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氯氰菊酯对小鼠睾丸组织的氧化损伤和维生素E的抗氧化作用
[目的]研究氯氰菊酯(CP)对小鼠睾丸组织的氧化损伤和维生素E的抗氧化作用. [方法]以36只昆明小鼠为受试动物,随机分为6组,包括1个阴性对照组、3个氯氰菊酯染毒组、1个维生素E组和1个高剂量氯氰菊酯(40mg/kg)加维生素E组(100 mg/kg),染毒组按10、20和40 mg/kg 3个剂量水平,维生素E的剂量为100mg/kg,小鼠灌胃染毒7d.取睾丸称重测定脏器系数；以睾丸组织匀浆测定活性氧(ROS)、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量；以睾丸细胞测定DNA-蛋白质交联(DPC)系数；并制作睾丸组织切片,观察其病理损伤. [结果]随着氯氰菊酯染毒剂量的升高,睾丸的脏器系数、ROS、MDA含量和DPC系数逐渐上升,GSH含量逐渐降低,各指标呈一定的剂量-效应关系.与对照组比较,染毒剂量为20mg/kg时,睾丸脏器系数(0.568±0.027)、ROS含量(586.2±43.94)、GSH含量(18.15±2.351)、DPC系数(0.186±0.017)和MDA含量(2.051±0.137)差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),睾丸部分生精小管生精细胞减少,生精细胞脱落管腔；染毒剂量为40 mg/kg时,GSH含量(17.13±1.203)、脏器系数(0.643±0.028)、ROS含量(898.8±100.23)、MDA含量(2.299±0.157)和DPC系数(0.229±0.020)差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),睾丸生精细胞明显减少,部分生精细胞脱落坏死,阻塞管腔.高剂量染毒加维生素E组与高剂量染毒组相比较,睾丸的脏器系数、ROS、MDA含量和DPC系数均有下降,GSH含量上升.ROS含量(550.4±102.3)、GSH含量(24.65±2.892)和MDA含量(1.291±0.289)差异有统计学意义(P＜0.05)；睾丸的脏器系数(0.507±0.026)和DPC系数(0.139±0.017)差异有统计学意义(P＜0.01). [结论]较高剂量(20、40 mg/kg)的氯氰菊酯能造成小鼠睾丸的氧化损伤和病理损伤,且可以被维生素E的抗氧化作用所拮抗.
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邻苯二甲酸二丁酯对体外大鼠肝脏细胞的氧化损伤作用
目的 探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对大鼠肝脏细胞的急性氧化损伤作用.方法 用0、5、20、80μmol·L-1的DBP溶液对大鼠肝脏细胞进行体外染毒1 h,然后分别用硫代巴比妥酸(TBA)法和KCI-SDS沉淀法来检测丙二醛(MDA)含量和DNA-蛋白质交联(DPC)系数的变化.结果随着DBP染毒浓度的升高,大鼠肝脏细胞的MDA含量和DPC系数逐渐上升,且在5 μmol·L-1浓度时就与对照组具有良好的统计学意义(P＜0.01).结论 DBP能够对体外大鼠肝脏细胞造成氧化损伤.
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邻苯二甲酸丁基苄酯诱发HeLa细胞株DNA-蛋白质交联影响的初步研究
目的 研究邻苯二甲酸丁基苄酯(BBP)的遗传毒性.方法 采用不同浓度BBP(0、5、25、125、625 μmol·L-1)对HeLa细胞进行体外染毒2 h,利用KCl-SDS沉淀法检测DNA-蛋白质交联DPC效应.结果 不同浓度的BBP均能引起HeLs细胞DPC系数的上升,但这种效应在低浓度(5μmol·L-1)时不显著(P>0.05);而在高浓度(25、125、625 μmol·L-1)时,BBP能够显著地或非常显著地(P<0.01,P<0.05)诱导HeLa细胞产生DNA-蛋白质交联效应.结论 邻苯二甲酸丁基苄酯可诱发HeLa细胞株DNA-蛋白质交联.
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甲醛致大鼠离体骨髓细胞DNA-蛋白质交联的研究
目的 检测经不同浓度甲醛染毒后所致大鼠骨髓细胞的DNA-蛋白质交联程度.方法 采用KCI-SDS沉淀法检测液态甲醛所致DNA-蛋白质交联(DPC)效应.结果 低浓度的甲醛(10 μmol/L和50 μmol/L)能引起DNA-蛋白质的交联;较高浓度的甲醛(250 μmol/L和1250 μmol/L)可以产生明显的DNA-蛋白质交联作用(P＜0.01).结论 甲醛可造成骨髓细胞DNA-蛋白质交联,而DPC可以对细胞产生严重的遗传毒性,这可能是甲醛导致白血病的分子机制之一.
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邻苯二甲酸二乙基己酯致小鼠不同器官细胞 DNA-蛋白质效应研究
目的 为了探讨邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)导致生物机体内不同器官DNA-蛋白质的交联(DPC)作用.方法 以采用KCl-SDS沉淀法来检测DEHP体外染毒后昆明纯系小鼠体内肝、脑、睾丸、肺等4个器官的细胞中DNA-蛋白质交联含量.结果 当DEHP的浓度为5μM时,小鼠肝细胞的DPC系数与对照组相比没有发生显著的变化;当DEHP的浓度分别升高到10、20、40和80μM时,DPC系数显著上升,且DPC含量与对照组相比有极显著差异;在脑细胞中,当DEHP的浓度分别为5、10 μM时,能显著诱导DPC的生成(P＜0.05),但是,随着DEHP的浓度升高,DPC的含量与对照组相比没有显著性差异;在睾丸的细胞中,当DEHP的浓度为5 μM时,小鼠睾丸的细胞DPC系数与对照组相比有显著的升高(P＜0.05);当DEHP的浓度升高到10、20、40、80uM时,DPC系数显著上升,且DPC含量与对照组相比有极显著差异(P＜0.01);在肺细胞中,DEHP的浓度为5 μM时,就能显著诱导DPC的生成(P＜0.05).结论 DNA-蛋白质交联是一种严重的DNA损伤,DEHP可诱导DNA-蛋白质交联的产生.
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甲醛致小鼠肺DNA蛋白质交联和DNA断裂效应的研究
目的研究甲醛致小鼠肺DNA-蛋白质的交联(DNA-protein crosslinks,DPC)和致DNA的断裂作用.方法以小鼠肺为材料,经体外染毒后,采用KCl-SDS沉淀法和单细胞凝胶电泳法检测液态甲醛染毒后肺部提取细胞中DNA-蛋白质交联物的含量及DNA的断裂效应.结果 KCl-SDS沉淀法,低浓度的液态甲醛(5μM,25 μM)不能引起DNA-蛋白质的交联(P＞0.05),较高浓度(125 μM,625 μM)可以引起明显的DNA-蛋白质的交联作用(125 μM,P＜0.05;625 μM,P＜0.01).而单细胞凝胶电泳法显示甲醛在低浓度(5 μM,25 μM)时可以引起DNA链的断裂(P＜0.01),在较高浓度(125 μM,625 μM)时可以引起交联作用(P＜0.01).结论甲醛在较高浓度时可以导致明显的DNA-蛋白质交联作用,而在＜25 μM时以DNA断裂为主.
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甲醛致人血淋巴细胞DNA-蛋白质交联作用的定量研究
目的探讨甲醛致DNA-蛋白质的交联作用以及交联的检测方法.方法以人血淋巴细胞为材料,设定0、0.005、0.025、0.125、0.625 mmol/L五个甲醛浓度梯度,采用KCl-SDS沉淀法来检测染毒后细胞中DNA-蛋白质交联的含量.结果甲醛浓度在0、0.005、0.025 mmol/L时,交联现象不明显或不能诱导DPC(P＞0.05);在0.125、0.625 mmol/L时交联程度显著增加(P＜0.01),并有较好的剂量-效应关系.结论在低浓度时,甲醛诱导DNA-蛋白质交联现象不明显或不诱导该现象,在高浓度时可显著诱导交联现象.KCl-SDS沉淀法检测DNA-蛋白质交联的含量是有效的.
