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T淋巴瘤患者在自体造血干细胞治疗中的护理效果
目的：探讨T淋巴瘤患者在自体造血干细胞治疗中的护理对策及效果。方法选取2008年3月—2015年3月我院收治的T淋巴瘤患者50例，患者临床治疗中给予针对性的隔离及干细胞移植护理措施。结果统计结果显示，患者在治疗后未出现严重污染，中粒细胞恢复正常值时间为（9.8±2.3）d，血小板恢复正常值时间为（11.2±1.6）d，无移植治疗及相关死亡病例。结论在T淋巴瘤患者的临床治疗中给予针对性的护理干预（移植前的干预、移植后并发症的预防）可显著缩短患者恢复时间，减少临床并发症，值得推广应用。
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T细胞淋巴瘤DNA疫苗的实验研究
目的:研究T细胞淋巴瘤TCR Vβ DNA疫苗诱发小鼠体液免疫反应.方法:将BALB/C小鼠随机分为pcDNA3.1组、pcDNA3.1/TCR Vβ8组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+CpG+质脂体组和全硫代CpG组,共4组(每组6只),双侧股四头肌注射疫苗免疫,于第0、2、4周各免疫1次,共3次.每次免疫前及免疫开始后至第8周,取鼠血,应用间接免疫荧光法检测小鼠抗体生成情况.结果:pcDNA3.1/TCR Vβ8组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+CpG+脂质体组小鼠血清中均产生了特异性抗体,抗体滴度在第4周开始增高,第6周时达到高峰.同一时间段相比,特异性抗体滴度后者显著高于前者.结论:证明了DNA重组质粒pcDNA3.1/TCR Vβ8可诱导小鼠产生特异性抗T细胞淋巴瘤TCR Vβ8抗体;CpG和脂质体增强了TCR Vβ8 DNA疫苗诱导的体液免疫反应.
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PCR检测T淋巴瘤细胞TCR基因重排
目的探讨恶性淋巴瘤细胞TCR基因重排情况及意义.方法采用PCR法检测10例T淋巴瘤细胞TCR基因重排,并与正常人对照.结果10例T淋巴瘤细胞有2例重排阳性,均为高度恶性晚期淋巴母细胞性淋巴瘤.结论TCR重排可作为恶性淋巴瘤疗效监测和估计预后的一项指标.
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T淋巴瘤TCR β链独特型DNA疫苗诱发小鼠体液免疫反应
目的:研究T淋巴瘤TCR β链独特型DNA疫苗诱发小鼠体液免疫反应.方法:大剂量提取质粒,将BALB/c小鼠随机分为pcDNA3.1组、pcDNA3.1/TCR Vβ8组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+ IL-2组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+CpG+脂质体组和全硫代CpG组共5组(每组6只),双侧股四头肌内注射疫苗免疫,于第0、2、4周各免疫1次,共3次.每次免疫前及免疫开始后至第8周,取鼠血,应用间接免疫荧光法检测小鼠抗体生成情况.结果:pcDNA3.1/TCR Vβ8组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+CpG+脂质体组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+IL-2组小鼠血清中均产生了特异性抗独特型抗体,抗体滴度在第4周开始增高,第6周时达到高峰.在同一取血时间,pcDNA3.1/TCR Vβ8+CpG+脂质体组和pcDNA3.1/TCR Vβ8+IL-2组小鼠抗体滴度均高于pcDNA3.1/TCR Vβ8组(P<0.001).结论: DNA重组质粒pcDNA3.1/TCR Vβ8可诱导小鼠产生特异性抗淋巴瘤细胞的独特型抗体;IL-2 、CpG和脂质体增强了TCR Vβ8基因疫苗诱导的体液免疫反应.
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T淋巴瘤TCR β链独特型DNA疫苗在小鼠骨骼肌中的基因及蛋白表达
目的:检测T淋巴瘤TCR β链独特型DNA疫苗的基因表达.方法:大剂量提取质粒,将BALB/c鼠随机分为pcDNA3.1组、pcDNA3.1/TCR Vβ8组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+ IL-2组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+CpG+脂质体组和全硫代CpG组共5组(每组6只),双侧股四头肌内注射疫苗免疫,于第0、2、4周各免疫1次,共3次.接种疫苗后5 d,用RT-PCR法检测重组质粒mRNA表达.接种疫苗后7 d应用免疫组化检测重组质粒蛋白表达.结果:pcDNA3.1/TCR Vβ8组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+ IL-2组、pcDNA3.1/TCR Vβ8+CpG+脂质体组小鼠骨骼肌中均显示mRNA和蛋白表达,而pcDNA3.1组和全硫代CpG组未见mRNA和蛋白表达.结论:T淋巴瘤TCR β链独特型DNA疫苗在小鼠骨骼肌中有效地表达了基因产物.
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靶向神经纤毛蛋白-1基因RNA干扰慢病毒载体的构建及对人T淋巴瘤细胞靶基因沉默作用
目的 构建靶向神经纤毛蛋白-1(NRP-1)基因的RNA干扰慢病毒表达载体[pLB-NRP-1/短发卡RNA(shRNA)],并观察其对人T淋巴瘤Jurkat细胞靶基因NRP-1的沉默效应.方法设计、合成3对人NRP-1的特异性干扰序列(NRP-1/shRNA1-3)和1对非特异性对照序列(NRP-1/shRNA4),分别亚克隆至经Hpa Ⅰ、Xho Ⅰ双酶切线性化的慢病毒载体pLB中,得到pLB-NRP-1/shRNA重组慢病毒质粒;经酶切和测序鉴定成功后,与包膜质粒pCMV△8.91、被摸蛋白质粒pMD.G重组并包装成为慢病毒表达载体;将其感染至Jurkat细胞;分选阳性细胞后应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测对NRP-1 mRNA和蛋白表达的沉默效应.结果 酶切和测序结果证实3个靶向NRP-1基因的慢病毒载体构建成功,包装成慢病毒滴度可达108 IU/ml;感染Jurkat细胞后,NRP-1 mRNA表达量分别下降了95.9％、92.3％、87.1％,NRP-1蛋白的表达量分别下降了33.8％、29.7％、17.9％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),shRNA1为佳干扰靶序,pLB-NRP-1/shRNA1为佳干扰靶序列慢病毒表达载体.结论 成功构建慢病毒表达载体可高效感染体外培养的人Jurkat细胞株,并可显著抑制靶基因NRP-1 mRNA和蛋白的表达.
