首页 > 文献资料
-
铅对小鼠脑细胞外信号调节激酶活力的影响
目的研究不同浓度乙酸铅染毒对发育期不同时段小鼠脑组织细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)活力表达的影响.方法分组饲养小鼠,对照组喂以蒸馏水;实验组于交配后改喂含不同浓度乙酸铅(0.5、2.4、4.8、7.2、9.6和14.4 mmol/L)的水溶液.新生鼠通过母乳摄入铅;断乳后幼鼠自行饮水摄入铅.新生鼠按生后不同日龄(P1,P8,P15,P22,P30)取脑组织.利用ERK磷酸化抗体,通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同日龄不同染铅浓度小鼠等量脑标本中ERK活力表达.结果 Western blot结果显示,较低浓度的铅可引起某些发育时段ERK1/2活力水平升高,如Pb 0.5 mmol/L组P30时段和Pb 2.4 mmol/L组P22时段的ERK活力比对照组明显升高,而逐渐升高的铅浓度可以引起P22～P30时段小鼠脑中ERK活力表达逐渐下降,9.6 mmol/L Pb浓度下P30时段小鼠脑ERK活力降至低.但在更高的铅浓度(14.4 mmol/L)下,未见ERK活力继续降低.另外,Pb7.2组在P1、P8和P15时段明显高于正常对照组,而P22和P30时段则明显低于正常对照组.结论铅对P22和P30时段小鼠脑中ERK活力水平有明显的影响.低浓度铅可引起某些发育时段ERK1/2活力水平升高,较高浓度铅引起某些发育时段ERK1/2水平降低.
-
奥曲肽对TGF-α刺激肝癌细胞增殖和ERK表达的抑制作用
目的探讨生长抑素类似物奥曲肽对转化生长因子-α(TGF-α)刺激人肝癌细胞增殖和细胞外信号调节激酶 (ERK)表达的影响.方法 TGF-α刺激人肝癌细胞前后细胞增殖的变化以免疫组化法、绘制细胞生长曲线和集落形成实验检测,ERK蛋白表达以免疫组化法和Western-blot检测.结果 TGF-α能上移细胞生长曲线,促进细胞集落形成,使细胞集落形成率增加,使增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白及ERK蛋白在细胞核内表达明显增加,Western-blot所测ERK蛋白表达也明显增加;奥曲肽和TGF-α同时作用于细胞后,与TGF-α单独作用相比,细胞生长曲线下移,细胞集落形成受抑制,集落形成率减少,PCNA蛋白及ERK蛋白在细胞核内表达明显减少,Western-blot所测ERK蛋白表达明显减少.结论奥曲肽能抑制TGF-α刺激的人肝癌细胞增殖,阻断TGF-α在细胞内的信号传导.
-
海马苔藓纤维出芽分子机制及在颞叶癫痫中的作用
颞叶癫痫是难治性癫痫中常见的类型,苔藓纤维出芽(Mossy fiber sproutinggranular,MFS)是颞叶癫痫患者特征性的病理变化,但其分子信号通路及在颞叶癫痫中的作用至今还未明确.现综述近年有关MFS的信号通路及其在颞叶癫痫中作用.首先从颗粒细胞轴突出芽相关的信号通路进行阐述,主要包括细胞外信号调节激酶通路调节神经元胞体和轴突生长发育的作用,还有雷帕霉素靶蛋白转导通路对痫性发作的影响以及调节细胞增殖、突触重塑的作用.然后进一步阐述MFS到底促进还是抑制癫痫的发生以及与颞叶癫痫的因果关系.为颞叶癫痫的发生机制及治疗提供新思路.
-
柴胡皂苷A诱导鼻咽癌细胞凋亡及其机制研究
目的：初步研究不同浓度的柴胡皂苷A( saikosaponin A, SSA)对鼻咽癌细胞凋亡诱导作用及其机制。方法体外常规培养人鼻咽癌5-8F细胞,将 SSA溶解于含0.2％二甲基亚砜( dimethyl sulfoxide, DMSO)的Dulbecco改良Eagle培养基( dulbecco＇s modified eagle medium, DMEM)高糖培养基中,分别以0(对照组)、5、10和20μmol/L SSA作用于鼻咽癌细胞48小时,之后用免疫印迹法检测不同浓度的SSA对鼻咽癌细胞总的细胞外调节蛋白激酶( total extrallular signal regulated protein kinase, t-ERK)及磷酸化的细胞外调节蛋白激酶( phosphorylated extrallular signal regulated pro-tein kinase, p-ERK)蛋白表达量的影响,并通过流式细胞仪检测细胞凋亡水平的变化。结果与对照组相比,10~20μmol/L SSA作用48小时,鼻咽癌细胞中ERK蛋白磷酸化水平明显降低,差异有统计学意义；而与对照组相比,10~20μmol/L SSA处理的鼻咽癌细胞凋亡细胞数明显增加,差异有统计学意义,且随着SSA浓度的增加,凋亡细胞数也相应增多。结论一定浓度的SSA可引起鼻咽癌细胞凋亡率的上升,其机制可能与抑制ERK蛋白磷酸化表达有关。
-
脑心通对脑缺血再灌注损伤细胞外信号调节激酶活化的影响
目的:观察大鼠局灶性脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)后信号转导介质细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)的活化情况以及脑心通对其的影响.方法:雄性成年Wistar大鼠90只,随机分成3组:假手术组、对照组和脑心通组(每组30只),分别于缺血前6日每日用生理盐水4ml、和脑心通0.48g/kg(4ml生理盐水溶解)灌胃.采用线栓法致大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,在脑缺血再灌注后的3h、6h、24h、48h和72h分别处死大鼠(各组每个时间点6只),将脑组织进行免疫组织化学、TTC染色,TUNEL法观察细胞凋亡.结果:脑缺血诱导ERK活化,第6h达高峰,并持续到72h.脑心通组ERKs活化明显较对照组增强,而且各时间点ERK免疫反应阳性细胞数脑心通组较对照组显著增多(P＜0.01).脑心通组TTC染色梗死体积及凋亡细胞数较对照组明显较少(P＜0.01).结论:局灶性脑缺血再灌注可诱导缺血脑细胞部分ERK活化,脑心通干预可使缺血大脑海马ERK活化增强,减轻细胞的缺血性损伤.
-
人参总皂苷对野百合碱诱导的大鼠右室肥厚及 ERK 通路的影响
目的：观察人参总皂苷（Total Ginsenosides，TG）对野百合碱（Monocrotaline，MCT）所致大鼠右心室肥厚的影响并探讨其与细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路的关系。方法：雄性 SD 大鼠随机分为正常对照组，MCT 模型组，TG 20 mg／（kg·d）、40 mg／（kg·d）、60 mg／（kg·d）剂量组，各组动物均给药18 d。测定各组大鼠的右室肥厚指数（RVHI）、右心重／体重（RVW／BW）；透射电镜观察心肌细胞超微结构的改变；Real time RT －PCR 检测心肌组织 ERK1mRNA 的表达，West-ern blotting 检测心肌组 MKP －1蛋白质的表达。结果：TG 预防给药均使 RVHI、RV ／BW 表达明显降低，改善超微结构损伤，降低心肌组织 ERK1mRNA 和提高 MKP －1蛋白质的表达。结论：TG 能明显改善 MCT 诱导的大鼠右心室肥厚，其抗心肌肥厚作用至少与抑制 ERK1信号转导通路有关。
-
针刺对四氯化碳致肝纤维化大鼠血小板衍生生长因子信号通路的影响
目的:观察针刺对肝纤维化模型大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)信号通路蛋白和mRNA表达的影响,探讨针刺抗肝纤维化的可能机制.方法:将46只SD大鼠分为空白组10只,模型组、非穴组、针刺组,每组12只.采用50％四氯化碳(CCl4)和橄榄油腹腔注射复制肝纤维化模型.针刺“太冲”“期门“肝俞”,电针“足三里”.采用Western blot和Real-time PCR方法检测各组大鼠PDGF信号通路蛋白及其mRNA表达.结果:与空白组相比较,模型组大鼠血清PDGF含量及肝脏PDGF信号通路相关蛋白、mRNA表达明显升高(P＜0.01,P＜0.05)；与模型组相比,针刺组则能够抑制PDGF-β R及其下游细胞外调节蛋白激酶(ERK)蛋白与mRNA的表达(P＜0.01,P＜0.05)；而针刺对Jun细胞核激酶(JNK)、P 38蛋白的表达无明显调节作用(P＞0.05).非穴组与模型组相比,各指标蛋白与mRNA的表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:针刺通过抑制CCl4致肝纤维化大鼠的PDGF信号通路,减少胶原沉积,促进细胞外基质的降解,从而起到治疗肝纤维化的作用.
-
不同强度针刺对神经病理性镜像痛大鼠痛阈和脊髓背角磷酸化细胞外信号调节激酶表达的影响
目的:探讨不同强度针刺干预神经病理性镜像痛大鼠脊髓背角磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)表达的机制.方法:雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、弱刺激手针组、强刺激手针组,每组10只.模型组采用L5脊神经结扎(SNL)法制备神经病理性镜像痛模型;弱刺激手针组于SNL术后3～11d隔日以细针(0.22 mm×13 mm)对双侧“环跳”穴进行针刺干预,幅度180°,频率60次/min,持续捻转2 min后留针,15 min时以相同强度再刺激1次,30 min时出针;强刺激手针组以粗针(0.3mm×13 mm)进行幅度360°、频率180次/min的针刺干预,其它操作与弱刺激手针组相同.于SNL前,SNL后3、7、12d时检测双侧后足机械痛阈.SNL后12d,各组随机取4只大鼠采用Western blot法检测双侧脊髓背角p-ERK的表达情况.结果:SNL后3、7、12d,与空白对照组比较,模型组同侧痛阈明显下降(P＜0.01);与模型组比较,7、12d时强刺激手针组同侧痛阈升高(P＜0.05,P＜0.01).与空白对照组比较,SNL后7、12d时模型组对侧痛阈下降(P＜0.05);与模型组比较,SNL后7、12d时强刺激手针组对侧痛阈升高(P＜0.01).模型组双侧脊髓背角p-ERK表达均高于空白对照组(P＜0.05),强刺激手针组双侧脊髓背角p-ERK表达均低于模型组(P＜0.05).结论:强刺激手针缓解神经病理性镜像痛的机制可能与抑制双侧脊髓背角p-ERK的表达有关.
-
氧化苦参碱保护醛固酮诱导的心肌细胞损伤作用机制分析
目的:研究氧化苦参碱(OMT)抑制细胞外信号调节激酶ERK1/2磷酸化对醛固酮(ALD)诱导心肌细胞损伤的干预作用.方法:采用胰酶消化与差数贴壁分离纯化原代心肌细胞,免疫细胞化学分析心肌细胞纯度.实验分为空白组、模型组(1 ×10-5 mol· L-1 ALD)和OMT高(3.78×10-4 mol· L-1),低剂量(1.89×10-4 mol· L-1)组共4组.运用MTT法检测细胞存活率,LDH外漏法测定细胞膜损伤程度,蛋白免疫印迹法分析p-ERK1/2及ERK1/2蛋白表达,实时荧光定量PCR分析ERK mRNA表达.结果:OMT可抑制ALD诱导的细胞存活率降低和LDH外漏增加;与模型组比较,OMT预处理后p-ERK1/2蛋白表达明显下调.结论:OMT对ALD诱导的心肌细胞损伤具有保护作用,其作用与抑制ERK1/2蛋白磷酸化有关.
-
平喘Ⅰ号对哮喘鼠气道重塑ERK信号转导的干预
目的:观察支气管哮喘模小型鼠在平喘Ⅰ号干预下不同时期细胞外信号调节激酶(ERK)及c-fos的表达变化,探讨其防治支气管哮喘气道重塑的作用及其作用机制.方法:复制小鼠哮喘模型,随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组、平喘Ⅰ号低、中、高剂量组6组,各组包括2、4、6周组.采用呼吸道合胞病毒(RSV)致敏和激发复制哮喘模型.实时定量-聚合酶链反应(Real-time PCR)测定肺组织中c-fos mRNA含量,免疫印迹法(Western blot)测定肺组织中ERK1蛋白表达水平.结果:模型对照组ERK1蛋白含量和c-fos mRNA水平较正常对照组明显增高(P＜0.01);与模型组对照组比较,各干预组显著降低(P＜0.05),平喘Ⅰ号高剂量4周及6周组优于地塞米松组(P＜0.05).结论:ERK信号转导途径在支气管哮喘气道重塑中起重要作用.平喘Ⅰ号可能通过调控ERK信号通路相关因子,缓解气道重塑,改善呼吸道症状.
-
艾灸对大鼠应激性胃黏膜损伤修复及p-ERK1/2蛋白表达的影响
目的:探讨艾灸促进大鼠应激性胃黏膜损伤修复作用及细胞机制.方法:SD大鼠48只随机分为空白组、模型组、艾灸穴位组、艾灸非穴组,每组12只.束缚冷应激法制作应激性胃黏膜损伤大鼠模型,在造模之前,艾灸穴位组选取足三里、中脘、脾俞、胃俞等穴位行艾灸预处理8d.按Guth法计算胃黏膜损伤指数(UI),免疫组化、蛋白质印迹法( Western Blot)检测胃黏膜磷酸化细胞外信号调节激酶1/2( phosphorylating extracellular signal-regulated kinase1/2,p-ERK1/2)蛋白表达.结果:与空白组比较,模型组大鼠UI值显著增高(P＜0.01)、胃黏膜细胞p-ERKl/2蛋白表达加强(P＜0.05,P＜0.01)；与模型组、艾灸非穴组比较,艾灸穴位组大鼠UI值明显下降(P＜0.01)、胃黏膜细胞p-ERK1/2蛋白表达增强(P＜0.01).结论:艾灸足三里、中脘等穴位预处理可促进束缚水浸应激所造成大鼠胃黏膜损伤的修复,其作用机制可能与上调胃黏膜p-ERK1/2蛋白表达有关.
-
电针对慢性应激抑郁大鼠脑内ERK信号转导通路的影响
目的:观察电针对慢性应激抑郁大鼠脑内ERK信号转导通路的影响,探讨针刺抗抑郁分子机制.方法:将32只SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、百优解组,采用慢性应激结合孤养的方法造模.电针干预组选取“百会”“印堂”穴,每次20min,每天1次,共治疗21d.百优解组给予百优解1.8mg/kg灌胃治疗,共21d.用Western blot方法检测海马中Ras、c-raf、p-c-raf、细胞外调节蛋白激酶(ERK)及p-ERK的含量.结果:大鼠海马中Ras、c-raf、p-c-raf、ERK含量各组之间没有显著性差异.海马中p-ERK水平模型组较空白组显著降低(P＜0.05),电针组与百优解组较模型组明显提高(P＜0.05).结论:电针可提高抑郁大鼠脑组织内ERK信号转导通路的主要信号分子的磷酸化水平.这可能是针刺抗抑郁作用分子机制之一.
-
天丝饮中多糖成分对H2O2损伤SH-SY-5Y的保护作用对比研究
目的:基于ERK1/2通路探讨巴戟天多糖提取物(MHP)、菟丝子多糖提取物(CCP)对H2O2损伤SH-SY-5Y细胞的保护作用.方法:采用SH-SY-5Y细胞为神经细胞体外研究模型,CCK8法检测不同浓度(50、100、200、400、800、l 600mg/L) MHP和CCP对细胞活力的影响和对H2O2损伤SH-SY-5Y细胞活力的影响,分为对照组、H2O2组、MHP+H2O2组、CCP+H2O2组、H2O2+MHP+CCP(1∶1)组.运用Western blot方法检测PSD-95、p-ERK和ERK等神经系统相关蛋白表达情况,分为:对照组、H2O2组、MHP+H2O2组、CCP+H2O2组、H2O2+MHP+CCP(1∶1)组和对照组、PD98059组、PD98059+MHP+CCP组、MHP+CCP组.结果:CCK8检测结果显示,与对照组比较MHP、CCP 1 600mg/L可以显著提高SH-SY-5Y细胞活力,对H2O2损伤SH-SY-5Y细胞有明显保护作用,其中MHP+CCP+H2O2(1∶1)组抗氧化损伤能力强.Western blot结果显示,与对照组比较,H2O2可显著抑制PSD-95表达(P＜0.05).与模型组比较,MHP和CCP可显著促进PSD-95表达(P＜0.05),其中MHP+CCP(1∶1)+H2O2组PSD-95表达量高(P＜0.05).MHP+CCP(1∶1)组可显著促进p-ERK表达(P＜0.05).与MPH+CCP组比较,ERK1/2阻断剂PD98059可显著抑制MHP+CCP(1∶1)组的作用(P＜0.05).结论:MHP+CCP(1∶1)应用对H2O2损伤SH-SY-5Y细胞PSD的保护作用好,可能与促进PSD-95蛋白和p-ERK1/2通路蛋白表达有关.
-
综述细胞外信号调节激酶1/2信号通路与肝肾亏虚型膝骨关节炎的相关性
细胞外信号调节激酶(ERK)是丝裂原活化蛋白激酶家族中的一个重要亚型,细胞外信号调节通路在膝骨关节炎发病过程中持续表达,对软骨细胞的增殖、凋亡有重要调节作用.肝肾亏虚为膝骨关节炎的常见证型,而补肝肾中药能有效调控细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的表达以达到治疗膝骨关节炎的效果.研究ERK 1/2与肝肾亏虚型膝骨关节炎的关系,能为揭示该病的发病机制和指导其临床治疗提供新依据和思路.
-
粉防已碱对血管紧张素II诱导心肌肥大及p-ERK1/2表达的影响
目的:观察粉防已碱(tetrandrine, Tet)对血管紧张素II(angiotensin Ⅱ, Ang Ⅱ)诱导的心肌肥大及p-ERK1/2表达及活性的影响.方法:培养新生大鼠心肌细胞,用相差显微镜计数心肌细胞搏动频率、细胞图像分析系统测量细胞体积、考马斯亮蓝法测定心肌细胞总蛋白含量、[3H]-亮氨酸掺入法测定蛋白合成速率作为心肌肥大指标;以ERK免疫沉淀活性试剂盒测定ERK活性,Western-blot测定p-ERK1/2表达.结果:Tet能显著抑制Ang II诱导的心肌细胞搏动频率、体积、总蛋白含量、蛋白合成速率的上升;对p-ERK1/2表达及活性具有剂量依赖性的抑制作用.结论:Tet可以明显抑制Ang II诱导的心肌肥大,机制与降低p-ERK1/2表达及活性有关.
-
华佗再造浸膏对大鼠局灶性脑缺血/再灌注神经发生作用及机制研究
目的:观察华佗再造浸膏(Huatuo Zaizao extractum,HTZZ)对栓线法阻断大脑中动脉(middle cerebral artery occlusion,MCAO)致大鼠局灶性脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)神经发生(neurogenesis)的作用及其机制.方法:健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠55只,随机分为假手术组,MCAO模型组,HTZZ高、中、低剂量组(5,2.5,1.25 g· kg-1).每组11只,灌胃给药,MCAO手术当天开始连续给药7d,每日1次.采用栓线法阻断大脑中动脉,建立大鼠局灶性I/R模型.缺血90 min,再灌注7d后,免疫荧光染色观察缺血侧神经发生,蛋白免疫印记法检测细胞外信号调节激酶(extracellular signalregulated kinase,ERK)和cAMP效应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)表达.酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定血管内皮生长因子(vascular endothelial growth facto,VEGF)和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)水平.结果:90 min MCAO/7 d再灌注半暗带皮层新生神经元(BrdU+-NeuN+)数量增加.伴随这一变化,损伤侧皮层ERK和CREB磷酸化表达升高,VEGF和BDNF水平升高.HTZZ可促进缺血侧新生成熟神经元(BrdU+-MAP-2+)产生,促进ERK和CREB磷酸化,提高VEGF和BDNF水平.结论:HTZZ可促进神经发生,可能是有效中药华佗再造丸促进缺血脑区自修复功能的干预靶点.
-
人参川芎含药血清对氧糖剥夺/复氧培养神经干细胞ERK信号通路和增殖、活力的影响
目的 观察人参、川芎组合对体外培养氧糖剥夺/复氧大鼠神经干细胞细胞外信号调节激酶(ex-tracellular-signal-responsive kinase,ERK)信号通路和增殖、活力的影响.方法 神经干细胞培养分为5组:正常对照组、氧糖剥夺/复氧组、氧糖剥夺/复氧加人参药物血清组、氧糖剥夺/复氧加川芎药物血清组、氧糖剥夺/复氧加人参川芎药物血清组.免疫印迹方法观察ERK及p-ERK蛋白表达水平,5-溴脱氧尿核苷(5-bro-modeoxyuridine,BrdU)掺入法观察神经干细胞的增殖,噻唑蓝(methyl thiazolyl tetraz0lium,MTr)检测细胞活性.结果 ERK磷酸化水平于复氧后10 min、30 min一过性升高,但4h、6h、1d各时间点均降至正常水平；取复氧后6h时间点观察发现,相比氧糖剥夺/复氧组,人参、川芎、人参川芎含药血清均可升高ERK磷酸化水平,促进复氧后1d时神经干细胞的增殖,提高其活力,且人参川芎联合运用优于单用人参和单用川芎.结论 益气活血药物人参川芎可能通过ERK信号通路促进氧糖剥夺、复氧后大鼠神经干细胞的增殖,提高细胞活力,效果优于单用益气药物人参和活血药物川芎.
-
补肾健脑方对血管性痴呆大鼠乙酰胆碱和海马区ERK1和ERK2表达的影响
目的 研究补肾健脑方对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠学习、记忆能力,皮质和海马乙酰胆碱( acetylcholine,ACh)含量,海马CA1区ERK1、ERK2阳性细胞表达的影响,并探讨其治疗VD的可能机制.方法 选取83只大鼠,采用双侧颈总动脉永久结扎法(2-VO)制备VD动物模型.将造模组随机分为模型组、西药组及补肾健脑方高、中(各13只)、低(12只)剂量组.另选取13只大鼠作为假手术组.假手术组及模型组予蒸馏水灌胃(5 mL/kg)；西药组予盐酸多奈哌齐混悬液灌胃(0.52 mg/kg)；中药组予补肾健脑方组低( 14 g/kg)、中(28 g/kg)、高(56 g/kg)剂量灌胃；各组连续干预30天.采用Morris水迷宫实验测定大鼠逃避潜伏期及穿越平台数.比色法测定皮质、海马ACh含量,免疫组化法检测大鼠海马CA1区ERK1、ERK2阳性细胞表达数.结果 用药组大鼠的平均逃避潜伏期总体呈逐渐下降趋势.与假手术组比较,模型组第3～5天逃避潜伏期延长,穿越平台数减少,皮质、海马ACh含量降低,海马CA1区ERK1、ERK2阳性细胞数减少,差异均有统计学意义(P＜0.01).与模型组比较,西药组及补肾健脑方高剂量组第4天逃避潜伏期均缩短,各用药组第5天逃避潜伏期均缩短,穿越平台教及海马CA1区ERK1、ERK2阳性细胞数增加,皮质ACh含量、海马ACh含量升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与补肾健脑方低剂量组比较,高剂量组第4、5天逃避潜伏期缩短,海马CA1区ERK1、ERK2阳性细胞数增加,差异有统计学意义(P＜0.05).与西药组比较,补肾健脑方低、中剂量组皮质、海马ACh含量降低(P＜0.05).结论 补肾健脑方对VD模型大鼠的学习记忆功能减退具有改善作用,可能与提高皮质和海马ACh含量,促进海马CA1区ERK1、ERK2阳性神经元表达有关.
-
川芎素对脑缺血再灌注损伤细胞外信号调节激酶活化的影响
目的:观察大鼠局灶性脑缺血/再灌注后信号转导介质细胞外信号调节激酶(ERKs)的活化情况以及川芎素对其影响.方法:雄性成年SD大鼠45只,随机分成3组:假手术组、对照组和川芎素组(每组15只),分别于缺血时腹腔注射生理盐水4ml,生理盐水4ml和川芎素100mg/kg(川芎素用4ml生理盐水溶解).采用线栓法致大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,在脑缺血再灌注后的2h、6h、12h、24h和72h分别处死大鼠(各组每个时间点3只),将脑组织进行免疫组织化学和病理组织学染色观察.结果:病理组织学显示,缺血再灌注2h,川芎素组缺血侧皮层神经细胞缺血性损伤较对照组减轻.脑缺血诱导ERKs活化,第6h达高峰,并持续到72h.川芎素组ERKs活化明显较对照组增强,而且各时间点ERKs免疫反应阳性细胞数川芎素组显著较对照组增多(P＜0.01).结论:局灶性脑缺血再灌注可诱导缺血脑细胞部分ERKs活化,川芎素干预可使缺血大脑皮质ERKs活化增强,减轻皮层细胞的缺血性损伤.
-
雌激素通过ERK-FAK信号通路调节MCF-7乳腺癌细胞失巢凋亡
目的：探讨雌激素（E2）对MCF-7乳腺癌细胞抗失巢凋亡能力的影响及细胞外信号调节激酶（ERK）-局部黏着斑激酶（ FAK）通路在其中的作用，以加深对E2促癌作用信号机制的认识。方法用MCF-7乳腺癌细胞，聚甲基丙烯酸羟乙基酯（ poly-Hema）涂层培养细胞诱导失巢凋亡， E2刺激及MEK和FAK抑制剂预处理细胞。用蛋白印迹法检测ERK和FAK磷酸化，台盼蓝染色细胞计数法检测细胞存活力， Hoechst荧光染色法验证细胞凋亡。结果用Poly-Hema悬浮培养可显著降低细胞存活力（ P＜0.01）， E2处理则可明显增强悬浮培养细胞的存活力（ P＜0.05），同时减少细胞凋亡；E2可引起ERK和FAK磷酸化，MEK抑制剂则可显著抑制E2诱导的ERK和FAK磷酸化，并使E2处理的悬浮培养细胞存活率下降57.48％（ P＜0.01）；FAK抑制剂能明显抑制FAK和ERK的磷酸化，同时使E2处理的悬浮培养细胞存活率下降53.59％（ P＜0.01）。结论 E2可明显提高MCF-7乳腺癌细胞对抗失巢凋亡的能力，该细胞保护效应可能与E2激活胞内ERK-FAK信号活动有关。
