的方式进行PM2.5染毒.比较各组间IVF基本情况(卵母细胞数、受精率、异常受精率、2PN卵裂率、2PN优质胚胎率、囊胚形成率)和卵泡液中相关细胞因子TNF-α和IFN-γ的表达.结果 PM2.5高剂量组的卵母细胞数、受精率、2PN卵裂率、2PN优质胚胎率、囊胚形成率与对照组相比降低,而异常受精率明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05);PM2.5高剂量组卵泡液中相关细胞因子TNF-α和IFN-γ的表达明显高于中剂量组与低剂量组,而中剂量组表达又高于低剂量组,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05),高、中、低剂量组表达均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 PM2.5暴露会减少小鼠体外受精的获卵数;降低受精率、2PN卵裂率、2PN优质胚胎率、囊胚形成率.
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对体外受精临床妊娠影响因素的配对研究
[目的]用配对研究的方法分析对体外受精临床妊娠的影响因素.[方法]34例患者的68个(每位患者两个周期,均为前次失败,后次临床妊娠)IVF-ET及ICSI周期.用配对研究分析患者的促超排卵(COH)用药情况(促性腺激素(Gn)起始剂量、Gn天数、Gn总量)、HCG注射日卵泡发育状况(直径≥1.4cm卵泡数、大卵泡直径)、HCG日子宫内膜厚度、HCG日激素水平(LH、E2、P)、卵子质量(获卵数、MⅡ期卵子数、受精数、正常受精数)、胚胎质量(卵裂数、正常卵裂数、冷冻胚胎数、优质胚胎总数)对临床妊娠的影响.[结果]临床妊娠组MⅡ期卵子数、受精数、正常受精数、卵裂数、正常卵裂数、冷冻胚胎数、优质胚胎总数明显高于未妊娠组(P<0.05).[结论]卵子和胚胎质量影响临床妊娠.如何在临床及实验室工作中提高卵子和胚胎质量有待进一步探讨.
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生长激素预处理改善高龄妇女卵子质量的研究现状
生育年龄推迟已经是全球趋势,尤其在我国全面推行二孩政策的今天,高龄妇女生育难问题越来越凸显[1]。与其他器官相比,卵巢几乎是受年龄影响早出现老化的器官之一[2]。主要表现在：一方面,随着年龄增长,卵巢卵泡池中始基卵泡丢失速度加倍,卵巢储备功能持续下降。另一方面,高龄导致卵母细胞内的活性氧簇( reactive oxygen species,ROS)积聚,线粒体功能下降,使得卵子质量逐步降低,非整倍体发生率随年龄增大迅速上升[3-4]。终的结果是在体外受精( in vitro fertilization,IVF)超促排卵治疗中高龄患者发生卵巢低反应的风险增加,并且卵子质量下降,IVF成功率降低[5-6]。
