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体外受精与体外培养对小鼠囊胚发育潜能的影响
目的 评估体外受精和体外培养对囊胚期胚胎细胞数及发育潜能的影响. 方法 (1)雌性ICR小鼠,自然交配获取囊胚为In vivo组,体内受精-体外培养获取囊胚为IVC组,体外受精获取囊胚为IVF组;(2)对三组囊胚行免疫杀伤法检测并在荧光显微镜下计数总细胞数、内细胞团细胞数、内细胞团与总细胞数的比值;(3)提取三组小鼠囊胚mRNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测Pou5f1等细胞因子的mRNA表达水平;(4)三组囊胚移植入D3.5假孕鼠,取D10.5胚胎进行形态学检测,计算胚胎植入率、成活率、流产率. 结果 (1)IVF组和IVC组囊胚与In vivo组相比,细胞总数、滋养外胚层(TE)细胞数、内细胞团(ICM)细胞数均显著降低(P<0.01),TE/ICM细胞数的比值三组之间无显著差异(P>0.05);(2)IVF组和IVC组囊胚与In vivo组相比,多潜能基因OCT4、Nanog、Sox2表达水平相对上调,而早期细胞命运分化相关基因Fgf4、Gata4、Sox17、Eomes、Elf5、Lif表达水平下调,差异有统计学意义(P<0.05);(3)三组间胚胎植入率无显著性差异(P>0.05),而IVC组、IVF组活产率显著低于In vivo组,流产率显著高于In vivo组,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 体外受精会导致囊胚质量下降,并影响胚胎植入后的进一步发育,导致胚胎成活率降低.
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过氧化氢酶对人造血干细胞在免疫缺陷小鼠中植入的作用
目的:研究人脐带组织来源的间充质干细胞(umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,UC-MSC)过表达过氧化氢酶(catalase,CAT)基因对人造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)移植作用的影响.方法:用携带GFP空载体与GFP-CAT载体的逆转录病毒感染UC-MSC,流式细胞术分选得到MSC-GFP和MSC-GFP-CAT两种细胞株,检测两种细胞株中CAT的mRNA表达水平和过氧化氢酶的酶活力;将其与人脐血CD34+细胞体外共培养;与人Lin-CD34+ CD38-CD45RA-CD90+ CD49f+ Rholow细胞共同移植到NOD/SCID小鼠胫骨中,移植12周后,检测骨髓中的人CD45+细胞比例.结果:感染48 h后能够观察到UC-MSC发出绿色荧光,并能够稳定传代;流式细胞术分选后,MSC-GFP的纯度达到97.6%,MSC-GFP-CAT达到96.8%;MSC-GFP-CAT细胞中CAT的mRNA水平为对照组的23.9倍;体外检测UC-MSC、MSC-GFP和MSC-GFP-CAT细胞的酶活力分别为19.5、20.3、74.1 Unit;在共培养实验中,各组中的CD34+细胞比例无显著差异;在共移植实验中,HSC、MSC-GFP和MSC-GFP-CAT组中人CD45+细胞的比例分别为(3.22±3.1)%、(4.26±3.56)%和(7.37±4.51)%,MSC-GFP-CAT组的植入率为对照组MSC-GFP的1.7倍.结论:MSC-GFP-CAT对人HSC体外扩增无影响;MSC-GFP-CAT与人HSC共移植能够提高人HSC的植入率.
关键词: 造血干细胞 间充质干细胞 过氧化氢酶 植入率 NOD/SCID小鼠 -
囊胚期冷冻胚胎移植的临床应用探讨
目的探讨囊胚期冷冻胚胎移植的临床应用价值.方法对2002年10月~2003年12月在湘雅医院生殖医学中心接受囊胚培养并行囊胚期冷冻胚胎移植的病例进行分析,了解囊胚期与卵裂期冷冻胚胎解冻后的胚胎成活率、植入率及妊娠率.结果冷冻囊胚解冻后胚胎数、胚胎成活率、植入率和妊娠率与卵裂期冷冻胚胎无显著差别(P>0.05),囊胚解冻后经15 h过夜培养,42枚中有22枚成活,其中8枚Ⅰ,Ⅱ级继续发育或囊胚腔扩张,3例获得妊娠,妊娠率为37.5%.结论囊胚期冷冻胚胎移植同样能达到卵裂期冷冻胚胎移植的临床效果,同时增加解冻与移植间隔时间可更好地选择冻融囊胚移植,对提高妊娠率可能有一定意义.
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卵母细胞形态及核质成熟度与体外受精结局相关性的研究进展
在体外受精操作中,受精率、卵裂率与卵母细胞质量密切相关.卵和胚胎的质量是影响植入率和妊娠率的重要因素.目前评价卵细胞的质量尚无明确的统一标准,但主要涵盖于对卵母细胞形态和成熟度的考察.非侵袭性方法以不损伤细胞为目的,不会对细胞的进一步发育造成不利影响,非常适用于辅助生殖技术.虽各方面研究的结果仍不完全一致,但形态学研究仍是给卵母细胞分类的重要途径,是简单和客观的判断卵子质量的方法.
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前置胎盘手术止血方法的选择与应用
前置胎盘是引起产科出血的重要原因之一,发病率为0.28%~1.50%,目前有增加趋势[1].前置胎盘的胎盘植入率为6.93%,因而切除子宫发生率高达15%[2-3].随着当前剖宫产率不断升高,凶险型前置胎盘的发生率也明显增加.1次剖宫产后再妊娠前置胎盘的发生率约为2 5%,是无剖宫产史者的5 3倍,2次及2次以上剖宫产后再妊娠,该病的发生率高达39%.
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福建省白内障"复明工程"1200例报告
目的探讨在白内障"复明工程"中施行白内障复明手术的疗效,并对手术方式、费用等进行讨论.方法回顾性研究4年间1200例"复明工程"手术病例.结果白内障囊内摘出术占5.8%,白内障囊外摘出术占14.4%,白内障囊外摘出合并人工晶状体植入占79.8%.脱盲率98.8%,脱残率89.7%.未见感染等严重并发症的发生.结论在农村条件差及病人多的情况下白内障复明手术仍能取得好的疗效,尽量降低手术费用,严防感染及意外是关键.不过分强调人工晶状体植入率.
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D2和D3胚胎形态学参数与植入率相关性分析
目的 探讨成功植入胚胎的形态学参数,为胚胎移植的选择提供数据支持.方法 回顾性分析2010年4月-2015年10月于我院生殖医学中心行体外受精(in vitro fertilization,IVF)或单精子卵胞浆注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)-胚胎移植(embryo zransfer,ET)助孕新鲜移植的113个周期,根据植入率分为胚胎100%植入组与0植入组,比较两组胚胎受精第2天(D2)和受精第3天(D3)卵裂球数目、碎片程度、细胞核状态及卵裂球对称程度的差异.结果 两组女方年龄、原发不孕比例、不孕因素、基础卵泡刺激素(follicle szimulazing hormone,FSII)水平、窦卵泡数(anzral follicle counz,AFC)、人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadozrophin,hCG)注射日雌激素(eszradiol,E2)水平、促性腺激素(gonadozropin,Gn)用量、受精方式差异无统计学意义(P>0.05).100%植入组中D2卵裂球数为4细胞的胚胎比例显著高于0植入组(84.82% vs50.82%,P=0.000);胚胎碎片程度为10% ~ 25%的比例有统计学差异(4.46% vs 12.30%,P=0.032);细胞核方面,每个卵裂球细胞可见1个清晰的细胞核和未见细胞核比例的差异有统计学意义(17.86% vs 8.20%,P=0.027;74.11%“85.25%,P=0.034);卵裂球对称程度两组间无差异.100%植入组D3的卵裂球数为8细胞的胚胎比例显著高于0植入组(66.96% vs 45.08%,P=0.001),而≤7细胞的胚胎比例则显著低于0植入组(15.18% vs 34.43%,P=0.001);胚胎碎片程度、细胞核状态、卵裂球对称程度无统计学差异.结论 建议综合患者临床情况,优先选择D2为4细胞、D3为8细胞并且碎片较少的胚胎进行移植.
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3例永久性起搏器植入术后囊袋感染的护理
人工心脏起搏器植入术在介入技术中广泛发展,是治疗各种原因引起的不可逆的心脏起搏和传导功能障碍性疾病的主要方法。但永久起搏器植入是一种有创的治疗,也可能引起一系列的并发症,囊袋感染就是永久起搏器植入术后严重的并发症之一,但囊袋感染的数量与心脏起搏器植入率不成比例[1]。起搏器植入术后囊袋感染需立即处理,严重时可能合并感染性心内膜炎。
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复合扩增荧光标记短串联重复序列技术预测非血缘脐血移植植入规律的研究
近年来,非血缘脐血移植(unrelated cord blood transplantation,UCBT)已成为治疗血液系统恶性疾病的一种重要治疗手段,由于UCBT移植物中所含有核细胞数量仅为骨髓移植的1/10,移植物植入率相比非血缘外周血和骨髓移植低,且植入延缓,导致移植早期感染、出血等移植相关并发症发生率高,所以,寻找一种灵敏特异的检测方法,预测UCBT后早期移植物植入的规律是非常必要的.
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脐血移植临床评价和主要问题探讨
自1988年Gluckman报道首例脐血移植(UCBT)成功以来,迄今已有超过6000例儿童和成人患者接受了同胞或无血缘关系UCBT.国内自20世纪90年代初先后在北京、广州、济南、天津等城市建立了脐血库,目前库存脐血总量约3万份,估计全国开展UCBT已超过200例,主要为无血缘关系UCBT.目前UCBT在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)中的地位尤其在成人移植中的地位还存在争议,UCBT植入率低、造血恢复延迟以及免疫重建缓慢而增加患者感染、早期移植相关死亡为其突出问题.
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几种药物对子宫内膜容受性影响的研究
子宫内膜容受性是子宫内膜接受胚胎着床的一种综合状态,与胚胎植入率及妊娠率密切相关.随着辅助生殖技术的发展,促排卵药物应用的成熟,对不孕症的诊治也上升到新的高度,提高胚胎植入率及妊娠率成为关键.控制性超排卵药物会影响子宫内膜的生长,改变子宫内膜容受性.通过总结几种中西药物对子宫内膜容受性的影响,以期为提高辅助生殖技术的成功率提供参考.
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MRI定量肝脏及心脏铁过载对地中海贫血全相合造血干细胞移植的影响
背景:大部分的重型β-地中海贫血患儿都存在铁过载的情况,而铁过载可对造血干细胞移植产生不利影响.目的:利用MRI T2*检测肝脏及心脏铁过载情况,从而评估肝脏、心脏铁过载对重型β-地中海贫血患儿全相合异基因造血干细胞移植的影响.方法:对81例全相合异基因造血干细胞移植、年龄>3岁,能配合MRI检测的重型β-地中海贫血患儿,进行肝脏及心脏MRI T2*检测.根据检测结果计算出肝脏及心脏铁浓度,作为评价肝心铁过载的指标,并将肝脏、心脏铁浓度与患儿血清铁蛋白、造血重建时间、死亡率、植入率、移植后常见并发症的发病率,如移植物抗宿主病、感染、免疫性溶血、全血细胞减少、肝静脉阻塞病、败血症进行相关因素分析.结果与结论:肝脏铁浓度与血红蛋白植入时间呈正相关(r=0.229,P=0.043),心脏铁浓度与死亡率呈正相关(r=0.266,P=0.017),血清铁蛋白与植入率呈负相关(r=-0.289,P=0.009),血清铁蛋白与败血症发病率呈正相关(r=0.251,P=0.024),血清铁蛋白与全血细胞减少发病率呈正相关(r=0.276,P=0.013).由此可见,铁过载可对重型β-地中海贫血患儿全相合异基因造血干细胞移植产生不利影响.因此,对行造血干细胞移植的β-地中海贫血患儿综合进行血清铁蛋白、肝脏及心脏铁过载的评估非常必要.
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辅助生殖中反复种植失败的病因及相关对策的研究进展
不孕症的患病率因地域、种族的不同而有所差别,在我国的发病率约15%.体外受精-胚胎移植(IVF-ET)作为不孕症的重要治疗手段,在中国大陆已经实施了近30年,随着技术的不断进步,IVF-ET的成功率不断提高,近年来累计成功率达可达40%,但仍有相当一部分患者出现反复种植失败(RIF).因此,如何提高RIF患者临床妊娠率成为研究的热点.
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脐血中造血细胞CD34+CD29+细胞含量对移植造血重建的影响
近半个世纪以来的实践证明,造血干细胞移植( HSCT)是白血病、再障、免疫缺陷病等恶性血液病治疗中的一个有效措施,而且提高造血干祖细胞( HSPC)在造血组织中的植入率是加快 HSCT后造血重建的关键之一.目前已证实,在外周血移植中, CD29+细胞与粒细胞、血小板的恢复相关 [1].我们通过对脐血 CD29+细胞的检测,试图寻找其对脐血移植造血恢复的影响,结果如下.
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人类白细胞抗原不完全相合的异基因外周血干细胞移植
异基因外周血干细胞移植(Allo-PBSCT)是目前治疗恶性血液病有效的方法.该作者综述了能为临床所接受的人类白细胞抗原(HLA)不完全相合的移植配型要求,以及从预处理、动员、干细胞体外处理、加强免疫重建、移植失败的处理等来提高HLA不全相合的植入率.
关键词: 人类白细胞抗原 异基因外周血干细胞移植 植入率 -
凶险型前置胎盘的临床特点和处理方法
凶险性前置胎盘早由Chattopadhyay[1]首先提出,其定义为:既往有剖宫产术史,此次妊娠为前置胎盘,且胎盘附着于原子宫瘢痕处。近年来随着剖宫产率的上升,凶险型前置胎盘的发病率正逐年上升。凶险性前置胎盘产妇的胎盘植入率可高达40%~50%,常常导致不可预见的大出血,很大程度上增加了失血性休克、子宫切除及产妇死亡的概率[2]。本研究对我院近年来收治的凶险型前置胎盘患者的临床资料进行了回顾性分析,并探讨其诊断、控制出血量及围手术期处理的方法,旨在为凶险型前置胎盘孕妇的诊治提供参考。
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凶险型前置胎盘15例期待治疗期间的观察与护理
妊娠28周后,胎盘附着于子宫下段,胎盘下缘甚至达到或覆盖宫颈内口,其位置低于胎先露部,称为前置胎盘[1].凶险型前置胎盘由 Chattopadhyay等[2]首先提出,其定义为既往有剖宫产史,此次妊娠为前置胎盘,且胎盘附着于原子宫瘢痕部位者,常伴有胎盘植入.近年来随着剖宫产率的上升,凶险型前置胎盘的发生率也相应上升,高胎盘植入率和产后大出血是凶险型前置胎盘的主要表现,可造成失血性休克、弥散性血管内凝血、早产、子宫切除、感染等并发症,严重者可危及生命.2000年1月~2011年12月,我们对15例凶险型前置胎盘患者行期待治疗,并给予积极观察及护理,取得满意效果.现报告如下.
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凶险型前置胎盘43例临床分析
在我国,近年来由于社会因素导致的剖宫产率增加,凶险型前置胎盘发生率随之明显增加.凶险型前置胎盘是一种发生在瘢痕子宫基础上的前置胎盘类型,主要为上次为剖宫产此次为前置胎盘者,其表现有胎盘植入率高,同时伴有产后大出血率高的特点.本文比较了通常类型前置胎盘及凶险型前置胎盘对孕产妇的危害性的差异性,以期提高对凶险型前置胎盘的认识及降低其危害.
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伴眼前段外伤的外伤性白内障后房型人工晶状体植入术34例分析
白内障摘出后房型人工晶状体(PC-IOL)植入术是治疗白内障的有效方法,但对伴有眼前段外伤的外伤性白内障,如果选择的治疗方法不恰当,就不能达到预期效果.1998~2001年以来,我科收治34例34眼伴眼前段外伤的外伤性白内障,采用分次手术的方法提高了PC-IOL的植入率,34眼均能植入PC-IOL,获得良好的效果,现报告如下.
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产前超声检查诊断胎盘植入的价值
胎盘植入是一种严重的产科并发症,由于蜕膜基底层发育不良而导致胎盘绒毛植入到子宫肌层的一种胎盘异常附着,可导致产后出血、休克、弥散性血管内凝血甚至围生期孕妇死亡.近年来,由于多次人流、宫内感染、剖宫产率增高、高龄孕妇增多等因素,胎盘植入率呈逐年上升趋势,约为0.2%~0.9%[1-2].但胎盘植入产前诊断较困难,其诊断率报道不一,本研究旨在探讨胎盘植入产前超声图像及临床资料以提高胎盘植入产前诊断的准确性.