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两种方法检测TETA与卡铂联用对肿瘤细胞作用的比较
检测药物对肿瘤细胞作用活性的方法是抗肿瘤药物筛选的基本途径.四甲基偶氮唑蓝(3-(4,5-dimethyl-2thiazoly)2,5-diphenl-2H-tetrazolium bromide,MTT)在不含酚红的培养液中溶解后呈黄色.活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能将MTT黄色溶液还原为紫色的不可溶性甲瓒结晶,沉积于活细胞中.
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外源性端粒酶催化亚基不影响人骨髓间充质干细胞的特性
目的 研究稳定表达端粒酶催化亚基的人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)生物学特性. 方法 用含有人端粒酶返转录酶(hTERT)基因的反转录病毒质粒pBabepuro-hTERT感染hBMSCs,经嘌呤霉素(puro)筛选出转基因细胞,我们将其命名为hTERT-hBMSCs.采用TRAP-ELISA法检测hBMSCs细胞转染前后端粒酶活件的变化;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,染色体核型分析,测量平板克隆形成率,成骨诱导等方法 对hTERT-hBMSCs细胞生物学特性进行分析. 结果 TRAP-ELISA法检测转染hTERT的hBMSCs的端粒酶为阳性;hTERT-hBMSCs细胞表面抗原CD44表达阳性,CD34阴性;hTERT-hBMSCs比hBMSCs增殖活跃,目前已传了11代,尚未见衰老迹象,其染色体数目和结构正常,未见畸变;克隆形成率较低,为正常细胞;并保持于细胞成骨分化潜能.结论 将外源性hTERT基因转入hBMSCs后,不影响其生物学特性和分化功能.
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N-琥珀酰壳聚糖对牛血红蛋白和正常肝细胞毒性研究
目的 探究N-琥珀酰壳聚糖(NSCS)对牛血红蛋白(BHb)和正常肝细胞(HL-7702)的毒性.方法 在模拟人体生理条件下,以BHb为研究对象,采用紫外-可见分光光度法、荧光光谱法和同步荧光光谱法结合,探究NSCS对BHb的毒性;同时以HL-7702为研究对象,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法考察NSCS对HL-7702的细胞毒性.结果 紫外-可见分光光度法和MTT法结果表明,NSCS的毒性较弱,且取代度对NSCS毒性的影响较小.荧光光谱显示,NSCS可以猝灭BHb的内源性荧光,且猝灭作用随取代度的增大略有增强.其猝灭机制主要为动态猝灭,二者间作用力主要为静电作用力和疏水作用力.同步荧光光谱显示,NSCS对BHb的构象基本无影响.结论 NSCS对BHb和HL-7702细胞的毒性均较弱.
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疏肝舒乳颗粒对人乳腺癌MCF-7细胞的毒杀作用研究
目的 研究疏肝舒乳颗粒(SGSR)对人乳腺癌MCF-7细胞的细胞毒性作用.方法 应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,在试管内研究SGSR对MTT OD值的影响,检测SGSR对MCF-7细胞的毒杀作用.结果 SGSR各浓度组光密度值均低于对照组,说明不同浓度的SGSR对MCF-7癌细胞均有一定的杀伤作用.特别是4,1,0.25 g/ ml浓度组,其对癌细胞的杀伤率分别达到99.9%,99%,95.55%,差异有显著性(P<0.01 )和很好的剂量效应曲线,杀伤率明显高于β-胡萝卜素(β-CA)和SGSR加β-CA浓度组.结论 研究结果现显示,S6SR在试管内对MCF-7乳腺癌细胞有明显的毒杀作用,起效机制除了对肿瘤细胞的直接杀伤作用外,其抗突变、抗有丝分裂作用也可导致DNA链断裂,达到干扰基因转录而产生抗癌作用.SGSR不仅可作为治疗乳腺增生性疾病的药物,也可作为乳腺癌放、化疗时的辅助用药.
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藤茶提取物的抗肿瘤作用研究
目的 观察藤茶提取物(FL0810)体内外抗肿瘤的作用.方法 采用S180腹水瘤模型观察FL0810体内抗肿瘤作用.应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法研究FL0810对肿瘤细胞体外增殖的影响.结果 FL0810能延长S180腹水瘤小鼠生存时间,与模型对照组相比有显著差异(P<0.05);FL0810对人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435、人前列腺癌细胞DU 145均有较强的体外增殖抑制作用,且呈现明显的剂量依赖性,抑制率随着药物浓度增加而增加;72 h半数抑制浓度(IC50)为别为208.71,226.14,150 μg/mL.结论 藤茶提取物在体内对5180的生长有一定的抑制作用,在体外对人乳腺癌和人前列腺癌有明显的抑制作用.