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关于脐带血的疑问
广东省脐血库一份冻存长达15年的脐带血造血干细胞成功救治一名11岁急性髓细胞白血病女孩,在刷新了广东省脐血库冻存时间长的脐带血临床应用记录的同时,也成为国内临床应用的脐带血冻存年限之.据了解,这份冻存了15年的脐带血移植前复苏活性检测高达94.2%.2012年3月,北京市脐血库为北京道培医院提供了一份冻存14年的脐带血,这份脐带血是1998年冻存的,解冻时活性达96%以上.它用来救治了一位49岁,体重达87公斤的白血病患者.
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保存脐血:保存一份希望
保存脐带血早已不是什么新鲜事.准妈妈一般会在产前的孕妇学校了解到保存脐带血的信息,但是,因为缺乏对脐带血全面和科学的认识,是否保存脐带血仍然是让很多准妈妈左右为难的事情.为难的原因大致分两类,一是相对于近2万元的自存费用和低概率的重大疾病发生率,保存脐带血到底值不值得;二是保存后,看不见摸不着,长期不管不问,脐血库是否能保证保存和管理的质量.
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关于我国脐血库建设及其相关问题的探讨
自1989年第一例同胞脐血干细胞移植成功,脐血就成为了继骨髓和外周血后的第三大造血干细胞来源[1].世界各国纷纷建立脐血库储存脐血,以用作脐血移植,修复替代人体受损细胞.到2010年,全世界已经开展了约2万多例儿童和成人的脐血干细胞移植[2].截至2014年1月15日,全世界33个国家的48个脐血库中,储存了602 432份公共脐血[3].
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自体脐带血的保存及临床应用
脐带血内含有丰富的造血干、祖细胞,脐血移植已成功应用于治疗白血病、淋巴瘤、骨髓异常增生综合征、再生障碍性贫血、血红蛋白病、代谢贮积病和免疫缺陷性疾病.随着脐血库的建立和临床脐血移植数量的增多,越来越多的父母选择将脐带血捐献给公共库或者是储存到自体库以备应用.本文就近年来自体脐带血保存的现状和临床应用做一综述.
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脐血库HLA匹配机率分析
对广州脐血库1998年以来保存的3 000份脐血和1 060名患者进行回溯分析,分析患者在脐血库中搜寻非亲缘脐血的HLA匹配结果,以探讨患者找到适于移植的非亲缘脐血的可能性.结果表明,6/6 HLA全相合的患者有119人(11.23%),4/6以上相合的患者高达992人(93.58%).其中,分别有61.29%,89.79%的患者可以找到总有核细胞(TNC)剂量≥3.7×107/kg, ≥2.0×107/kg的4/6以上HLA相合脐血,相应的体重高者分别为79 kg和175 kg.结论:脐血库容量在3 000份以上就可以有HLA 93%的匹配率.由于不同体重对脐血TNC数量要求更高,广州脐血库能够满足30%-80%成人患者的需要.在为患者寻找造血干细胞移植非亲缘供者时,无论成人或儿童患者,在寻找骨髓供者的同时,都有必要寻找适宜的脐血供者.
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胎盘组织及血液中含有丰富的造血干/祖细胞
大量的临床移植表明人脐血(UCB)可以在造血干细胞移植的儿童中得到造血重建,可是在成人中脐血移植(UCBT)效果并不理想,这主要是脐血中所含的细胞数及造血干/祖细胞数有限,而不适宜体重较大的成人.本研究在收集脐血的同时,也分别收集胎盘血(UPB)及胎盘组织(UPT)中的细胞,检测有核细胞数,CD34(造血干/祖细胞的表明标记)阳性细胞,粒单细胞集落(CFU-GM).结果发现:来自于胎盘血和胎盘组织中的有核细胞数是脐血细胞的3-4倍;脐血、胎盘血及胎盘组织细胞的有核细胞数分别为(8.3±1.04)×108,(16.33±5.54)×108和(8.01±2.64)×108;CD34+细胞分别为(0.77±0.01)×106,(1.25±0.55)×106和(4.21±1.90)×106;在细胞的长期培养中,UPB细胞和UPT细胞能生存更长时间,而且这些细胞更易贴壁形成纤维样的细胞;冰冻前后UPT细胞活性及回收率无明显差异,表明胎盘细胞和脐血细胞一样适合于长期储存;而且,在UPB和UPT中含有更高比例的T淋巴细胞抑制细胞群,可能意味着UPB和UPT具有更强的免疫抑制功能.结论指出,有必要建立含有胎盘和脐血细胞的血库,以便为大剂量放疗及化疗后的儿童及成年病人进行造血干细胞移植,为重建造血创造条件.
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广州脐血库3 605脐血供者6个月后随访
本研究回顾分析了脐血库对库存3605份脐血所进行的脐血供者6个月后的随访情况,探讨供者随访制度在脐血库运作过程中的作用.1998年6月至2004年2月间,通过电话、信函方式对捐献脐血满6个月的母亲进行了母婴健康调查随访,对脐血的质量作出了评估.结果表明:有3 195人接受了电话随访,18人婉拒.对于无法通过电话随访的,则采用信函调查形式,共发信392封,回信15封.电话随访每例平均耗时12分钟.随访资料显示婴儿染色体异常2例、先天性甲状腺功能低下1例、粒细胞减少症1例、白化病1例、不明原因死亡5例.所有这些被查明为非正常婴儿供者的脐血均被废弃.总之:脐血库进行脐血供者6个月后的随访工作,能有效地提高库存脐血的质量.
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美国血液与骨髓移植学会(ASBMT)有关自体脐血的采集和保存的论点
<中国实验血液学杂志>编者按从1988年法国成功进行了第1例异基因脐血移植以来,迄今已经20周年了.近年来发达国家的脐血异基因移植事业正蓬勃发展,除了中国大陆外,全世界所有脐血库积存的脐血已逾26万份,临床用异基因脐血移植治疗的病人已累计1万例以上.
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脐血HLA-A位点PCR-SBT分型的研究
目的建立HLA-A位点等位基因的PCR-SBT高分辨分型方法,探讨DNA测序技术在脐血库样本HLA分型中的应用价值. 方法利用PCR产物直接测序,对广州脐血库保存的547份脐血样本进行HLA-A位点2、3、4外显子的序列分析,由分型结果得出基因频率,与中华(上海)骨髓库北方人群、上海地区人群及德国白种人进行比较. 结果采用PCR-SBT分型方法并结合分析软件确定了全部样本的HLA-A基因型,广州地区人群HLA-A等位基因以A*110101(30.8%)为常见,其后依次是 A*24020101/02L(16.18%)、A*0207(11.88%)、A*3303(9.42%).A*110101在广州汉族人群中出现的频率明显高于中华(上海)骨髓库北方人群,而A*010101、A*3001明显低于后者;在HLA-A2亚型人群中,A*020101在广州、上海两地汉族人群中的频率明显低于德国白种人,而广州汉族人群中A*020101与A*0206均明显低于上海汉族人,但A*0203明显高于后者. 结论基于核酸序列测定的HLA分型技术能够直接、准确、快速地进行高分辨分型,将有助提高无亲缘关系供者脐血移植的临床效果.改进实验条件、升级分型软件,可以降低试剂成本和节约时间.
关键词: HLA-A分型 PCR-SBT 脐血库 无亲缘关系供者脐血移植 -
HLA-DRB1基因多态性与急性髓性白血病的相关性研究
急性髓性白血病( acute myelogenous leukemia,AML)是临床常见的一种造血系统恶性肿瘤.关于HLA与AML的相关性研究,由于环境不同、人种不同,各地的报道结果存在一定差异.本文对732例AML患者及2264例正常对照进行了Ⅱ类基因HLA-DRB1的PCR-SSP基因分型研究,探寻与AML相关的HLA基因.病例组为经临床及实验检查确认的732例急性髓性白血病患者(男性460例,女性272例);对照组来自脐血库的2264份无血液病及遗传病家族史的正常新生儿脐血.采用离心柱法提取DNA,按照说明书进行操作.用核酸蛋白测定仪测定DNA浓度和纯度,保证A260/280值在1.6~1.8,调整浓度至80~100 ng/μl.
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116例脐血PCR-SSP和PCR-SSOP的HLA-DR分型结果分析
脐血中富含造血干细胞。造血干细胞移植是治疗多种危重病患者的有效手段。移植前的HLA分型是决定其移植成功的重要环节之一。器官移植供受者间HLA-DR不相容可引起急性移植物抗宿主反应(GVHD)。因此,脐血移植中需有精确的HLA-DR基因分型。 本研究从1999年1月至7月对脐血库的116例标本分别用PCR-SSP和PCR-SSOP法检测,分析结果如下。材料和方法标本来源:116例标本来自本院脐血库中的脐血标本。 标本的DNA提取:脐血标本为ACD-B抗凝血,取200μl作盐酸胍法抽提DNA〔1〕。 PCR-SSP方法:采用美国莱姆德公司的Micro SSPTM试剂盒。操作方法按试剂盒说明书进行。PCR产物常规琼脂糖电泳后,EB染色,自动成像仪照相。利用人工和电脑软件同时判读实验结果。
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脐血采集中的伦理法律问题及护理对策
现代医学证明,脐血在生命科学研究和临床医学方面具有越来越广阔的应用前景,世界各国都相继建立了脐血库[1].脐血采集是脐血研究和脐血库供源的重要一环,采集工作主要由助产士或护士操作.如何采集才能取得高质量的脐血?怎样的护理对策才能避免采供之间的矛盾纠纷?现还在探索之中.1992年以来,我院为科研和脐血库采集脐血万余例,曾遇各种矛盾纠纷问题,直接影响了采集工作的进行.为使脐血采集工作更好的服务于临床,总结分析问题发生的原因,对脐带血采集中所涉及的伦理法律问题及护理对策进行讨论.
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急性淋巴细胞白血病非亲缘双份HLA不全相合脐血移植出现严重移植物抗宿主病一例
患者女,22岁.2003年4月因骨痛2个月余,反复发热20余天而在外院确诊为急性淋巴细胞白血病(ALL).因无相关供者,也未找到HLA相合的无关供者,故于首次化疗完全缓解后5个月行无关供者脐血移植(UD-CBT).术前病毒学检查乙型肝炎、丙型肝炎抗原和抗体阴性,巨细胞病毒抗体(CMV-IgM)、单纯疱疹病毒抗体(HSV-IgM)、EB病毒抗体均为阴性,心、肝、肾等无异常.双份脐血由广州市妇婴医院脐血库提供,HLA配型及供受者血型结果见表1.
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韩国脐血移植和脐血库的现状(附视频)
自1996年韩国完成首例脐血移植后,各大医院陆续开展了该项技术并建立起脐血库.本讲座介绍了韩国儿童脐血移植的现状、静脉输注冻存的自体脐血单个核细胞改善脑瘫儿童神经功能的试验以及韩国脐血库建设情况和脐血移植的选择策略.
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脐血采集方式对脐血造血细胞含量的影响
目的 比较阴道分娩和剖宫产采集脐血所含造血细胞含量的差异,评估两种采集方式的优缺点.方法 回顾性分析两种脐血采集方式间新生儿体重、采集体积、总有核细胞数(TNC)、CD34+细胞百分率、CD34+细胞数和总集落数(CFUs)的差异.结果 采集体积在两组间差异无统计学意义(P>0.05).而阴道分娩组TNC、CD34+细胞百分率、总CD34+细胞数、CFUs数明显高于剖宫产组,新生儿体重小于剖宫产组,差异有统计学意义(P<0.05).新生儿体重在2.5 kg~4.0 kg时,阴道分娩组TNC、总CD34+细胞数和CFUs数明显高于剖宫产组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 阴道分娩采集方式采集的脐血含有较高的造血细胞含量且有利于采集到更好脐血质量,可作为同胞脐血移植采集脐血的优选分娩和采集方式.
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标准化脐血筛选方法在脐血库中的应用
目的对广州脐血库脐血筛选结果进行回顾性分析,建立脐血筛选的标准化方法和探讨其在脐血库建立中的意义.方法对脐血供者从产妇或其旁系亲属医学病史到新生儿随访实行四步筛选程序,筛选内容包括遗传、血液病等病史、脐血采集量、总有核细胞数、细胞活率、凝块和病原学感染等.结果1998年6月至2004年12月共分娩27404例、采集脐血8350份,占总分娩量比率为30.47%.合格4085份,合格率为48.92%;废弃脐血4265份(占51.08%),废弃的主要原因依次为脐血采集量<60ml、血凝块、总有核细胞数、活率低.检疫期共废弃脐血46份(占1.¨%);其中检出细菌阳性19例(占41.30%),巨细胞病毒抗体(CMV-lgM)阳性20例(占43.48%).新生儿随访共发现15例异常,占0.37%.4085份脐血总有核细胞数平均为1.21×109,根据脐血有核细胞输入量3.7×107/kg体重计算,平均能适合32.7kg的受者移植;而按2.0×107/kg体重计算平均能适合60.5kg的受者移植.104例脐血移植中72例获得植入(69.2%).结论脐血供者的标准化筛选方法可以排除可能存在的血液性、遗传性和传染性等疾病,确保移植用脐血的安全;并能为脐血库的建立节约采集、处理、冻存等费用,提高库存脐血的有效利用率.
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脐血的采集和分离及有核细胞的富集
脐血中富含造血干/祖细胞,是骨髓和外周血后的第三种造血干细胞的来源[1].脐血的采集、分离和保存方式对单个核细胞(MNC)和CD+34细胞的回收有一定的影响.分析不同性别、胎龄、胎次和体重的胎儿脐血量、MNC数,以及脐血采集后处理方式对MNC和CD+34 细胞的影响,有助于脐血临床移植和建立脐血库.
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去T细胞脐血低温保存的研究
目前的研究表明,非血缘关系的脐血移植(umbilical cord blood transplantation, CBT) 也是重要的造血干细胞来源[1].而脐血库的建立为开展配型不合的CBT提供了保证.但是,CBT可能发生移植物抗宿主病(graft versus host disease, GVHD),尤其是配型不合的CBT,从而影响移植成功率.免疫毒素(immunotoxin,IT)能有效去除脐血T细胞而对造血祖细胞无明显影响[2],为预防重度GVHD提供了有效手段.我们观察了IT去除脐血T细胞后的冻存效果.报告如下.
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人类白细胞抗原1个位点不合无关供者脐血移植治疗急性髓性白血病一例
2000年5月,我们应用广州脐血库提供的一份人类白细胞抗原(HLA)1个位点不合无关供者脐血进行移植,治疗1例急性髓性白血病(AML)患儿,现无病存活.报告如下.
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脐血造血干细胞移植的研究进展
自1980年以来,人们认识到脐血中含有丰富的造血干细胞,并用造血干细胞移植治疗血液系统疾病及其他各种相关疾病,得到了更好的效果,脐带血因其更容易广泛获取,又没有伦理道德的限制,而且有立即可用性、移植免疫耐受较低等诸多优点被广泛利用,从此在移植医学和再生医学领域获得了一席之地.脐血的收集和移植得到了很快的发展,脐血库应运而生.该文就目前脐血库的现状和脐血造血干细胞移植的应用进展进行综述.