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体外构建新型化妆品检测用皮肤Inspectskin Ⅰ的初步研究
目的 探讨ES源表皮干细胞(ESC)与高分子材料构建人工皮肤Inspectskin Ⅰ的方法,为化妆品皮肤毒性检验替代模型奠定基础.方法 采用嵌入式培养法,先将3-羟基丁酸-co-3-羟基戊酸共聚物(PHBV)支架与原代小鼠成纤维细胞共培养5 d构建真皮,再于表面放置ESC细胞,气-液界面培养7～10 d,形态学和β1整合素、CK10、CK19免疫组化观察.结果成纤维细胞可在真皮支架内粘附,ESC细胞可在支架表面增殖分化形成含基底层、棘层和角化层的复层表皮结构,免疫组化表明基底层以上细胞中表达CK10明显增多,基底层有些细胞仍呈β1整合素和CK19阳性.结论 Inspectskin Ⅰ替代皮肤模型是由ESC细胞分化形成的角化复层表皮结构和PHBV真皮结构共同构成的全层皮肤模型.
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体外皮肤刺激模型的生物标志研究进展
皮肤刺激试验是人类健康相关产品危险性评价的常见项目,传统皮肤刺激试验采用实验动物进行,成本高周期长,给动物造成一定程度的痛苦.近年来,多种替代动物试验的体外模型被开发和应用.体外试验主要通过定量检测细胞活性和代谢变化的生物标志物预测体内的效应,应用广泛的生物标志物是细胞活性、炎性因子、胞质酶等,在生物技术的推动下,新的特异性标志物被开发和验证.
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皮肤致敏性动物替代模型的研究进展
随着人们对生存环境及动物保护的热切关注,自动物实验的减少(reduce)、优化(refine)和替代(replace)这一3R原则提出以来,生命科学研究尽量避免使用传统的试验对象---动物,以器官培养、细胞培养、人工器官的构建等等取而代之.在皮肤科领域,各种接触皮肤的外用药物及各类化妆品除了对皮肤起到治疗和美化作用以外,人们十分关注它们是否会给皮肤造成伤害;另外,过敏性皮肤病是十分常见,传统的检测皮肤致敏性的方法主要是以豚鼠为研究对象的大值实验、封闭型斑贴实验和开放型斑贴实验,以及人体斑贴实验.本文就近年来引起了广泛关注的皮肤致敏性动物替代模型进进了综述.
